Силки: Недопустимое название — Викисловарь

Содержание

Силки — Pathfinder по русски

Школа: Превращение ,

Круг: друид (druid) 3, следопыт (ranger) 3

Сотворение

Время сотворения: 3 раунда

Компоненты: S, V, DF

Эффект

Дальность: касание

Цель: круг из обычной веревки, лианы или ремня диаметром до 2 футов + 2 фута/1 УЗ

Длительность: пока не сработает или не будет разрушено

Спасбросок: Нет

Описание

С помощью этого заклинанияЗаклинания (spells) могут выполнять самые разнообразные задачи, от причинения вреда врагам до возвращения мертвых к жизни. В описании заклинаний сказано, на что они могут быть нацелены, каковы их эффекты, как им можно противостоять или сопротивляться.

… Читать далее… вы создаете силки, работающие как магическая ловушка. Их можно сделать из лианы, ремня или веревки. Заколдованный предмет сливается с местностью: чтобы его найти, нужно успешно пройти проверку Внимания со СЛСложность (Difficulty Class (DC)): Всякий раз, когда существо предпринимает какое-либо действие, успех которого не гарантирован, необходимо совершить проверку (чаще всего — проверку навыка). Чтобы действие увенчалось успехом, результат проверки должен быть больше или равен показателю сложности этого действия…. Читать далее… 23, обладая способностью поиск ловушек. Один конец силка сворачивается в петлю, которая захватывает ногу любого существа, наступившего на эту ловушку. Если рядом находится крепкое гибкое дерево, силки можно прикрепить к нему. Дерево от этого наклоняется, выпрямляясь, когда ловушка срабатывает, нанося 1d6 урона пойманному существу и поднимая его в воздух за попавшую в силок конечность. Если такого дерева поблизости нет, то силки просто затягиваются на существе, не причиняя урона, но делая его опутанным.

Силки являются магическими. Чтобы выбраться из них, пойманному надо пройти проверку Изворотливости со CЛ 23 или проверку Силы со CЛ 23, что требует действияДействие (Action): В течение раунда боя каждый его участник может совершить одно или несколько действий. Использование способностей, сотворение заклинаний и совершение атак — все это требует для своего осуществления действий. Правила описывают несколько видов действий, таких как: основное, сопутствующее, быстрое, свободное и действие полного хода…. Читать далее… полного хода. Силки имеют КБКласс Брони (Armor Class (AC))Этот параметр имеет каждое существо в игре. Его значение показывает, насколько трудно попасть по этому существу в бою. Как и с прочими параметрами, чем КБ выше, тем лучше…. Читать далее… 7 и 5 пунктов прочности. Если из силка успешно выбрались, его петля распускается, а заклинаниеЗаклинания (spells) могут выполнять самые разнообразные задачи, от причинения вреда врагам до возвращения мертвых к жизни.

В описании заклинаний сказано, на что они могут быть нацелены, каковы их эффекты, как им можно противостоять или сопротивляться…. Читать далее… прекращает действовать.

Силки — копировальный шов

Силки — старый, проверенный и точный способ переноса меловых линий на симметричных деталях кроя.
Складываем две одинаковые детали лицевыми сторонами друг к другу. Точно совмещаем все срезы и скрепляем обе детали булавками. Накладываем выкройку и мелом рисуем вытачки. Дополнительно вокруг каждой вытачки оба слоя скрепляем булавками.

В иглу вдергиваем нить в два сложения, завязываем узелок. Начинаем сшивать оба слоя точно по меловой линии швом «назад иголка».

Стежок не затягиваем, а оставляем петельку, высотой 1.5-2 см. Если нить закончилась, на её конце завязываем узелок. Шить новой нитью продолжаем за один — два стежка до окончания предыдущей. Все концы нитей оставляем длиной 2-2. 5 см, на всех завязываем узелок на конце.

Когда все меловые линии будут прошиты, на одной детали они будут выглядеть в виде петелек, на второй в виде шва «назад иголка».

Удаляем булавки, аккуратно раздвигаем обе детали, натягивая нити, и разрезаем их посередине.

Вытачки и швы, нанесенные на ткань при помощи силков, лучше всего сразу прошить на машинке, потому что разрезанные ниточки со временем могут выпасть из ткани.
При переносе линий с выкройки на ткань, между меловой линией и истинной образуется небольшой зазор — 1-2 мм из-за толщины мелка.

Этот зазор нужно учитывать при сшивании и прокладывать машинную строчку не внутри вытачки, а снаружи, не прихватывая силки.

Если не планируется перешивать шов, силки можно удалить.

Статья подготовлена специально для сайта Сезон по фотоматериалам Zvezdopad.

 

Большой выбор тканей от мировых производителей в интернет-магазине Сезон. Цены приятно удивят: они ниже, чем в реальном магазине. Кликнув на превью с образцом, вы попадёте в нужный отдел магазина.

Ловушки и ловля зверей с их помощью. Силки.

 

Мелкую живность легче всего добывать с помощью ловушек, а не обычной охоты. В этом случае особое значение приобретает выбор приманки и места установки ловушки. Пищи может не хватать, но то небольшое количество, которое используется в качестве приманки, может компенсировать все ваши жертвы.

Будьте терпеливы. Животные будут настороженны до тех пор, пока не привыкнут к ловушкам. Тогда они обязательно попадут в них. Необходимо регулярно проверять ловушки. Если этого не делать, агония животного продлится долго или же оно сможет освободиться, перегрызя конечность. Кроме того, его могут съесть хищники. Установите как можно более широкую сеть ловушек. Собирайте дичь и вновь настораживайте ловушки, при необходимости исправляя их и снимайте те из них, которые постоянно остаются пустыми. Определенное количество неудач следует принимать как должное, но если приманка исчезла, а механизм ловушки не сработал, то это свидетельствует о том, что он либо чересчур тугой, либо приманка плохо закреплена. Повторно настораживая ловушку, проверьте то и другое. Ловушки следует устанавливать на дорожках следов и на тропках, протоптанных дичью. Ищите естественные узости, то есть такие места, где следы проходят под препятствием. Не устанавливайте ловушки рядом с логовом животного — необычные предметы настораживают его.
Учтите также, что потревоженные животные спасаются бегством и, чтобы скрыться, выбирают кратчайший путь. В этом случае сработает даже самая грубая и плохо замаскированная западня. Принципы действия ловушек Падающие ловушки работают по ударному принципу — они бьют, пронзают либо давят попавшую в них жертву. Силки удушают. Согнутые молодые деревца поднимают добычу вверх и она свободно качается в воздухе. Чем выше деревце, тем эффективнее оно поднимает животное. В сети добыча запутывается. Некоторые ловушки сочетают в себе два и более вышеуказанных принципов действия.
Правила устройства ловушек.

·  Старайтесь не нарушать окружающую обстановку. Не затаптывайте следы, оставленные животными, и не оставляйте следов своего пребывания в данном месте.

·  Скрывайте запах. Старайтесь как можно меньше прикасаться к ловушкам и, если это возможно, пользуйтесь перчатками. Не устанавливайте ловушку из соснового дерева в зарослях орешника. Маскируйте человеческий запах, окуривая приманку дымом костра.

·  Соблюдайте маскировку. Свежие срезы дерева замазывайте грязью. Силки, установленные на земле, маскируйте подручными естественными материалами — ветками и листьями.

·  Ловушки должны быть прочными. Пойманное животное будет стараться освободиться. В этом ему поможет любой дефект ловушки. Силки Силки можно изготавливать из шнурка, веревки, шпагата, но лучше всего — из мягкой проволоки, сделанной из цветного металла. На одном конце проволоки делается петелька и в нее пропускается другой конец, который надежно крепится к вбитому в землю колышку, камню или дереву. Силок представляет собой петлю-удавку, которая затягивается вокруг горла мелкой дичи либо вокруг лап крупной. Проволочный силок можно устанавливать над землей с помощью небольших веточек, которые, помимо этого, позволяют удерживать петлю приподнятого силка в открытом виде. Для ловли кроликов силок следует устанавливать на расстоянии длины ладони от препятствия.

Ловушка-платформа Устанавливаеться в небольшой низине на протоптаной следовой дорожке. Силки распологаются на платформах с обеих сторон ловушки. Платформа из палок или жесткой коры лежит на нижней планке. Верхняя планка заходит в выемки. Когда платформа опускаеться, срабатывает собачка фиксатора и дичь оказываеться пойманной за ногу. Использование простого силка для ловли мелкой дичи. — Сделайте петпю такого диаметра, чтобы в нее проходил кулак. — Установите силок на высоте четырех пальцев над землей и на ширине ладони от препятствия. — Надежно закрепите силок. — При необходимости, подоприте петлю веточками. Изготавливая натяжной силок, используйте молодое деревце для подъема вверх пойманной дичи. В этом случае ловушка будет более эффективной, животное лишается шансов освободиться, а хищники не смогут добраться до него. Для этой цели идеально подходит лещина.
Пружинный силок.
Хорошее средство для ловли кроликов и лис. Устанавливается на тропе возле естественной узости, образованной буреломом или камнями. В собачке (б) сделайте вырез, в который будет входить зубец фиксирующего колышка (а). Забейте фиксатор в землю. Прикрепите силок к собачке, а ее в свою очередь привяжите веревкой к верхушке согнутого деревца. Когда сработает собачка, дерево распрямится, и дичь взлетит в воздух. Ловушка для белок. Одна из наиболее эффективных ловушки для поимки белок. Мясо белки напоминает на вкус цыпленка и в местах где они распространены, это хороший источник для пополнения запасов пищи. Ловушка состоит из маленькой петли, обертываемой вокруг дерева или палки. Следует установить их несколько (3 или 4), на каждой палке, которая будет опираться на деревья. Ловушка из белого проводова сделана на рисунке для наглядности, при изготовлении настоящей ловушки лучше использовать провод, который будет малозаметен. Причина для использования в ловушке провода, а не шнура или веревки, проста, во первых вы сможете придать вашей ловушке необходимую форму, а во вторых, при затягивании петли провод не даст ей ослабиться, тогда как петля из веревки, при ослаблении напряжения, наверняка распуститься.
Белки — ленивые существа. Вместо прыжка с земли, ей будет гораздо проще и удобнее взобраться на дерево, по установленной вами палке (наклонной плоскости). Выберите наиболее подходящие деревья. Подходящие деревья — это те, под которые много вероятной пищи для белок, например желудей, или те, где есть видимое гнездо белки. Для наглядности на картинке показана жердь с закрепленными ловушками в так сказать «голом виде». Фактически же, используеться жердь или молодое деревце покрытое корой, с дополнительной маскировкой из подручных средств провода ловушки. Как видно из примера, первая ловушка закреплена начиная со второй половины опоры, это сделано для того, чтобы дать белке возможность для разбега перед первой ловушкой. Белка видит ловушки, как просто прутья. Когда белка оказываеться внутри петли, или петли начинает на ней затягиваться, она думает, что это кто-нибудь или что-нибудь, пробующее схватить ее. Инстинкт вынуждает белку спрыгнуть с опоры, чтобы спастись, вследствии чего она вешаеться. Вот почему лучше закреплять провод (ловушку) провод вокруг жерди (опоры) свободно. Это позволяет ловушке проворачиваться под весом белки, чтобы подвесить ее под опорой.

Силки — фанфик по фэндому «Малефисента»

Набросок из нескольких строк, еще не ставший полноценным произведением
Например, «тут будет первая часть» или «я пока не написала, я с телефона».

Мнения о событиях или описания своей жизни, похожие на записи в личном дневнике
Не путать с «Мэри Сью» — они мало кому нравятся, но не нарушают правил.

Конкурс, мероприятие, флешмоб, объявление, обращение к читателям
Все это автору следовало бы оставить для других мест.

Подборка цитат, изречений, анекдотов, постов, логов, переводы песен
Текст состоит из скопированных кусков и не является фанфиком или статьей.
Если текст содержит исследование, основанное на цитатах, то он не нарушает правил.

Текст не на русском языке
Вставки на иностранном языке допустимы.

Список признаков или причин, плюсы и минусы, анкета персонажей
Перечисление чего-либо не является полноценным фанфиком, ориджиналом или статьей.

Часть работы со ссылкой на продолжение на другом сайте
Пример: Вот первая глава, остальное читайте по ссылке…

Если в работе задействованы персонажи, не достигшие возраста согласия, или она написана по мотивам недавних мировых трагедий, обратитесь в службу поддержки со ссылкой на текст и цитатой проблемного фрагмента.

Австралийский силки терьер — описание породы, характер, обучение, уход, чем кормить — породы собак

Силки терьеры дружелюбные, умные, энергичные и уверенные собаки. Они верны охотничьим корням, поэтому любят искать след норных животных и не упустят шанса поймать мышь. Несмотря на скромные размеры, из этих терьеров получается бдительный охранник, который быстро подаст сигнал тревоги, если рядом окажется непрошенный гость.

Силки терьеры преданные хозяину и рады проводить время с людьми. Они могут быть тенью хозяина и ходить за ним по пятам из комнаты в комнату.

Стоит помнить, что на темперамент влияет ряд обстоятельств: наследственность, социализация и дрессировка. Если за последние два отвечает хозяин, то о первом стоит позаботиться на стадии выбора щенка и желательно познакомиться с его мамой, чтобы понимать, каким вырастет щенок. 

Стандарты породы

Австралийские силки терьеры компактные, приземистые и крепкие питомцы. Главным отличием этой породы от йорков считается шерсть — она более гладкая, мягкая и с прямым пробором по холке на обе стороны.

В окрасе допустимы голубой и ржаво-коричневый варианты. Более насыщенные оттенки ценятся выше, а вот серебристый и белый недопустимы. Щенки до 18 месяцев иногда бывают черными, но потом происходит перецвет.

По высоте в холке кобели достигают 23–26 см, суки чуть мельче. Идеального веса для этой породы нет, он оценивается пропорционально росту.

Уход за шерстью австралийского терьера непростой. Собаку рекомендуется вычесывать мягкой щеткой дважды в неделю. Если этого не делать, то образуются колтуны. Купать собаку надо не так часто — раз в 4–6 недель.

Ногти рекомендуется стричь раз в месяц, уши и глаза чистить по мере необходимости.

Условия содержания

Несмотря на игрушечный внешний вид, это настоящий охотничий терьер, которому нужны активные прогулки и упражнения. Если на улице плохая погода, физическую нагрузку можно компенсировать играми дома.

Когда дело доходит до дрессировки, австралийские силки терьеры превращаются в усидчивых и внимательных учеников. Занятия стоит выстраивать последовательно, чтобы было четкое руководство к действиям и они не самовольничали.

Силки терьер прекрасно ладит с детьми и другими животными, но рекомендуем заводить такую собаку в семью с ребенком старше 10 лет, которые уже знают, как обращаться с собакой.

Слабые стороны здоровья

У австралийских силки терьеров крепкое здоровье, но возможны генетические отклонения. Перед покупкой собаки убедитесь, что у них нет предрасположенности к вывиху надколенника и патологии глаз. Уши силки терьера следует регулярно проверять на наличие признаков инфекции, а зубы чистить от налета и не допускать образования камня. Средняя продолжительность жизни австралийского силки терьера составляется 11-15 лет.

Корм для каждой собаки подбирается индивидуально. Главное правило — количество корма давать пропорционально физическим нагрузкам. Силки терьеры хитрые и умеют выманивать лишний лакомый кусочек, поэтому не поддавайтесь на их голодный взгляд.

История породы

Силки терьер появился в Австралии в 1880-х годах, когда заводчики скрестили йоркширских терьеров с местными австралийскими терьерами, получив собаку с длинной и шелковистой шерстью. Только в 1926 году появился окончательный стандарт породы, который актуален и по сей день. Изначально эту породу называли сиднейским австралийским терьером, но в 1955 присвоили название австралийского силки терьера.

Изначально эти собаки охотились на крыс и даже на змей, но в итоге стали прекрасными домашними собаками-компаньонами.

Силки терьер по кличке Сима снялась в фильме «Дублер» с Александром Реввой в главной роли.

Как сделать силок из веревки самому? |

Случается, что люди, отправляющиеся на активный отдых, например в лес или на озеро, не могут вернуться назад к цивилизации. Если Вы попали в такую ситуацию, то Вам неизбежно придется искать пропитание. Сделать это можно при помощи простейших ловушек или силков.

Основное преимущество силков заключается в том, что на охоту не нужно затрачивать особых усилий и времени. Нужно лишь изготовить силок, поставить и подождать, пока дичь сама не угодит в ловушку.

Сделать простейший силок своими руками можно следующим образом. Берется проволока (веревка, леска и т. п.) и на одном конце делается петля. В эту петлю пропускается другой конец проволоки, который крепится к дереву или бревну.

Большинство силков работают по принципу удушения добычи, либо же удержания ее на месте. Сделать его можно из подручного материала: подойдет шнурок, ремень веревка, леска, но лучше всего подходит мягкая проволока. Располагаются ловушки рядом с норой или на звериных тропах.

Получившаяся петля устанавливается над тропой, около 10см. от земли, при необходимости ее можно подпереть палочками. Проходящая мимо дичь попадает в силок и удушает себя. Подходит такая ловушка для ловли мелкой и средней дичи.

 Другой, более совершенный силок можно изготовить при помощи небольшого гибкого деревца. В землю вбивается колышек с зарубом. Из веревки делается знакомая нам уже петля, другой конец веревки привязывается к вершине деревца.

Посередине этой веревки необходимо привязать второй колышек с зарубом, и совместить колышки друг с другом. Колышки удержат дерево в согнутом положении. При прохождении дичи через петлю срабатывает замок и животное оказывается поднятым в воздух.

Если Вы попали в экстремальную ситуацию, такие простейшие приспособления позволят Вам добыть себе пищу. А на сытый желудок всегда проще справляться с проблемами.

Метки: Самоделки, Самоспасение

Оставить комментарий

Вам может быть интересно:

Фразео-семантическое своеобразие оборотов со словом «Силки» (на материале текстов классической и современной русской литературы) Текст научной статьи по специальности «Языкознание и литературоведение»

Филология

УДК 8

00! 10. 21661/Г-118588 Д.В. Андрианова

Фразео-семантическое своеобразие оборотов со словом «силки» (на материале текстов классической и современной русской литературы)

Аннотация

В статье на материале текстов классической и современной русской литературы и публицистики исследуются семантические и стилистические изменения в значении устойчивых оборотов со словом «силки» на протяжении XVШ-XXI вв. В числе прочего автор обосновывает положение о том, в текстах духовного содержания и некоторых текстах художественной литературы слово «силки» традиционно использовалось в качестве библеизма, с чем связана его ярко выраженная отрицательная коннотация, полностью утраченная в современных контекстах употребления.

I

Ключевые слова: силки, семантика, значение слова, переносное значение, фразеологизм, Национальный корпус русского языка.

D.V. Andrianova

Phraseosemantic peculiarities of idioms with the word «silki» (snares) (a case study of Russian classics and modern literature texts)

Abstract

This article explores semantic and stylistic meaning changes of idioms with the word «silki» (snares) during XVIII-XXI centuries on the basis of Russian classics and modern literature texts and publicistic writing. It is proved that the word «silki» (snares) was used as a biblical expression in ecclesiastic and some fiction texts, this explanes its strong negative connotation, which is out of use in up-to-date contexts.

| Keywords: «silki» (snares), semantics, word meaning, figurative meaning, idiom, Russian National Corpus.

Во фразеологических словарях русского языка А. И. Молоткова [8], А.И. Федорова [7], «Большом словаре русских поговорок» В.М. Мокиенко [4] мы не найдем устойчивых выражений со словом силки (от сило), в то время как анализ контекстов с этим словом в Национальном корпусе русского языка (далее — НКРЯ) показывает, что в текстах ХУШ-ХХ1 вв. обороты попасть в силки, расставлять силки и под. активно употребляются в переносном значении.

В своем прямом значении силок представляет собой петлю из «тонкой прочной нити или веревки, которая своим свободным концом прикреплена к дереву или камню и устанавливается» на звериных тропах для ловли птиц и мелких зверей [3]. Это значение лежит в основе сравнительных оборотов, в которых что-то

(чаще всего сердце взволнованного, влюбленного человека) или кто-то сравнивается с птицей, пойманной в силки. Не девушку он видел, а мечту, и сердце его забилось, словно птица в силке (А.Е. Зарин, Кровавый пир). В голове напуганной, угодившей в силки птахой, отзываясь острой болью в груди, билась мысль: «Вот оно… вот оно… то самое… началось!..» (М. Алексеев, Драчуны). Этот яркий афористичный образ повторяется в нескольких стихотворениях И.А. Крылова: «Что ользы по свету таскаться? Иль с другом хочешь ты расстаться? Бессовестный! когда меня тебе не жаль, Так вспомни хищных птиц, силки, грозы ужасны, И всё, чем странствия опасны!», «Не из клетки ль на свободу Выпорхнул в счастливый час, И, еще силка страшась, Робко так поешь природу?», «Попался! Не провели бы так меня: За это я ручаюсь смело». Ан, смотришь,

РИ|!о!оду

тут же сам запутался в силок. И дело!» [6]. Рискнем предположить, что именно благодаря меткому перу И.А. Крылова метафорический образ птицы в силке и само слово силки активно используются и развиваются в современном русском языке. В текстах современной художественной литературы с образом птицы, бьющейся в силке, обычно сравнивается не сердце человека, а предметы и др. Бравурная мелодия взмывала к ажурным перекрытиям и металась в стекле и металле, словно птица в силках (Д. Колодан и К. Шаинян, Затмение).

Примечание: здесь и далее, если не обозначено особо, цитаты приводятся по НКРЯ.

Если сравнительные обороты со словом силки не имеют отрицательного оттенка значения и даже могут иметь романтическую окраску, то обороты со словом силки в текстах ХУШ-Х1Х вв. могут иметь ярко выраженную отрицательную коннотацию, связанную с отсылкой к библейскому тексту, в котором силки соотносятся с образом дьявола, улавливающего с их помощью души людей. И душа Нисона печалилась и трепетала. И князь тьмы, увидав душевное смятение юноши, распростер перед ним силки и сети и изловил его (С. Ан-Ский, Меж двух миров). В этом значении слово силки понимается как библеизм [2], то есть восходит к Библии и «активно употребляется в языке русских классиков в современной литературе» [1, с. 17].

Целый ряд контекстов со словом силки в рассматриваемом значении показывает, что образ завлекания в силки часто связывается с женщиной, которая соблазняет мужчину, стремится с помощью различных интриг женить его на себе. Не хочу, чтоб о вашей дочери сплетни распускали… хотя сама же она силки расставила! — Как так — силки? Говори толком. -Очень просто: первая поцеловала, первая завлекла. Прежде, сами знаете, я внимания на нее не обращал… (А.И. Эртель. Гарденины, их дворня, приверженцы и враги). Можно предположить, что одним из возможных факторов, обусловивших активное употребление подобных оборотов, стало его употребление в известном фрагменте текста Экклезиаста: «горче смерти женщина, потому что она — сеть, и сердце ее — силки, руки ее — оковы; добрый пред Богом спасется от нее, а грешник уловлен будет ею». В то же время необходимо подчеркнуть, что в художественной литературе негативная коннотация библейского образа чаще всего отсутствует.

Помимо семантики любовной интриги устойчивые обороты расставлять силки, поймать в силки могут иметь значение «привлечь, подчинить своему влиянию», а оборот попасть в силки обычно имеет значение «оказаться под чьим-то влиянием, в чьей-либо власти». Хотя сам Меншиков не поддавался прямо влиянию ни своей жены, ни тех женщин, ласками которых он пользовался, но тем не менее и в его суровое правление женщины усердно плели «придворное кружево», и если

не могли опутать его сетью, то все же порой расставляли силки, в которые он попадался (Е.П. Карно-вич, Придворное кружево). Все обстоятельства были подстроены так ловко, и следователи с прокурорами попались в расставленные для них Смердяковым тенета и силки так глупо, что действительно был заподозрен, предан суду и осужден только Митя, а Смер-дяков остался вне всякого подозрения и не был предан суду (М.А. Антонович. Мистико-аскетический роман).

В литературе XIX в. и современных текстах в основе переносных значений оборотов со словом силки обычно лежит образ попавшей в силки птицы или мелкого зверька, а сами силки становятся символом несвободы как духовной и интеллектуальной, так и физической. В этом отношении характерно сочетание устойчивых оборотов с абстрактными, отвлеченными существительными: попасть в силки науки, истории, проблем, реальности. Жизнь таила множество силков (С. Шаргунов, Чародей). Режим нашел подход и к молодым, заманив их в силки бездуховности и вседозволенности (М. Игорев, Три аршина и земной шар).

Отдельного упоминания заслуживает оборот поймать/ловить в силки применительно не к человеку и его чувствам, а к абстрактным понятиям, который встречается в современной публицистике. Еще одну попытку поймать российскую реальность в силки кинокадра предпринял Джонни ОРайли — ирландец, живущий в России уже шесть лет (Вячеслав Суриков, Живописец, исчезающий в глубине пейзажа) [Режис-сер]Стуруа снова ловил в силки атмосферу философической игры. Молодое поколение театра, высыпав на сцену в живописных лохмотьях, напоминало не столько брехтовских «веселых нищих», сколько коренных неунывающих тбилисцев, которым жизнь уготовила тяжелое испытание (Стуруа канонический и не очень). Из приведенных примеров становится понятно, что в современных текстах отрицательная коннотация, свойственная устойчивым оборотам с этим словом ранее, может полностью утрачиваться.

Обобщая результаты проведенного исследования, стоить отметить, в первую очередь, тот факт, что многочисленные примеры употребления устойчивых оборотов ловить/поймать в силки, ставить/расставлять силки («приманивать/приманить, обаять, подчинить своему влиянию»), попасть в силки («подпасть под чье-то, влияние, оказаться во власти кого- или чего-либо») и др. в переносном значении свидетельствуют об их фразеологической природе. Проследив примеры употребления слова силки в устойчивых оборотах, в состав которых оно входит, в художественной литературе ХУШ-ХХ1 вв. , можно отметить ряд особенностей в их значениях и стилистической окраске на протяжении этого периода. В текстах русской словесности и художественной литературы ХУШ-Х1Х вв. слово силки и устойчивые обороты с ним могли восприниматься как библеизмы и в соответствующих контекстах иметь

Иегасйуе Баепсе | 13 • 2017 117

Филология

выраженную отрицательную коннотацию в силу своей символической связи с дьяволом. В художественной литературе Х1Х-ХХ1 вв. характерно использование устойчивых фразеологических оборотов со словом силки применительно к характеристике любовных интриг или каких-либо козней, которые имеют своей целью привлечь, обаять, подчинить кого-либо своей власти.

В художественных и публицистических текстах XX-XXI вв. устойчивые обороты со словом силки начинают использоваться не только в связи с человеком и его чувствами, но и по отношению к каким-либо абстрактным понятиям, полностью утрачивая в таких контекстах свою отрицательную коннотацию.

Литература

1. Балакова Д. Из библейской мудрости. Z biblickej müdrosti / Д. Балакова, Х. Вальтер, В.М. Мокиенко. — Biblische Weisheiten Грайфсвальд, 2015. — 344 с. [Электронный ресурс]. — Режим доступа: http://www.phraseoseminar. slovo-spb.ru/documents/iz-biblejskojmudrosti-2015.pdf (дата обращения: 26.02.2017).

2. Библейская энциклопедия Брокгауза / Под ред. Ф. Ринекера и Г. Майера. — Paderborn: Christliche Verlagsbuchhandlung Paderborn, 1999. — 1226 с. [Электронный ресурс]. — Режим доступа: https://azbyka.ru/ otechnik/Spravochniki/biblejskaja-entsiklopedija-brokgauza/ (дата обращения: 26.02.2017).

3. Большой толковый словарь русских существительных / Под ред. Л.Г. Бабенко. — М.: АСТ-Пресс, 2008. — 864 с. [Электронный ресурс]. — Режим доступа: http://noun_ru.academic.ru/9279 (дата обращения: 26. 02.2017).

4. Мокиенко В.М. Большой словарь русских поговорок / В.М. Мокиенко, Т.Г. Никитина. — М.: Олма Медиа Групп, 2007. — 748 с.

5. НКРЯ — Национальный корпус русского языка [Электронный ресурс]. — Режим доступа: http://www.ruscorpora. ru (дата обращения: 26.02.2017).

6. Русская виртуальная библиотека [Электронный ресурс]. — Режим доступа: http://rvb.ru/18vek/krylov/toc.htm (дата обращения: 27.02.2017).

7. Федоров А.И. Фразеологический словарь русского литературного языка конца XVIII-XX вв.: В 2 т. Т. 2 / Под ред. А.И. Федорова. — Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1991.

8. Фразеологический словарь русского языка / Сост. Л.А. Войнова [и др.]; под ред. А.И. Молоткова. — 6-е изд., испр. и доп., с послесл. А.И. Молоткова. — М. : Астрель: АСТ, 2001. — 510 с.

Определение

в кембриджском словаре английского языка

陷阱 , 羅 網, 圈套 , 陷阱, (用 羅 網 、 陷阱) 捕捉 , 誘捕…

Узнать больше

snare, fælde, fange i en fælde…

Узнать больше

กับ ดัก, ดัก โดย ใช้ กับ ดัก…

Узнать больше

cái bẫy, cái lưới, ánh bẫy…

Узнать больше

die Schlinge, mit einer Schlinge fangen…

Узнать больше

陷阱 , 罗 网, 圈套 , 陷阱, (用 罗 网 、 陷阱) 捕捉 , 诱捕…

Узнать больше

западня, ловушка…

Узнать больше

определение малого барабана по The Free Dictionary

ВОРОНА, пойманная в ловушку, молила Аполлона освободить его, дав клятву поднести немного ладана в его алтарь.

Высокие мачты, держащие белый холст, расставленные, как ловушка для улавливания невидимой силы воздуха, постепенно выходят из воды, парус за парусом, ярд за ярдом, становясь большими, пока, под возвышающейся структурой ее механизмов , вы воспринимаете крохотную крошечную частичку ее корпуса.

Другой, кажется, черпает свою силу из самой души мира, своего грозного союзника, которого держат в послушании самые хрупкие узы, как свирепый призрак, пойманный в ловушку из чего-то даже более тонкого, чем пряденый шелк.

что эмиссар, которого я принял за честного человека, пришел и заложил для меня гнусную ловушку.

«Вы только что сделали мне мучительный упрек, сударь», — продолжал король; «Вы сказали, что один из моих эмиссаров был в Ньюкасле, чтобы устроить вам ловушку, и что, в скобках, не может быть понят М.

. Это либо выпало из-под пера писателя по чистому незнанию, либо было тщательно указано там, где кажется, что оно служит ловушке, и я твердо убежден, что последнее объяснение является правильным. Что ж, наконец-то я нашел это земноводное существо, это земноводное существо, называемое джентльменом-торговцем; и в качестве справедливой чумы моей глупости я был пойман в ту самую западню, которую, я могу сказать, поставил для себя. Мисс Бриджит Оллуорти (так звали эту леди) очень правильно задумала очарование личности в женщина должна быть не лучше ловушек для себя и других; и все же она была так осторожна в своем поведении, что ее осторожность была настолько настороженной, как если бы у нее были все ловушки, которые когда-либо были расставлены для всего ее пола.Следовательно, принц, сознательно вынужденный усыновить зверя, должен выбрать лиса и льва; потому что лев не может защитить себя от силков, а лиса не может защитить себя от волков. любящие ловушки, в которых она пыталась удержать его. Что лучше — открыть ловушки и ловушки жизни юному и легкомысленному путнику или прикрыть их ветвями и цветами? это состояние: они навешивают на них меч и сто страстей.

Что вам нужно знать о .

.. Малом барабане

Эта статья изначально была опубликована в выпуске журнала Drum Business за январь / февраль 2014 г.

Бен Мейер

Малые барабаны — самый узнаваемый голос в ударной установке. Практика студийных барабанщиков, использующих разные малые барабаны для каждой песни, чтобы изменить общий голос установки, демонстрирует эту теорию в действии. У некоторых плееров есть фирменные звуки малого барабана, которые сразу их идентифицируют, тогда как другие стремятся к менее отчетливым тонам, которые смешиваются с музыкой.Барабанщики также имеют тенденцию использовать свой собственный малый барабан при игре на бэклайне, что еще раз демонстрирует решающую роль инструмента в создании отличного артистического голоса. Вот что вам нужно знать, чтобы выбрать барабан своей мечты.

Во-первых, давайте посмотрим на различные части малого барабана и на то, для чего они служат.

Ракушка

Оболочка не только придает барабану большую часть его общего вида, но и оказывает огромное влияние на звук. Корпуса обычно изготавливаются из отдельных или смешанных пород дерева, включая клен, березу, красное дерево, бубингу, ясень и тополь, или металлов, включая латунь, бронзу, сталь и алюминий. Более смелые материалы, такие как углеродное волокно, титан, акрил и даже стекло, довольно распространены, как и многие редкие местные породы дерева со всего мира.

В то время как большинство деревянных корпусов изготавливаются из нескольких тонких слоев, образующих жесткую оболочку за счет тепла и сжатия, другие изготавливаются из одного толстого, гнутого паром слоя.Некоторые изготовители нестандартных барабанов также используют клепки или сегменты дерева, которые склеиваются вместе, чтобы сформировать раковину. Усиливающие кольца иногда добавляются к верхней и нижней части более тонких оболочек и могут быть изготовлены из той же породы дерева, что и остальная часть оболочки, или из другого материала.

Поиск того, какой тип малого барабана использовался на нескольких из ваших любимых записей, может помочь вам определить некоторые звуки, которые будут воспроизводить разные снаряды. На YouTube и на сайтах большинства производителей ударных есть множество видеороликов с демонстрациями малого барабана.Для создания отличного звука малого барабана требуется гораздо больше, чем просто композиция оболочки, но это, безусловно, основа идеального барабана.

Обода / Обручи

Наряду с некоторыми аномалиями, литые под давлением металлические обручи с тремя фланцами — это то, что сегодня можно встретить на большинстве малых барабанов. Между ними есть несколько различий, помимо эстетики. Литые под давлением обручи создают ощущение большей прочности, особенно при громких римшотах. Они также имеют тенденцию делать звук барабана меньше и воспроизводить меньше обертонов.И наоборот, трехфланцевые обручи позволяют барабану звучать дольше, воспроизводить больше обертонов и повышать чувствительность малого барабана. Эти различия объясняются большей гибкостью и меньшим общим контактом материала с барабаном. Производители часто подбирают пяльцы к дизайну оболочки в зависимости от характеристик оболочки, но в конечном итоге это вопрос личных предпочтений.

Деревянные обручи — еще один вариант, который обычно нагревает звук барабана и изменяет спектр производимых им обертонов.Они не выдерживают тяжелых римшотов, как металлические обручи, но являются хорошей эстетической и тональной альтернативой. Yamaha, Taye, PDP, Gretsch и другие предлагают серийные модели с деревянными обручами.

Проушины и натяжные стержни
Конструкция выступов

может повлиять на общий звук барабана, но не так сильно, как это было в прошлые годы, из-за достижений в дизайне. Ламповые ушки позволяют меньше металла контактировать с корпусом, чем разрезные или длинные ушки, таким образом улучшая сустейн и обеспечивая немного другой звук.Существует множество изобретательных конструкций с разъемными ушками, и они часто являются наиболее узнаваемым визуальным аспектом барабанов конкретного производителя. Стоит обратить внимание на несколько интересных новаторских дизайнов: выступ Yamaha Hook, выступ O’Neill Kwik, выступ Ego Quick Release и ушки Quick Action.

Время от времени используются и другие методы натяжения барабанной пластинки, такие как канатные системы, но натяжные стержни по-прежнему являются обычным выбором для разработчиков барабанов. Сами стержни довольно стандартизированы, хотя DW использует другое количество резьбы, чем все остальные, поэтому помните об этом при продаже стержней на замену.

Доступны несколько классных замков с натяжными стержнями, если у вас возникли проблемы с откатыванием проушин при сильном движении. Решить эту проблему могут Rimshot-Locs, Tuner Fish или Gibraltar Lug Locks.

Провода для малого барабана

Эти тонкие и хрупкие нити придают малому барабану характерный звук, взаимодействуя с головкой на стороне малого барабана, когда барабан застревает. В малых барабанах ударных обычно используются петли, сделанные из спиральной проволоки, также известные как быстрые петли. Они придают барабану яркий звук, очень чувствительны на всех динамических уровнях и не заглушают сустейн, как это делают другие конструкции проводов.

В малых барабанах для оркестровых / концертных групп обычно используется кабель или имитация проволоки для более темного звука с меньшим сустейном. В малых барабанах Marching и Scottish pipe band используется синтетическая внутренняя проволока из пластика и иногда имеется второй сетчатый фильтр, который контактирует с пластиной теста для экстремального отклика малого барабана и очень сухого звука.

Если вы хотите обновить существующий барабан, обратите внимание на провода вторичного рынка и попробуйте наборы из тридцати или сорока нитей, если вам нужен более широкий звук малого барабана.

Фильтр

Это приспособление удерживает петли напротив головки на стороне ловушки и позволяет точно регулировать натяжение проволоки. Несмотря на то, что существует множество инновационных конструкций, все сетчатые фильтры включают в себя какой-либо механизм для включения / выключения тросов, точную регулировку натяжения и затыльник для закрепления ловушек на стороне корпуса, противоположной сетчатому фильтру. Trick, Ngage, DW и Dunnett предлагают уникальные сменные фильтры, которые можно легко установить на большинство барабанов.

Стойки для ловушек

Эти тонкие еще важные особенности контуры разреза (деревянные раковины) или изогнутые (металлические оболочки) в опорной кромки на стороне малого барабана оболочки, чтобы позволить провода, чтобы лежать против головы. Без них ловушки были бы неконтролируемыми и шумными. Некоторые малые барабаны, особенно старинные барабаны, более глубокие, чем другие. Хотя точные характеристики зависят от производителя, они должны быть на всех малых барабанах.

Голов

В этой категории нет недостатка в вариантах, но вот несколько рекомендаций, которые помогут подобрать лучшие головки для ваших музыкальных потребностей и долговечности.Большинство музыкантов используют на малых барабанах либо однослойные, либо двухслойные пластики с пластиковым покрытием, в то время как некоторые предпочитают предварительно заглушенные модели, чтобы сократить потребность в демпфирующих материалах. Стандартные модели от Remo включают Coated Ambassador, Coated Emperor, Emperor X, Coated Controlled Sound (CS) Reverse Dot и Coated Pinstripe. Популярные модели Evans включают G1 Coated, Genera HD Dry, EC Coated и EC Reverse Dot Coated. Aquarian’s Texture Coated, Studio-X и Triple Threat также являются популярным выбором.

Глушитель

Muffling играет ключевую роль в окончательном звучании малого барабана.Некоторые игроки не используют их, а некоторые заглушают свои ловушки до смерти. RTOM Moongel, клейкая лента, Drum Magnetic и RemO — все это хорошие продукты, которые стоит попробовать.

Крепление

Существует множество вариаций классической трехногой подставки для малого барабана, а некоторые вспомогательные малые барабаны поставляются с монтажными кронштейнами в виде L-образной ручки. Существует также множество подвесных моделей, которые подходят для небольших малых барабанов. Позиционирование очень важно для большинства игроков, поскольку оно помогает им играть стабильно от концерта к концерту, поэтому не забудьте добавить качественную стойку или крепление при покупке нового малого барабана.

Теперь давайте более внимательно рассмотрим некоторые из различных типов малых барабанов, которые могут вас заинтересовать.

Концертный / оркестровый

Эти барабаны, как правило, с деревянными кожухами и металлическими тросовыми петлями. Также доступны сетчатые фильтры, которые предлагают индивидуально выбираемые кабельные, быстрые и синтетические элементы малого барабана, такие как Grover G3. Стандартными являются насадки из телячьей кожи с покрытием или из телячьей кожи, и игроки часто используют приглушенный звук.

Ударная установка

В этих барабанах часто используются быстрые малые барабаны с множеством вариантов пластиков. Однослойный тесто с покрытием, с несколькими полосками клейкой ленты или Moongel, — отличное место для начала для обычной игры. Возможны как деревянные, так и металлические барабаны разных размеров, так что нет правильного или неправильного. 14-дюймовый барабан глубиной от 5 до 6,5 дюймов — отличный выбор, поскольку он подходит для большинства музыкальных жанров.

Маршевый

Эти ударные с высоким натяжением глубже, чем оркестровые или ударные, и обычно имеют головки из кевлара, чтобы они могли выдерживать экстремальные условия тяжелой игры, а также колебания температуры и влажности при использовании на открытом воздухе.Синтетическая проволока для кишок встречается на большинстве маршевых ловушек, а оборудование обычно изготавливается из легкого алюминия. Большинство современных маршевых ловушек имеют свободно плавающую конструкцию, при которой оборудование не касается корпуса ни в какой точке. Это помогает защитить снаряд от повреждений из-за высокого напряжения головы, используемого при маршевой перкуссии.

Трубная лента

Эти барабаны идентичны большинству маршевых малых барабанов, за исключением того, что они оснащены вторым набором малых барабанов, которые контактируют с нижней стороной пластика.Это дает очень сухой, четкий и очень отзывчивый звук.

Поле

Эти барабаны в основном используются для оркестровых, концертных и перкуссионных ансамблей. Созданные так, чтобы напоминать звук военных барабанов девятнадцатого и начала двадцатого веков, эти модели обычно имеют больший диаметр и гораздо большую глубину, чем типичные оркестровые малые барабаны. Синтетический кишечник или кабельные малые барабаны являются стандартными, и на барабанах обычно играют на более низких строчках.В настоящее время Pearl предлагает две выдающиеся полевые модели.

Пикколо

Эти барабаны имеют более мелкую оболочку, чем стандартные малые барабаны, и используются в основном в установках. Обычная глубина пикколо колеблется от 3 дюймов до 4,5 дюймов. Эти размеры оболочки имеют тенденцию иметь более высокий шаг и более быстрый отклик, чем барабаны глубиной 5 дюймов или больше, и, как правило, производят меньше корпуса и ударов.

Сопрано / Попкорн

Подобно малкам пикколо, эти барабаны имеют нестандартные размеры корпуса.Обычные раковины малого барабана для сопрано имеют глубину от 5 до 7 дюймов и диаметр от 10 до 12 дюймов. Как правило, эти барабаны обладают более высоким звуком и большей плотностью, чем у пикколо. Петли для попкорна часто бывают меньшего размера.

Мини / Микро

Самые маленькие и самые высокие барабаны из всей партии, эти барабаны могут достигать 6 дюймов в диаметре и всего несколько дюймов в глубину. Некоторые из них имеют традиционную конструкцию с двумя головками, в то время как другие имеют только одну пластину и используют веерный малый барабан, который контактирует с нижней стороной пластика.Эти барабаны также можно использовать для создания убедительных тембральных тонов, когда малые барабаны отключены.

Техническое обслуживание

Хорошая идея — иметь под рукой основы смены пластиков и настройки. Вот несколько советов.

  1. Удалите старую головку, равномерно ослабив натяжение вокруг барабана, чтобы избежать деформации пялец.
  2. Очистите голень от пыли, грязи и сажи внутри корпуса и вокруг краев подшипника. Потратьте несколько секунд, чтобы нащупать кромку подшипника, чтобы убедиться в отсутствии дефектов.Серьезная вмятина на крае подшипника может сделать настройки более трудной.
  3. Отцентрируйте новую головку на корпусе и вручную затяните все выступы перед использованием барабанного ключа. Это предотвратит зачистку и поможет вам настроить пластину более равномерно.
  4. Затягивайте каждую проушину не более чем на пол-оборота за раз, используя схему перекрещивания. Когда головка достигнет среднего натяжения, поместите барабан на пол, колени или стол, чтобы заглушить противоположную головку, и начните постукивать пальцем по краю головки возле каждого натяжного стержня.Выровняйте высоту тона каждого ушка, пока не получите ровную звонкую гармонику без шатких обертонов. Нажатие твердо на голове между строями поможет гарантировать, что пластик правильно прижат к краю подшипника.

Как правило, вы настраиваете пластину на стороне малого барабана на отклик малого барабана, а на верхнюю часть — на ощущение и высоту звука. Настройте натяжные стержни по обе стороны от ложа малого барабана на пол-оборота слабее, чем остальная часть пластика, для лучшего отклика малого барабана. Настройте и приглушите верхнюю пластину по вкусу, сохраняя одинаковую высоту звука на всех ушках.

Подведение итогов

Не забудьте учесть обычные дополнения, такие как дополнительные головки, рукоятки, глушители, запасные натяжные стержни и футляры. Ознакомьтесь со спецификациями малых барабанов ваших любимых исполнителей и протестируйте аналогичные инструменты, головы и аксессуары, соответствующие вашему бюджету. Удачи и удачной игры на барабанах!

И обязательно ознакомьтесь с другими нашими функциями «Что вам нужно знать о» здесь.

Что это за звуки? | Обучение музыке (бета)

Послушайте этот паттерн:

Теперь послушайте этот и обратите внимание на разницу:

Примечания такие же; мы только что изменили звуки. Но это придает каждой версии свой уникальный характер.

Четыре типа звуков в этих сетках являются одними из наиболее часто используемых звуков ударных во многих стилях как акустической, так и электронной музыки. Вот еще немного о них:

Удар

Также называется бас-барабаном , акустический бас-барабан производится педалью с прикрепленным битером и воспроизводится ногой барабанщика. Электронные версии этого звука иногда делаются более продолжительными, чем относительно короткий звук, производимый физическим барабаном.

Сравните электронный и акустический бочки:

Хлопок

Это звук, когда один или несколько человек хлопают в ладоши. Сегодня электронные стилизованные версии этого звука (например, тот, который используется здесь) гораздо более распространены, чем настоящие записи хлопков.

Малый барабан

Малый барабан ударяется палочкой барабана и издает короткий яркий звук. Набор проволок (называемых малыми барабанами ) натянут на головке барабана в нижней части барабана.Вибрация нижней головки барабана относительно малых барабанов производит характерный для барабана «трескучий» звук.

Хлопки, малые барабаны и другие «резкие» или «яркие» звуки часто аналогичным образом используются в паттернах ударных.

Сравните электронный хлопок и звук акустического малого барабана:

Закрытая шляпа и открытая шляпа

Это два разных звука, создаваемых инструментом под названием hihat . Хихаты — это пара маленьких тарелок, установленных на подставке.Верхняя тарелка прикреплена к штанге, которая поднимается и опускается с помощью ножной педали. Хихаты «закрыты», когда ударник опущен вниз, что прижимает тарелки друг к другу. Они «открываются», когда ступня барабанщика поднята, а тарелки не соприкасаются. На акустической ударной установке существует огромный диапазон состояний между открытым и закрытым положением, и каждое состояние создает свой тип звука.

Попробуйте все электронные звуки вместе:

Попробуйте все акустические звуки вместе:

Вы обратили внимание…?

Если вы играете закрытый хихат, в то время как звук открытого хихата все еще слышен, закрытый звук «побеждает» и немедленно прекращает открытый звук. Это соответствует тому, как hihats ведут себя в реальном мире; хай-хэт не может быть открыт и закрыт одновременно. Так работают хайхаты на всех уроках.

Frontiers | Многогранная роль белков SNARE в слиянии мембран

Введение

Биологические мембраны отделяют внутреннюю часть клетки от окружающей среды и позволяют разделиться на части внутри клетки.Они участвуют во множестве клеточных событий, например, в передаче клеточных сигналов, экзоцитозе и ионной проводимости. Слияние мембран — это процесс, с помощью которого два первоначально разделенных липидных бислоя сливаются в единое целое. Это универсальный биологический процесс в жизни, который участвует во многих клеточных событиях, например, в вирусной инфекции, оплодотворении и внутриклеточном движении. Слияние важно для коммуникации между клетками и между разными внутриклеточными компартментами (Jahn et al., 2003; Chernomordik and Kozlov, 2005).Спонтанному слиянию мембран в живых организмах противодействуют силы отталкивания между приближающимися бислоями. Эти силы возникают в результате электростатического отталкивания одинаково заряженных поверхностей мембраны и отталкивания гидратации. Более того, необходимо преодолевать латеральное натяжение межслойной границы (Chernomordik et al., 1987; Kozlovsky et al., 2002). Энергия, необходимая для преодоления энергетического барьера для слияния биологических мембран, обеспечивается специализированными гибридными белками, например, при экзоцитозе энергия возникает в результате сборки белков SNARE в «стержневой» α-спиральный пучок, называемый транс -SNARE комплекс (см. Рисунок 1) (Jahn et al., 2003; Ризо и др., 2006; Ян и Фасшауэр, 2012).

Рис. 1. Топология комплекса SNARE, состоящего из синаптобревина (синий), синтаксин-1A (красный) и двух белков SNAP-25 (sn1 и sn2, оба зеленого цвета) (PDB: 1SFC, Sutton et al. , 1998) .

Экзоцитоз — сложный процесс, состоящий из нескольких отдельных стадий. Во время «стыковки» синаптический пузырек и плазматическая мембрана вступают в контакт (см. Рис. 2А). Следующий этап «праймирования» делает везикулы способными к слиянию.Слияние мембран затем инициируется кальцием и состоит из нескольких этапов, показанных на рисунках 2B – E. Хотя роль образования комплексов SNARE в обеспечении экзоцитоза широко признана, молекулярные механизмы, лежащие в основе действия SNAREs на отдельных стадиях экзоцитоза, все еще обсуждаются. Некоторые экспериментальные исследования даже предполагали необходимость SNARE только на этапах стыковки и прайминга с независимым от SNARE этапом слияния (Tahara et al., 1998; Ungermann et al., 1998). С другой стороны, ряд недавних экспериментов пролил свет на прямое участие белков SNARE в слиянии мембран, а образование и стабилизация различных промежуточных продуктов слияния были приписаны конформационным изменениям и динамике молекул SNARE.

Рис. 2. Схематическое изображение процесса слияния мембран по промежуточному пути стебля, которому предшествует стадия стыковки во время экзоцитоза. (A) Начальное взаимодействие между цитозольными доменами синаптобревина (красный) и синтаксин (фиолетовый). Энергия, выделяющаяся при образовании комплекса транс-SNARE, используется для приведения мембран в непосредственное сближение (преодоление сил отталкивания между отрицательно заряженными везикулами) и их частичной дегидратации. После образования комплекса SNARE везикулы находятся в «купированном» состоянии. (B) При срабатывании зарождающиеся гидрофобные контакты между приближающимися мембранами устанавливаются между расширяющимися липидами. (C) Затем образуется стебель, и липиды в наружных листочках начинают смешиваться. (D) Удлинение стебля приводит к образованию и удлинению полудиафрагмы (HD). (E) Внутренние створки противоположных мембран начинают перемешиваться, что сопровождается образованием пор. Далее пора расширяется до тех пор, пока либо из двух маленьких не образуется одна большая везикула, либо пока все липиды из маленькой везикулы не будут полностью включены в плоскую мембрану-мишень.

Хотя макроскопические особенности экзоцитоза можно различить, наблюдая за высвобождением содержимого или смешиванием липидов, динамические микроскопические промежуточные структуры во время слияния мембран трудно или невозможно определить экспериментально. Однако структурную и динамическую информацию с атомистическим разрешением можно альтернативно получить с помощью моделирования молекулярной динамики.

В этом обзоре обобщаются последние результаты экспериментов и моделирования, касающиеся слияния и экзоцитоза, управляемого SNARE, в различных системах, от модельных мембран до нативной мембранной среды, проведенных исследованиями in vivo, in vitro и in silico .Особое внимание уделяется трансмембранным якорям SNARE и их взаимодействию с мембраной хозяина. Кроме того, кратко рассмотрен известный механизм регуляции с помощью вспомогательных белков.

1. SNARE во внутриклеточном экзоцитозе

Белки SNARE составляют большое суперсемейство белков, включающее более 60 членов как в клетках млекопитающих, так и в клетках дрожжей. У них есть эволюционно консервативный участок спиральной спирали, содержащий 60–70 аминокислот, который называется мотивом SNARE (Fasshauer et al., 1998; Kloepper et al., 2007). Мотивы SNARE в синаптобревине и синтаксине связаны с пептидными трансмембранными доменами (TMD) на С-конце через короткую линкерную область. Эти два белка SNARE встроены в свои соответствующие мембраны посредством закрепления TMD. Третий партнер по взаимодействию, SNAP-25, состоит из двух мотивов SNARE, которые соединены линкером и прикреплены к плазматической мембране множеством пальмитоильных хвостов.

1.1. SNARE Motif

Долгое время считалось, что мотивы SNARE в значительной степени неструктурированы, когда белки SNARE находятся в мономерных формах.Однако недавние ЯМР-исследования нативных белков SNARE подтвердили внутреннюю α-спиральную конфигурацию внутри области мотива SNARE даже в мономерной форме (Ellena et al. , 2009; Liang et al., 2013). Его вторичная структура, возможно, модулируется свойствами мембраны, такими как кривизна (Liang et al., 2014), и находится под влиянием трансмембранного домена (Han et al., 2016b). При экзоцитозе сборка мотивов SNARE в гомо- или гетеро-олигомерные пучки приводит к спиральной конфигурации (Fasshauer et al., 1997; Fiebig et al., 1999; Margittai et al., 2001). Последовательная сборка мотивов SNARE, инициированная N-концевым доменом в направлении C-концевого домена, приводит к образованию плотных спиральных пучков с необычайной стабильностью, называемых комплексом SNARE (Poirier et al., 1998; Sutton et al., 1998) ( см. рисунок 3). Образование комплекса сопровождается высвобождением энергии, которое используется для сближения мембран (Lu et al., 2008; Hernandez et al., 2012). Комплекс trans -SNARE состоит из четырех спиралей, которые выровнены параллельно, причем синаптобревин и синтаксин вносят вклад в один мотив SNARE каждый, тогда как SNAP-25 вносит вклад в два. Прогрессивное сворачивание комплекса SNARE к трансмембранным якорям приводит к преобразованию из транс- — в цис- -конфигурацию, в которой белки SNARE полностью свернуты и находятся в одной мембране (Stein et al., 2009) (см. Рисунок 3). Было высказано предположение, что этот переход будет функционировать на заключительной стадии слияния мембран, способствуя образованию и расширению поры слияния. Соответствующий механизм можно смоделировать с помощью крупномасштабного моделирования (CG) (Risselada et al., 2011). Застегивание мотива SNARE хорошо охарактеризовано двумя последовательными застежками-молниями от N-конца к C-концу мотива SNARE, а именно в направлении трансмембранных сегментов (Li et al., 2007, 2014; Gao et al. ., 2012; Rizo, 2012; Min et al., 2013; Lou, Shin, 2016). Это мнение было подтверждено экспериментами по слиянию липосом in vitro, в которых слияние было заметно ускорено для стабилизированного бинарного комплекса SNAP-25 / синтаксин (Pobbati et al., 2006). Полагают, что исследования промежуточных продуктов вдоль упорядоченного пути сборки во время образования комплекса SNARE и их роли на разных стадиях слияния синаптических пузырьков позволяют очертить специфические роли разных регионов мотива SNARE. Используя высокое разрешение силы оптического пинцета, единая сборка комплекса SNARE может быть связана с разными стадиями слияния синаптических пузырьков (Lu et al., 2008). Самопроизвольное сворачивание в N-концевой области регулирует праймирование пузырьков путем наложения мембран.За праймингом следует быстрое движение к C-концевому домену и, наконец, образование и расширение пор слияния (Gao et al., 2012; Rizo, 2012). Застежка-молния контролируется регуляторными белками, такими как синаптотагмин, в быстром экзоцитозе, запускаемом Ca 2+ , при высвобождении нейромедиатора. Возможно, регуляторные белки увеличивают локальную кривизну мембраны (Martens et al., 2007; Hui et al., 2009; McMahon et al., 2010) и тем самым дестабилизируют мембрану. Функциональное значение различных областей мотива SNARE было дополнительно косвенно подтверждено экспериментами in vitro, / in vivo, слияния с использованием либо усеченных SNARE, либо обработки нейротоксином, который предотвращает начальное смыкание SNARE на N-конце (Chen et al. ., 2001; Siddiqui et al., 2007).

Рис. 3. Структурная модель комплекса SNARE, встроенного в липидный бислой POPC . Комплекс цис- -SNARE (PDB: 3IPD) на стадии пост-слияния включает два белка SNAP-25, один синтаксин и один белок синаптобревин. Последние два SNARE состоят из цитоплазматического домена (мотивы SNARE), короткого линкерного домена и трансмембранного домена (TMD). Двухслойные головные группы показаны в виде сфер, а гидрофобные хвосты — в виде палочек. Комплекс SNARE на стадии предварительного слияния показан на верхней правой панели.Здесь TMD белков синаптобревина и синтаксина расположены в соответствующих им мембранах хозяина.

1,2.

Linker Region

Линкерная область, которая соединяет мотив SNARE и трансмембранный домен (TMD), была охарактеризована как механизм передачи силы, который направляет стресс, возникающий при сборке комплекса цитозольного ядра, к поверхности раздела мембран и, таким образом, запускает слияние мембран. (Knecht, Grubmüller, 2003; Jahn and Scheller, 2006; Jahn and Fasshauer, 2012).Линкер, в частности его положительно заряженные остатки, также необходим для смешения липидов и перехода от гемифузии к полному слиянию (Hernandez et al., 2012). Расширение линкерной области за счет вставки дополнительных аминокислот обычно снижает эффективность слияния. Это уменьшение показало зависимость от длины и подразумевает тесную связь между мотивом SNARE и TMD в аппарате слияния (Van Komen et al., 2005; Deák et al., 2006; Kesavan et al., 2007; Zhou et al. ., 2013). Предполагается, что жесткость линкера играет важную роль в предотвращении рассеивания стресса (Risselada et al., 2011). Более того, линкеры как синаптобревина, так и синтаксина являются полностью спиральными в комплексе пост-слияния цис -SNARE (Stein et al. , 2009). Жесткий и частично структурированный линкер был обнаружен в исследовании молекулярной динамики мономерного синтаксина (Knecht and Grubmüller, 2003). Однако жесткий линкер может ограничивать переориентацию одной молекулы SNARE, создавая препятствия для дальнейшего сближения контактирующих мембран в состоянии до слияния (Risselada et al., 2011; Han et al., 2016б). Более того, замена остатков в линкерной области остатками, разрушающими спираль (Gly / Pro), повышающая гибкость, мало влияла на эффективность слияния (McNew et al., 1999; Van Komen et al., 2005). Растет количество доказательств того, что как жесткость, так и гибкость линкеров важны для слияния, требуя тонкого баланса, дополнительно регулируемого TMD, а также другими белками и липидами (Knecht and Grubmüller, 2003; Han et al., 2016b). Таким образом, обеспечивается расширенная ориентационная выборка мотива SNARE с минимальным рассеянием энергии.Для синаптобревина вторичная структура и конформационная гибкость юкстамембранной области (JMR), как было обнаружено, управляются зависимостью от последовательности жесткостью или гибкостью TMD (Han et al. , 2016b) (см. Рисунок 4). Кластер заряженных остатков в JMR, как сообщается, важен для способности к слиянию за счет соединения пузырьков и плазматических мембран в начале слияния (Williams et al., 2009). Было показано, что взаимодействие между этой многоосновной областью и поверхностью анионной мембраны способствует межслойному контакту, нарушая порядок воды (Tarafdar et al., 2015). Таким образом, внутреннее молекулярное сдерживание в линкерной области, вероятно, влияет на эффективность слияния между противостоящими мембранами, приводя к очевидному снижению прайминга во время экзоцитоза. Кроме того, праймирование также хорошо регулируется двумя тандемными остатками триптофана (W89W90) в прилегающей к мембране области путем модификации электростатического потенциала на поверхности мембраны (Borisovska et al., 2012). Важность этих двух остатков в контроле глубины внедрения sybII в мембрану и ее динамики была подчеркнута в недавнем исследовании ЯМР (Al-Abdul-Wahid et al., 2012). Пара W89W90 на границе раздела мембран, по-видимому, служит зажимом слияния в событиях слияния, запускаемых Ca 2+ (Fang et al. , 2013).

Рисунок 4. Пространственная выборка прилегающей мембранной области (JMR) в зависимости от первичной последовательности TMD синаптобревина . В левом столбце показан график контурной плотности конфигурационной выборки JMR (положения центра масс) в двухслойной плоскости (x-y). Синяя точка отмечает положение TMD. В правом столбце показан вид сбоку отобранного конформационного пространства области прилегающей мембраны (после установки TMD).На правой панели образцы трех копий пептида (последовательность, показанная в Таблице 1) показаны разными цветами, а именно желтым, синим и фиолетовым соответственно. Выборки регистрировались в интервале времени от 500 до 1000 нс атомистического моделирования (подробности см. В Han et al., 2016b).

1,3. Трансмембранный домен SNARE (TMD)

1.3.1. Требования к длине TMD для Membrane Fusion

Функция SNARE TMDs при слиянии мембран была широко исследована, но все еще обсуждается, учитывая различные выводы как экспериментальных, так и имитационных исследований. Чтобы определить возможную роль SNARE TMDs в слиянии мембран, трансмембранные домены SNAREs были заменены различными липидными якорями, мутированы или частично усечены. Переход от гемифузии к слиянию, как сообщается, блокируется в SNARE-обеспечиваемом слиянии протеолипосом, когда C-концевая половина SNARE TMD удаляется (Xu et al., 2005). Точно так же серия усеченных мутантов, описанных для sybII TMD, была в значительной степени неспособна поддерживать нейросекрецию в клетках PC12 (Fdez et al., 2010) и смешение липидов было значительно снижено, а слияние полностью уменьшилось у SNARE-имитаторов при укорочении TMD (Wehland et al., 2016), указывая тем самым на строгие требования к длине трансмембранного домена.

Таблица 1. Выравнивание последовательностей синаптобревина дикого типа из Rattus norvegicus и его мутантов TMD, использованных в Han et al. (2016a) и на основе экспериментальных исследований Dhara et al. (2016) .

Это представление дополнительно подтверждается тем фактом, что вакуолярный R-SNARE Nyv1p с липидным якорем, охватывающий только один листок, приводил к небольшому смешиванию липидов при слиянии липосом, если не были задействованы другие физиологически вспомогательные белки (Xu et al. , 2011). Более того, замена трансмембранного домена SNARE на липидный якорь, как было показано, ингибирует слияние вакуолей (Rohde et al., 2003) или реконструированных протеолипосом (Chang et al., 2016). В последнем исследовании были протестированы три различные конструкции слияния, а именно запускаемый Ca 2+ экзоцитоз плотного ядра везикул, спонтанный экзоцитоз синаптических везикул и усиленное синаптотагмином Ca 2+ слияние липосом, опосредованное SNARE. Однако было показано, что SNARE с более длинными пренильными якорями, охватывающими обе створки, способны управлять перемешиванием липидов в той же степени, что и нативные SNARE (McNew et al., 2000). Также недавно сообщалось, что TMD служит неспецифическим мембранным якорем в управлении вакуолярным слиянием, подразумевая, что липидного якоря достаточно для слияния (Pieren et al., 2015). Напротив, для геранилгеранилированных TMD дрожжевых SNARE наблюдался ингибирующий эффект на экзоцитоз. Тем не менее, слияние можно частично предотвратить путем добавления LPC в форме перевернутого конуса к внутренней створке, что приводит к положительной кривизне, которая способствует образованию пор слияния. Это открытие указывает на активную роль TMD в топологии мембраны (Grote et al., 2000). Кроме того, было обнаружено, что заякоренные в липидах белки SNARE (синтаксин и синаптобревин) без TMDs спасают спонтанное слияние синаптических везикул так же эффективно, как SNARE, заякоренные в TMD, в физиологических условиях, хотя и менее эффективно для экзоцитоза, запускаемого Ca 2+ . функциональная роль SNARE TMDs в экзоцитозе (Rizo and Xu, 2013; Zhou et al., 2013). Прямое доказательство важности TMD для слияния мембран было получено в исследовании in vitro слияния реконструированных липосом, .При этом было обнаружено, что синтетические пептиды, имитирующие гидрофобные ядра SNARE TMD, лишенные растворимых доменов, поддерживают слияние мембран (Langosch et al., 2001; Hofmann et al., 2006). Напротив, чистые липосомы или липосомы, содержащие олиголейцины, показали незначительную активность слияния. Эти исследования указывают на критическую зависимую от последовательности функцию SNARE TMD в слиянии мембран, облегчая как гемифузию, так и полное слияние.

Взятые вместе, в условиях in vitro TMD должен охватывать оба слоя, чтобы поддерживать переход от гемифузии к слиянию. In vivo , различные молекулярные механизмы, вероятно, могут заменять (некоторые из) функции якорей TMD при слиянии мембран.

1.3.2. Конформационная гибкость TMD связана с производительностью Fusion

Было предположено, что способность SNARE TMD способствовать экзоцитозу тесно коррелирует с его конформационной гибкостью (Dhara et al., 2016). Мера последнего определяется содержанием его вторичной структуры в растворе. TMD SNARE дикого типа (сравните таблицу 1 для последовательностей sybII TMD) принимают смесь α-спиральной и β-листовой структуры в растворе, тогда как мутант с повышенной спиральностью показывает пониженную активность слияния (Langosch et al., 2001). Dhara et al. (2016) сообщили о четкой зависимости между конформационной гибкостью и активностью слияния для различных мутантов synaptobrevin TM. Сходным образом мутация, которая увеличивает стабильность спирали TMD G-белка VSV (вируса везикулярного стоматита), ингибирует слияние мембран (Dennison et al. , 2002). Конформационная гибкость TM-спирали была приписана присутствию β-разветвленных остатков (Ile / Val), о чем свидетельствует избыточная экспрессия этих остатков в SNARE TMD, а также в вирусных слитых белках (Cleverley and Lenard, 1998; Langosch et al. ., 2001, 2007). Тот факт, что β-разветвленные остатки способствуют гибкости TMD, был дополнительно подтвержден исследованием спектроскопии электронного парамагнитного резонанса (EPR) на TMD дрожжевого SNARE (Sso1p), которое показало усиленную динамику движения в C-концевом конце TMD, состоящем из фрагмента остатков валина (Zhang and Shin, 2006). De-novo Дизайн серии слитых пептидов, содержащих смесь остатков, способствующих спирали, лейцина и остатка, способствующего β-слою, валина, показала сильную корреляцию между относительным соотношением валина в последовательности TM и гибкость спирали.Последний может быть дополнительно усилен введением разрушающих спираль остатков Gly / Pro (Hofmann et al., 2004). Повышенная конформационная гибкость привела к повышенной активности слитых пептидов, подтверждая представление о том, что структурная гибкость является решающей для ТМ пептидов, чтобы они могли управлять слиянием мембран.

Хотя гибкость TMD наделена структурными особенностями с обратимым преобразованием спирали / пластинки в растворе, маловероятно, что этот переход происходит внутри гидрофобной мембраны.Гибкость скорее отражается в кратковременном разворачивании водородных связей в основной цепи (Langosch et al., 2001, 2007; Langosch and Arkin, 2009; Han et al., 2016b). Однако остается неясным, как гибкая TMD обеспечивает слияние мембран. Было высказано предположение, что динамика позвоночника может нарушать структуру окружающих липидов и, таким образом, способствовать смешению липидов (Langosch et al., 2007; Langosch and Arkin, 2009). Позднее эта модель была подтверждена анализом обмена водород / дейтерий на трансмембранных спиралях SNARE в растворе и в мембране.Эти эксперименты продемонстрировали, что конформационная динамика SNARE TMDs коррелирует с их способностью способствовать смешиванию липидов (Stelzer et al., 2008). Альтернативно, гибкий TMD может стабилизировать промежуточную неламеллярную структуру на поздней стадии реакции слияния или способствовать образованию поры слияния, как было предложено Dennison et al. (2002).

1.3.3. Незаряженный C-конец SNARE TMD инициирует образование пор слияния

Несмотря на хорошо задокументированную функциональную важность SNARE TMD в облегчении образования стебля и состояний гемифузии, роль SNARE TMDs в обеспечении полного слияния все еще плохо изучена.Переход от состояния гемифузии к полному слиянию инициируется образованием поры слияния, сопровождающейся слиянием внутренних створок как мембран везикул, так и мембран-мишеней, с последующим расширением пор и высвобождением содержимого (Черномордик и Козлов, 2008; Джексон и Чапман, 2008 г.) ; Ризо, Розенмунд, 2008). Формирование поры слияния, по-видимому, связано как с механическим напряжением при сборке комплекса SNARE, так и со смещением С-конца трансмембранного сегмента (Ngatchou et al., 2010; Рисселада и Грубмюллер, 2012).

Критическая роль SNARE TMD в обеспечении перехода от гемифузии к слиянию была продемонстрирована в нескольких исследованиях. Было высказано предположение, что формирование поры слияния инициируется движением незаряженного С-конца sybII TMD во внутреннюю часть мембраны, вызванным силой натяжения, возникающей в результате застегивания молнии комплекса SNARE, как было показано с помощью крупнозернистого моделирования (Lindau et al. , 2012) (см. Рисунок 5). Добавление заряженных остатков к С-концу SNARE TMD ингибировало экзоцитоз в хромаффинных клетках и клетках PC 12 (Ngatchou et al., 2010; Wehland et al., 2016), предполагая механизм, в котором движение C-конца инициирует образование пор слияния путем перестройки двухслойной структуры в дистальных листочках (Fang and Lindau, 2014).

Рис. 5. Альтернативный механизм образования пор слияния путем введения TMD во внутреннюю часть мембраны, как было предложено Fang and Lindau (2014) .

2. Взаимодействие SNARE-SNARE в экзоцитозе

2.1. Организация SNARE в состоянии предварительной сварки

Мультимеризация комплексов SNARE важна для быстро регулируемого экзоцитоза в нейрональной передаче (Montecucco et al., 2005). Предпосылкой для функционирования белков SNARE при экзоцитозе является правильное нацеливание на специфические регионы, которые определяют сайты для инициации слияния (Lang et al., 2001). Чрезвычайная плотность SNAREs присутствует как в синаптических пузырьках, так и в плазматических мембранах, что связано с образованием кластеров (Takamori et al. , 2006; Sieber et al., 2007; Bar-On et al., 2012). Было обнаружено, что синтаксин t-SNARE формирует динамические кластеры (Rickman et al., 2010; Bar-On et al., 2012; Ullrich et al., 2015) с увеличенными размерами кластеров и их численностью в пресинаптической активной зоне (Ullrich et al., 2015). Кластеризация синтаксина опосредуется слабыми белок-белковыми взаимодействиями и очень динамична (Ullrich et al., 2015). Это может быть нарушено присутствием всего лишь 1% анионных липидов PIP2 (Murray and Tamm, 2011). Организация SNARE в кластеры может функционировать как резервуар для молекул SNARE, обеспечивая быстрое взаимодействие с их родственными партнерами (Rickman et al., 2010; Bar-On et al., 2012). В качестве альтернативы, мультимеризация комплекса SNARE, как сообщалось, также опосредована взаимодействием между мотивами SNARE SNAP25 и синтаксином посредством образования ионной пары для связывания соседних комплексов SNARE, что приводит к радиальной организации (Megighian et al., 2013) . Исследования ЭПР и флуоресценции показали, что белки SNARE могут самоорганизовываться посредством взаимодействия между TMD, а олигомерная структура может служить каркасом для образования комплекса транс-SNARE, который приводит к образованию супрамолекулярной структуры, содержащей не менее трех копий. комплексов SNARE (Lu et al., 2008). Кроме того, было обнаружено, что вспомогательный белок комплексин может опосредовать олигомеризацию SNARE на стадии до слияния (Tokumaru et al., 2001; Kümmel et al., 2011), возможно, посредством организации комплексов SNARE в виде зигзага мода. Кроме того, макромолекулярная структура, разрешенная с помощью электронной томографии в пресинаптических активных сайтах слияния при экзоцитозе внутриклеточных везикул, пролила свет на организацию супра-комплекса, который, как предполагалось, состоит из кластерных SNARE и других регуляторных белков, таких как Ca 2+ сенсорный синаптотагмин (Szule et al., 2015).

2.2. Взаимодействие SNARE TMDs способствует переходу от гемифузии к слиянию

In vitro эксперименты по слиянию липосом с восстановленными белками SNARE различной плотности позволили глубже понять механизм перехода от гемифузии к слиянию. При низкой поверхностной плотности SNARE в липосомах состояние гемифузии было остановлено, что подразумевает кооперативное действие белков SNARE в обеспечении перехода от гемифузии к слиянию (Lu et al., 2005; Сюй и др., 2005). Плотность белков SNARE считается наиболее важным параметром в определении не только кинетики слияния, но также и степени слияния липосом, опосредованного SNAREs (Ji et al., 2010).

В том же направлении, синтетические пептиды, несущие трансмембранный сегмент дрожжевого вакуолярного Q-SNARE Vam3p, оценивали на их слияние в протеолипосомных системах. Склонность к переходу от гемифузии к полному слиянию, представленная перемешиванием внутренней створки, увеличивалась по мере увеличения поверхностной плотности включенного пептида (Hofmann et al., 2006). Кроме того, введение мутаций в интерфейс взаимодействия синтетического пептида значительно ингибировало перемешивание внутренней створки при слиянии липосом. Этот дефект был полностью устранен для эффективности слияния дикого типа, когда TMD были ковалентно димеризованы. Полноразмерный белок с такими же мутациями в TMD также обнаруживает пониженное смешивание содержимого в вакуолярном слиянии дрожжей (Hofmann et al., 2006), подтверждая потенциальную функцию взаимодействий TMD-TMD в обеспечении перехода от гемифузии к слиянию.Это мнение дополнительно подтверждается SNARE-индуцированным слиянием протеолипосом, регулируемым холестерином в физиологических условиях. V-SNARE TMD образует димер «открытые ножницы» и его конформационные изменения в параллельный димер, как предполагается, являются критическими для активности слияния (Tong et al., 2009). Другое исследование продемонстрировало, что гомодимеризация R-SNARE sec22 критична для эффективного экзоцитоза; Этот белок, по-видимому, участвует в сборке олигомеров комплекса SNARE (Flanagan et al., 2015).

Формирование и расширение поры плавления является критическим этапом для полного плавления. Застегивание TMD белков t- и v-SNARE способствовало смешиванию липидов и зарождению пор, а присутствие гетеродимера на краю поры, как предполагалось, препятствовало повторному закрытию пор (Wu et al. , 2016).

2.3. Специфическая димеризация TMD SNARE

Как обсуждалось выше, взаимодействия между SNARE TMDs, как было обнаружено, способствуют переходу от гемифузии к слиянию. Ранее было продемонстрировано, что взаимодействия TMD-TMD опосредуют гомо- и гетеродимеризацию белков SNARE (Laage and Langosch, 1997; Margittai et al., 1999; Лааге и др., 2000; Рой и др., 2004; Крох и Флеминг, 2006; Рой и др., 2006; Han et al., 2015). Консервативный мотив в трансмембранных сегментах был идентифицирован для специфического взаимодействия между белками SNARE (Laage and Langosch, 1997; Margittai et al., 1999; Laage et al., 2000). SybII TMDs д. Плотно упаковываться, образуя правостороннюю димерную структуру (Fleming and Engelman, 2001; Han et al., 2015) (см. Рисунок 6). В другом исследовании сообщалось, что аффинность связывания между sybII TMDs мала и роль димеризации в слиянии мембран подвергалась сомнению (Bowen et al., 2002). Склонность sybII к ассоциации фактически зависит от экспериментальных условий (Roy et al. , 2004). TMD синтаксина образуют стабильные гомодимеры со свободной энергией ассоциации -3,5 ккал / моль -1 , как определено аналитическим ультрацентрифугированием. Сравнимая склонность к ассоциации для sybII TMD может быть получена для пептидов, включая единственную мутацию в положении 99 (Leu / Met) (Kroch and Fleming, 2006). Кроме того, было предложено, что альтернативные интерфейсы связывания в TMD синтаксина ответственны за гомо- и гетеродимеризацию.Наличие альтернативных интерфейсов в SNARE TMDs связано с их олигомеризацией (Laage and Langosch, 1997; Kroch and Fleming, 2006; Zhang and Shin, 2006; Han et al., 2015), а также с преобразованием между гомо- и гетеродимерами Белки SNARE. Последний, как полагают, участвует в финальной стадии слияния мембран, приводя к образованию комплекса цис- -SNARE (Stein et al., 2009). В соответствии с этими выводами, недавно было сообщено о нескольких интерфейсах димеризации, основанных на последовательных многомасштабных МД-моделированиях димеризации sybII TMD (Han et al. , 2015). Альтернативные интерфейсы димеризации были менее заселены, чем основные интерфейсы димеризации, и наблюдались динамические взаимопревращения между отдельными интерфейсами (Han et al., 2015). Важность этих множественных интерфейсов для олигомеризации была подтверждена в последующей работе (Han et al., 2016a).

2.4. Олигомеризация SNARE в быстром экзоцитозе

Несмотря на функциональную важность белок-белковых взаимодействий в SNARE-обеспечиваемом слиянии мембран и знания о структуре олигомеров TMD, все еще остается неясным, как осуществляется переход от гемифузии к слиянию.Хорошо известно, что одиночный комплекс SNARE составляет минимальный аппарат в исследованиях реконструированных протеолипосом, хотя и с относительно медленной кинетикой (Weber et al., 1998; van den Bogaart et al., 2010). Быстрый экзоцитоз, который происходит в миллисекундном масштабе времени во время высвобождения нейромедиатора, требует кооперативного действия нескольких комплексов SNARE (Montecucco et al. , 2005; van den Bogaart and Jahn, 2011; Shi et al., 2012). Небольшое количество комплексов SNARE может значительно снизить скорость слияния, как показано с помощью анализа слияния одного везикул (Karatekin et al., 2010). Недавнее крупнозернистое моделирование пролило свет на кооперативные эффекты нескольких комплексов SNARE при слиянии мембран. Процесс был значительно ускорен, когда были включены несколько комплексов SNARE, хотя было обнаружено, что одного комплекса SNARE достаточно для управления слиянием (Risselada et al., 2011). На необходимое количество комплексов SNARE для эффективного слияния также влияет липидный состав, поскольку бислои, содержащие способствующие слиянию липиды, такие как слияние PE / PS, столь же эффективно даже при уменьшенном количестве комплексов SNARE (Domanska et al., 2010). Требуемое количество комплексов SNARE для слияния везикул варьируется и зависит от физиологических условий, таких как тип везикул или потребность во времени (Montecucco et al., 2005; van den Bogaart and Jahn, 2011; Hernandez et al. , 2014): два Комплексы SNARE необходимы для быстрой синаптической передачи в культивируемых нейронах гиппокампа (Sinha et al., 2011), в то время как по крайней мере три нейрональных комплекса SNARE необходимы для экзоцитоза быстрого слияния в хромаффинных клетках и клетках PC12 (Hua and Scheller, 2001; Mohrmann et al., 2010). Теоретическая модель, основанная на измерениях с помощью атомно-силовой микроскопии (AFM) силы взаимодействия между белками SNARE, предполагает, что по крайней мере четыре комплекса SNARE необходимы для слияния (Yersin et al., 2003). Используя анализ слияния одиночных пузырьков, количество комплексов SNARE, запускающих слияние в миллисекундной шкале времени, было оценено как восемь (Domanska et al., 2009). Еще большее количество из 15 комплексов SNARE было предложено для экзоцитоза с использованием нейротоксинов ботулина, которые специфически инактивируют SNARE (Montecucco et al., 2005).

В состоянии пост-слияния комплексы SNARE, как предполагалось, располагаются в виде розеткообразных мультимерных пучков (Montecucco et al. , 2005) или образуют звездообразные олигомеры (Rickman et al., 2005). Также было высказано предположение, что комплексы SNARE могут быть организованы кольцевым образом, приводя к пористой структуре, когда изолированные полноразмерные белки SNARE воссоздаются в липосомы. Размер этого суперкомплекса SNARE зависит от диаметра везикул, обнаруженного с помощью атомно-силовой микроскопии (АСМ) и электронной микроскопии (Cho et al., 2005, 2011). Было высказано предположение, что край гемифузионной диафрагмы выстлан белковыми TMD из нескольких белков SNARE, которые образуют кольцеобразные олигомеры (Chernomordik and Kozlov, 2003). Косвенное свидетельство получено из исследования, в котором мутация вдоль одной стороны синтаксиновой трансмембранной спирали изменяет поток трансмиттера в клетках PC12, а также проводимость пор слияния (Han et al., 2004). Следовательно, была предложена модель поры белкового слияния, содержащая по меньшей мере 5-8 TMD синтаксина.Точно так же замена остатков, близких к N-концу sybII TMD объемными остатками триптофана или заряженными остатками, также изменяет поток пор слияния и проводимость, подразумевая возможную модель комплементарной поры, состоящую из трех или четырех димеров sybII (Chang et al. , 2015). Эти кольцеобразные устройства, однако, оказались несовместимыми с плотной стыковкой пузырьков, наблюдаемой в реконструированной системе слияния мембран (Hernandez et al., 2012).

Механизм олигомеризации и форма олигомеров sybII TMD (см. Рисунок 7) были представлены в недавнем исследовании с помощью моделирования методом МД, которое пролило свет на пошаговую самосборку sybII TMD в олигомеры (Han et al., 2016а). Было обнаружено, что олигомеры являются либо компактными, либо линейными, причем первые более стабильны. Форма олигомеров противоречит гипотезе пор, основанной на данных мутагенеза Chang et al. (2015). А именно, остатки, которые, как предполагалось, указывают на просвет белковой поры, расположены снаружи олигомера, обеспечивая интерфейс связывания для других sybII TMD (Han et al., 2016a). Более того, было обнаружено, что триптофаны в положениях 89 и 90 придают олигомерам синаптобревина повышенную динамику и пониженную компактность.Таким образом, олигомеры, вероятно, обеспечивают повышенную доступность для своего родственного партнера при образовании комплекса SNARE.

Рисунок 7. Структурные модели олигомеров sybII, содержащие 3-8 копий трансмембранных доменов (слева направо) . Структуры олигомеров sybII были получены либо путем моделирования самосборки CG-MD (тример и тетрамер), либо путем ручного построения (от пентамера до октамера), см. Han et al. (2016a).

3. Важность белок-липидных взаимодействий для слияния мембран

Большие структурные перестройки мембран во время слияния обычно вызываются слитыми пептидами и дополнительно модулируются, в частности, липидным составом (Aeffner et al., 2012). При первом контакте приближающихся мембран их поверхности должны обезвоживаться, и необходимо преодолевать боковое натяжение межслойной границы (Chernomordik et al., 1987; Kozlovsky et al., 2002). Состав мембраны влияет на предпочтение пути и скорость слияния, в то время как слитые белки снижают энергетический барьер для процесса слияния посредством специфических белок-белковых и белок-липидных взаимодействий (Chernomordik and Kozlov, 2003; Jahn et al. , 2003). Склонность липидных бислоев к слиянию зависит от их липидного состава и в основном от внутренней геометрии липидов (Chernomordik and Kozlov, 2003).В то время как гемифузия ингибируется LPC в форме перевернутого конуса и стимулируется конусообразными PEs, образование пор облегчается LPC и ингибируется с помощью PEs, расположенных в дистальной створке сливающихся мембран (Chernomordik and Kozlov, 2008).

Множество данных моделирования продемонстрировали, что критическим этапом в начале слияния являются гидрофобные контакты между приближающимися мембранами, образованные, например, выступающими липидами (см. Рисунок 8). За начальным липидным расщеплением следует образование липидной ножки хвоста (Kinnunen, 1992; Holopainen et al., 1999; Марринк и Марк, 2003; Стивенс и др., 2003; Кассон и др., 2010; Смирнова и др., 2010).

Рис. 8. Выступ липидного хвоста в изогнутой мембране POPC, вызванный пептидом sybII TMD . Липиды показаны в виде серых палочек, а фосфаты выделены желтыми сферами. Пептид изображен в виде радуги и палочек. Выступающий липид обозначен толстыми палочками с углеродными атомами синего цвета и красным кислородом.

Было показано, что вероятность выпячивания липидов и частичная дегидратация листка наружной мембраны увеличиваются в присутствии укороченной конструкции синаптобревина, содержащей TMD, линкер и юкстамембранный домен, несущий положительно заряженные остатки (Han et al., 2016б). Эти результаты указывают на дополнительную роль пептидов SNARE в дестабилизации его непосредственного липидного окружения. Также было показано, что α-спиральные якоря SNARE TM связаны с дестабилизацией бислоя (Risselada et al., 2011) и перемешиванием липидов, что обсуждается в контексте их наклонной ориентации в мембранах. Увеличенное количество случаев выпячивания липидной ацильной цепи недавно также наблюдалось в изогнутых мембранах (Rabe et al., 2016; Tahir et al., 2016). Кроме того, сообщалось, что комплексы SNARE вызывают локальные выступы мембраны в целевой мембране (Bharat et al. , 2014). Характеристики изогнутых мембран представляют интерес для слияния мембран, поскольку как синаптические пузырьки, так и вирионы (вирусные частицы) сильно изогнуты, а промежуточные соединения слияния имеют большую кривизну. В целом, скорость слияния увеличивается с уменьшением радиуса пузырьков (Bharat et al., 2014). Было предложено множество причин относительно того, как сильно изогнутые мембраны способствуют процессу слияния, в том числе меньшее поверхностное натяжение более крупных везикул, снятие липидного стресса в сильно изогнутых областях при переходе в состояние полукрепления (McMahon et al., 2010; Kawamoto et al., 2015), а также более тесный контакт плавящихся мембран из-за изгиба мембраны (McMahon et al., 2010).

И синаптические везикулы, и плазматические мембраны содержат отрицательно заряженные липиды во внешнем и внутреннем слоях соответственно. В состоянии перед слиянием отрицательно заряженные липиды вызывают электростатическое отталкивание между мембранами, предотвращая спонтанное слияние. Это позволяет точно определить время слияния мембран за счет добавления двухвалентных ионов (обычно кальция). Они не только экранируют отрицательные заряды липидов, но также могут перекрывать противоположные мембраны, связывая два отрицательно заряженных липида с одним двухвалентным ионом (Böckmann and Grubmüller, 2004; Pannuzzo et al., 2014). Исследования взаимодействий между анионными липидами PIP2 и синтаксином показали, что они сильно зависят от Ca 2+ . Было показано, что в присутствии Ca 2+ липиды PIP2 конденсируют синтаксины вместе в большие агломераты (van den Bogaart et al., 2011), посредством чего Ca 2+ связывает множественные комплексы синтаксин / PIP (Milovanovic et al., 2016). ). В отсутствие Ca 2+ было показано, что присутствие всего лишь 1% PIP2 (или более 20% липидов PS) вызывает дезагрегацию холестерин-зависимых синтаксиновых кластеров (Murray and Tamm, 2009).Также известно, что PIP2 увеличивает скорость ответа синаптотагмина на Ca 2+ (Bai et al. , 2004), что связано с PIP2-опосредованными взаимодействиями либо между синтаксином и синаптотагмином (Honigmann et al., 2013), либо между SNAREpin и синаптотагмин (Kim et al., 2012). Липиды PS, как было установлено, обеспечивают взаимодействие между комплексином и мембраной в состоянии стыковки (Diao et al., 2013). Другой отрицательно заряженный липид, который, как было обнаружено, модулирует действие SNARE, — это фузогенная фосфатидная кислота (PA).Если связывание PA со специфическим липид-связывающим доменом на синтаксине-1A нарушается, вызванная секреция прогрессивно снижается (Lam et al., 2008).

Более того, было обнаружено, что холестерин играет несколько ролей во время слияния мембран (Yang et al., 2016), и экзоцитоз в значительной степени снижается при истощении холестерина. Холестерин изменяет время жизни промежуточных продуктов слияния мембран, он изменяет кривизну мембраны и модуль изгиба, а также напрямую взаимодействует с белками слияния, что приводит к их измененному распределению и глубине проникновения через мембрану. Было обнаружено, что SNARE либо сконцентрированы в холестерин-зависимых кластерах, которые определяют сайты стыковки и слияния для экзоцитоза (Lang et al., 2001; Murray and Tamm, 2009, 2011), либо связаны с доменом липидного рафта (богатым холестерином и насыщенные липиды) в клетках альвеолярного типа II (Chintagari et al., 2006). С другой стороны, в гигантских однослойных везикулах (GUV) белки SNARE показали предпочтение неупорядоченной фазе (богатой ненасыщенными липидами и обедненной холестерином) (Bacia et al., 2004). Также было показано, что конформация димера синаптобревина зависит от присутствия мембранного холестерина (Tong et al., 2009). Механистическим объяснением, общим для всех этих наблюдений, может быть сегрегация SNAREs за счет гидрофобного несоответствия в области оптимальной толщины мембраны (Milovanovic et al., 2015).

Появляется все больше доказательств того, что не только прикрепленные к мембране белки SNARE взаимодействуют с липидами и, таким образом, стимулируют слияние, но также что белки, регулирующие экзоцитоз, прикрепляются к липидным бислоям. Амфифатическая С-концевая спираль комплексина, как было установлено, связывается с мембранами и, таким образом, влияет на смешение липидов (Seiler et al., 2009). Более того, было показано, что способность комплексина связываться с пузырьками зависит от присутствия липидов PS в мембране (Diao et al., 2013). Также ожидается, что связывание синаптотагмина с мембраной будет важным для экзоцитоза (Lynch et al., 2008). Более того, при взаимодействии с мембраной α-синуклеин может либо ингибировать слияние везикул (DeWitt and Rhoades, 2013), либо после сборки в олигомеры способствовать образованию комплекса SNARE (Burré et al., 2014). Полная ассоциация гомотипического комплекса слияния и сортировки белков (HOPS) и Sec19p с протеолипосомами в слиянии дрожжевых вакуолей требует присутствия PA в мембране (Mima and Wickner, 2009). В той же работе было показано, что и PA, и PE важны для слияния, а также для сборки комплекса SNARE.

В заключение, липиды регулируют все стадии экзоцитоза нейронов (Ammar et al. , 2013). Различные липиды влияют на прайминг везикул, установление зарождающегося контакта, переход к гемифузии и далее к состоянию полного слияния, а также на открытие пор слияния.

4. Регуляторные белки в SNARE-опосредованном экзоцитозе

Помимо комплекса SNARE, который характеризуется как энергетический аппарат во внутриклеточном экзоцитозе, было продемонстрировано, что набор регуляторных белков, таких как Munc18-1 (SM), синаптотагмин и комплексин, в эукариотических клетках также важен для экзоцитоза. Эти регуляторные белки позволяют точно регулировать экзоцитоз в живых клетках в пространстве и времени при поступлении сигнала, особенно в отношении высвобождения нейромедиатора, инициируемого Ca 2+ .Более того, компартмент-специфичные мультисубъединичные связывающие комплексы (MTCs) регулируют сборку SNARE-комплексов и экзоцитоз и отвечают за доставку в соответствующие компартменты-мишени (Dubuke and Munson, 2016).

Было обнаружено, что

Munc18-1 напрямую связывается с синтаксином в закрытой конфигурации, таким образом регулируя доступность синтаксина для сборки комплекса SNARE (Hata et al. , 1993; Dulubova et al., 1999; Gerber et al., 2008; Dawidowski and Кафисо, 2016). Было обнаружено, что это взаимодействие стабилизируется доменом синтаксина H abc (Zhou et al., 2012). Более того, после конформационных изменений в домене 3a Munc18-1 взаимодействия helix12 с v-SNARE управляют сборкой SNAREpin (Parisotto et al., 2014) и праймированием пузырьков (Munch et al., 2016). N-концевой домен синтаксина-1 регулируется с помощью Munc18-1 в его двух разных конформационных состояниях, которые налагают пространственно различные регуляторные механизмы, либо компенсируя, либо ингибируя активное состояние при транспортировке синтаксина (Park et al., 2016). Интересно, что Munc18-1 также тесно связан с транспортом синтаксина к целевым компартментам (Rowe et al., 2001).

Комплексин считается специфическим лигандом, который связывается с центральным коровым доменом комплекса SNARE и действует как силовой зажим, который контролирует передачу силы, генерируемой сборкой комплекса SNARE, к сливающимся мембранам (Pabst et al. , 2000; Chen et al., 2002; Максимов и др., 2009; Trimbuch, Rosenmund, 2016). Недавно сообщалось, что комплексин помогает пространственной организации комплекса SNARE на стадии предварительного слияния (Kümmel et al., 2011) и увеличивает пул заблокированных пристыкованных синаптических пузырьков, таким образом синхронизируя слияние (Malsam et al., 2012). Для этого C-конец комплексина связывается с мембраной, содержащей липиды PS, тогда как основной домен комплексина-1 прикрепляется к комплексу SNARE (Diao et al., 2013). Эффект ингибирования слияния комплексина недавно был приписан позиционированию дополнительной спирали комплексина между пузырьками и плазматическими мембранами, а не как ранее предполагалось между белками SNARE (Trimbuch et al., 2014). Более того, комплексин должен претерпевать конформационные изменения от открытой к закрытой конформации, чтобы другой игрок, синаптотагмин, мог запускать слияние после стимулов Ca 2+ (Krishnakumar et al., 2011).

Для синаптотагмина продемонстрированы различные функции в регуляции SNARE-опосредованного экзоцитоза. Кристаллические структуры связанных с Ca 2+ — и Mg 2+ комплексов нейронального комплекса SNARE и синаптотагмина-1 (см. Рисунок 9) выявили несколько интерфейсов взаимодействия, среди которых сильно консервативный и Ca 2+ — независимый интерфейс. Предполагалось, что последний формируется до запуска Ca 2+ , сдвигается при запуске и способствует взаимодействиям синаптотагмина-1 с плазматической мембраной (Zhou et al., 2015). В Ca 2+ -независимым образом синаптотагмин-1 обеспечивает стыковку везикул (Malsam et al., 2012). Более того, синаптотагмин представляет собой датчик Ca 2+ , который состоит из двух доменов C 2 (C 2 A и C 2 B), соединенных гибкой петлей. Было предложено, чтобы эти два домена связывались и вставлялись в мембрану при притоке Ca 2+ , создавая локальную кривизну, которая значительно снижает энергетический барьер для образования пор слияния (Martens et al. , 2007; Hui et al., 2009; McMahon et al., 2010; Paddock et al., 2011; Кришнакумар и др., 2013). С другой стороны, связывание синаптотагмина с комплексом SNARE, как полагают, освобождает силовой зажим, вытесняя комплексин, тем самым облегчая передачу силы на соединяющиеся мембраны зависимым от Ca 2+ образом (Tang et al., 2006 ). Действительно, синаптотагмин действует главным образом посредством взаимодействия с обеими мембранами, а также с комплексом SNARE. Этот синергетический эффект способствует образованию и расширению пор слияния при связывании Ca 2+ (Lynch et al., 2008). Кроме того, было обнаружено, что синаптотагмин образует кольцеобразные олигомеры (Wang et al., 2014), которые напоминают олигомерную организацию комплекса SNARE. Возможно, согласованное действие множественных комплексов SNARE со связанным синаптотагмином запускает Ca 2+ -зависимую реакцию слияния со сверхбыстрой скоростью из-за дополнительного локального изгиба мембраны, индуцированного синаптотагмином (McMahon et al. , 2010).

Рисунок 9. Структура комплекса синаптотагмин 1-SNARE, связанного с Ca 2+ (Zhou et al., 2015) . SNAP25 показан зеленым, синаптобревин синим, синтаксин-1A красным, одна копия синаптотагмина-1 фиолетовым и одна желтым.

Для получения дополнительной информации о сборке и разборке SNARE с помощью регуляторных и связывающих белков см. Baker and Hughson (2016) и Ryu et al. (2016). Несмотря на значительный прогресс в понимании событий внутриклеточного слияния, которые включают множество белков, помимо основного комплекса SNARE, единая картина, описывающая регуляторную сеть на разных уровнях слияния везикул, опосредованного SNARE, все еще отсутствует.

Выводы

Слияние мембран, управляемое и управляемое сложным механизмом слияния и регуляторных белков, является важным процессом для всех живых организмов. Индивидуальные белки различаются у разных организмов и даже у их клеток и органелл, и они также зависят от транспортируемых веществ. Хотя эти разные белки незначительно различаются по способу катализирования слияния, их основные роли остаются неизменными.

Среди всех процессов, в которых слияние мембран играет ключевую роль, экзоцитоз изучается наиболее интенсивно, и накоплен большой объем информации о тонких механизмах, которые регулируют этот процесс своевременно и скоординированным образом.В частности, была рассмотрена роль многих белков на этапе слияния. В последнее время исследования экзоцитоза были сосредоточены, в частности, на роли липидного состава мембран, специфических белок-липидных взаимодействий и важности супраструктур и архитектуры мембран. Также выяснены множественные механизмы регуляции вспомогательными белками.

Тем не менее, наше понимание синтеза на молекулярном уровне все еще ограничено. Тем не менее, сочетание экспериментальных методов с МД-моделированием открывает многообещающие возможности для раскрытия тонкого взаимодействия между гибридными белками и мембранами при атомистическом разрешении. Будущие исследования будут направлены на дальнейшее сокращение разрыва в пространственном и временном разрешении между такими экспериментами, как электронная томография и моделирование. Кроме того, подходы, позволяющие охарактеризовать свойства пор слияния с использованием определенных составов мембран, например, в микрофлюидной установке (Варгас и др., 2014), подтолкнут к нашему пониманию сложного баланса белок-липидного взаимодействия при слиянии.

Авторские взносы

JH, KP и RB разработали концепцию этого обзора и написали рукопись.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Эта работа была поддержана Немецким научным фондом (DFG) в рамках исследовательской группы обучения 1962– Динамические взаимодействия на биологических мембранах (JH, KP и RB) и SFB1027, Физическое моделирование неравновесных процессов в биологических системах ( проект C6). Эта работа также была поддержана стипендией Китайского стипендиального совета CSC (JH).

Список литературы

Aeffner, S., Reusch, T., Weinhausen, B., and Salditt, T. (2012). Энергетика промежуточных продуктов стебля при слиянии мембран контролируется липидным составом. Proc. Natl. Акад. Sci. США 109, E1609 – E1618. DOI: 10.1073 / pnas.1119442109

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Аль-Абдул-Вахид, М.С., ДеМилл, К.М., Сервин, М.Б., Проссер, Р. С., Стюарт, Б. А. (2012). Влияние юкстамембранных триптофанов на глубину погружения синаптобревина, интегрального белка мембраны везикул. Biochim. Биофиз. Acta Biomembranes 1818, 2994–2999. DOI: 10.1016 / j.bbamem.2012.07.018

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Аммар М., Кассас Н., Шассеро-Голаз С., Бадер М. Ф. и Витале Н. (2013). Липиды в регулируемом экзоцитозе: что они делают? Перед. Эндокринол. 4: 125. DOI: 10.3389 / fendo. 2013.00125

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Басия, К., Шютт, К. Г., Кахья, Н., Ян, Р., и Швилл, П. (2004). SNAREs предпочитают жидкие неупорядоченные домены «плотным» (жидкостным упорядоченным), когда воссоздаются в гигантские однослойные пузырьки. J. Biol. Chem. 279, 37951–37955. DOI: 10.1074 / jbc.M407020200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бай Дж., Такер У.К. и Чепмен, Э. Р. (2004). PIP2 увеличивает скорость ответа синаптотагмина и направляет его активность проникновения через мембрану в направлении плазматической мембраны. Nat. Struct. Мол. Биол. 11, 36–44. DOI: 10.1038 / nsmb709

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бар-Он, Д., Вольтер, С., ван де Линде, С., Хейлеманн, М., Нудельман, Г., Нахлиель, Э. и др. (2012). Визуализация в сверхвысоком разрешении показывает внутреннюю архитектуру наноразмерных кластеров синтаксина. J. Biol. Chem. 287, 27158–27167. DOI: 10.1074 / jbc.M112.353250

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бхарат, Т. А., Мальсам, Дж., Хаген, В. Дж., Шойцов, А., Зёлльнер, Т. Х., и Бриггс, Дж. А. Г. (2014). SNARE и регуляторные белки индуцируют локальные выступы мембран для пристыковки пузырьков для быстрого слияния, запускаемого кальцием. EMBO Rep. 15, 308–314. DOI: 10.1002 / embr.201337807

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бёкманн, Р.А., и Грубмюллер, Х. (2004). Многоступенчатое связывание двухвалентных катионов с фосфолипидными бислоями: исследование молекулярной динамики. Angew. Химия Инт . 43, 1021–1024. DOI: 10.1002 / anie.200352784

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Борисовская М., Шварц Ю. Н., Дхара М., Ярзагарай А., Хьюго С., Нарци Д. и др. (2012). Мембранно-проксимальные триптофаны синаптобревина II стабилизируют праймирование секреторных пузырьков. J. Neurosci. 32, 15983–15997.DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.6282-11.2012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Боуэн, М. Э., Энгельман, Д. М., и Брюнгер, А. Т. (2002). Мутационный анализ олигомеризации трансмембранного домена синаптобревина. Биохимия 41, 15861–15866. DOI: 10.1021 / bi0269411

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бурре Дж., Шарма М. и Зюдхоф Т. К. (2014). α-синуклеин собирается в мультимеры более высокого порядка после связывания с мембраной, способствуя образованию комплекса ловушек. Proc. Natl. Акад. Sci. США 111, E4274 – E4283. DOI: 10.1073 / pnas.1416598111

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чанг, К. В., Чанг, К. В., Гаффани, Дж. Д., Чепмен, Е. Р., и Джексон, М. Б. (2016). Синаптобревин, заякоренный липидами, практически не поддерживает экзоцитоз или слияние липосом. J. Biol. Chem. 291, 2848–2857. DOI: 10.1074 / jbc. M115.701169

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чанг, К.У., Хуэй, Э., Бай, Дж., Брунс, Д., Чепмен, Э. Р., и Джексон, М. Б. (2015). Структурная роль трансмембранного домена синаптобревина 2 в порах слияния везикул с плотным ядром. J. Neurosci. 35, 5772–5780. DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.3983-14.2015

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чен X., Томчик Д. Р., Ковригин Э., Арак Д., Макиус М., Зюдхоф Т. К. и др. (2002). Трехмерная структура комплекса комплексин / SNARE. Нейрон 33, 397–409.DOI: 10.1016 / S0896-6273 (02) 00583-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чен, Ю.А., Скейлс, С.Дж., и Шеллер, Р.Х. (2001). Последовательная сборка SNARE лежит в основе прайминга и запуска экзоцитоза. Нейрон 30, 161–170. DOI: 10.1016 / S0896-6273 (01) 00270-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Черномордик Л. В., Козлов М. М. (2003). Взаимодействие белков и липидов при слиянии и делении биологических мембран. Ann. Rev. Biochem. 72, 175–207. DOI: 10.1146 / annurev.biochem.72.121801.161504

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Черномордик, Л. В., Меликян, Г. Б., Чизмаджев, Ю. А. (1987). Слияние биомембран: новая концепция, основанная на модельных исследованиях с использованием двух взаимодействующих плоских липидных бислоев. Biochim. Биофиз. Acta 906, 309–352. DOI: 10.1016 / 0304-4157 (87)

-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Чинтагари, Н.Р., Джин, Н., Ван, П., Нарасараджу, Т. А., Чен, Дж., И Лю, Л. (2006). Влияние истощения холестерина на экзоцитоз клеток альвеолярного типа II. Am. J. Respir. Cell Mol. Биол. 34, 677–687. DOI: 10.1165 / rcmb.2005-0418OC

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чо, В. Дж., Ли, Дж. С., Чжан, Л., Рен, Г., Шин, Л., Манке, К. В. и др. (2011). Мембранно-направленная молекулярная сборка нейронального комплекса SNARE. J. Cell. Мол. Med. 15, 31–37.DOI: 10.1111 / j.1582-4934.2010.01152.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Клеверли Д. З. и Ленард Дж. (1998). Трансмембранный домен в вирусном слиянии: важная роль консервативного остатка глицина в белке G вируса везикулярного стоматита. Proc. Natl. Акад. Sci. США 95, 3425–3430. DOI: 10.1073 / pnas.95.7.3425

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Давидовски Д., Кафисо Д. (2016).Munc18-1 и конец синтаксина-1N регулируют открытые-закрытые состояния в комплексе t-SNARE. Структура 24, 392–400. DOI: 10.1016 / j.str.2016.01.005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Деак Ф., Шин О. Х., Кавалали Э. Т. и Зюдхоф Т. К. (2006). Структурные детерминанты синаптобревина 2 действуют при слиянии синаптических пузырьков. J. Neurosci. 26, 6668–6676. DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.5272-05.2006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Деннисон, С.М., Гринфилд, Н., Ленард, Дж., И Ленц, Б. Р. (2002). Пептид трансмембранного домена VSV (TMD) способствует PEG-опосредованному слиянию липосом конформационно чувствительным образом. Биохимия 41, 14925–14934. DOI: 10.1021 / bi0203233

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

ДеВитт, Д. К., и Роудс, Э. (2013). α-синуклеин может ингибировать опосредованное ловушкой слияние везикул посредством прямого взаимодействия с липидными бислоями. Биохимия 52, 2385–2387.DOI: 10.1021 / bi4002369

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дхара, М., Ярзагарай, А., Макке, М., Шиндельдекер, Б., Шварц, Ю., Шаабан, А., и др. (2016). Трансмембранные домены v-SNARE действуют как катализаторы слияния везикул. eLife 5: e17571. DOI: 10.7554 / eLife.17571

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Diao, J. , Cipriano, D. J., Zhao, M., Zhang, Y., Shah, S., Padolina, M. S., et al. (2013).Комплексин-1 увеличивает скорость стыковки везикул за счет одновременного взаимодействия ловушки и мембраны. J. Am. Chem. Soc. 135, 15274–15277. DOI: 10.1021 / ja407392n

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Domanska, M.K., Kiessling, V., Stein, A., Fasshauer, D., and Tamm, L.K. (2009). Кинетика миллисекундного слияния единичных везикул показывает количество комплексов SNARE, оптимальных для быстрого слияния мембран, опосредованного SNARE. J. Biol. Chem. 284, 32158–32166.DOI: 10.1074 / jbc.M109.047381

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Доманска, М.К., Кисслинг, В., Тамм, Л.К. (2010). Стыковка и быстрое слияние синаптобревиновых везикул зависит от липидного состава везикулы и мембраны-мишени, содержащей акцепторный комплекс SNARE. Biophys. J. 99, 2936–2946. DOI: 10.1016 / j.bpj.2010.09.011

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дубьюк, М. Л., и Мансон, М.(2016). Тайная жизнь привязок: роль привязных факторов в комплексной регуляции SNARE. Перед. Cell Dev. Биол 4:42. DOI: 10.3389 / fcell.2016.00042

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дулубова И., Сугита С., Хилл С., Хосака М., Фернандес И., Зюдхоф Т. К. и др. (1999). Конформационный переключатель синтаксина во время экзоцитоза: роль munc18. EMBO J. 18, 4372–4382. DOI: 10.1093 / emboj / 18.16.4372

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эллена, Дж.Ф., Лян, Б., Виктор, М., Стейн, А., Кафисо, Д. С., Ян, Р. и др. (2009). Динамическая структура липид-связанного синаптобревина предполагает механизм зародышеобразования-распространения для образования комплекса trans-SNARE. Proc. Natl. Акад. Sci. США 106, 20306–20311. DOI: 10.1073 / pnas.0

7106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фанг, К., Чжао, Ю. и Линдау, М. (2013). Юкстамембранные триптофаны синаптобревина 2 контролируют процесс слияния мембран. FEBS Lett. 587, 67–72. DOI: 10.1016 / j.febslet.2012.11.002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фасшауэр Д., Отто Х., Элиасон В. К., Ян Р. и Брюнгер А. Т. (1997). Структурные изменения связаны с образованием рецепторного комплекса слитого белка, чувствительного к растворимому N-этилмалеимиду. J. Biol. Chem. 272, 28036–28041. DOI: 10.1074 / jbc.272.44.28036

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фасшауэр, Д., Саттон, Р. Б., Брюнгер, А. Т., и Ян, Р. (1998). Сохраненные структурные особенности комплекса синаптического слияния: белки SNARE реклассифицированы как Q- и R-SNARE. Proc. Natl. Акад. Sci. США 95, 15781–15786. DOI: 10.1073 / pnas.95.26.15781

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фдез, Э., Мартинес-Сальвадор, М., Борода, М., Вудман, П., и Хилфикер, С. (2010). Детерминанты трансмембранного домена для SNARE-опосредованного слияния мембран. J. Cell Sci. 123, 2473–2480. DOI: 10.1242 / jcs.061325

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фланаган, Дж. Дж., Мукерджи, И., и Барлоу, К. (2015). Изучение образования гомодимера Sec22 и роли в SNARE-зависимом слиянии мембран. J. Biol. Chem. 290, 10657–10666. DOI: 10.1074 / jbc.M114.626911

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Флеминг, К. Г., Энгельман, Д. М. (2001). Вычисления и мутагенез предполагают правостороннюю структуру трансмембранного димера синаптобревина. Белки 45, 313–317. DOI: 10.1002 / prot.1151

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гао, Ю., Зорман, С., Гундерсен, Г., Си, З., Ма, Л., Сиринакис, Г. и др. (2012). Отдельные воссозданные нейронные комплексы SNARE застегиваются на три отдельные стадии. Наука 337, 1340–1343. DOI: 10.1126 / science.1224492

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гербер, С. Х., Ра, Дж. К., Мин, С. В., Лю, X., де Вит, Х., Дулубова И. и др. (2008). Конформационный переключатель синтаксина-1 контролирует слияние синаптических пузырьков. Наука 321, 1507–1510. DOI: 10.1126 / science.1163174

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гроте, Э., Баба, М., Осуми, Ю. и Новик, П. Дж. (2000). Геранилгеранилированные SNARE являются доминирующими ингибиторами слияния мембран. J. Cell Biol. 151, 453–466. DOI: 10.1083 / jcb.151.2.453

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хан, Дж., Плугацкова, К., Бёкманн, Р. А. (2016a). Изучение образования и структуры олигомеров синаптобревина в модельной мембране. Biophys. J. 110, 2004–2015. DOI: 10.1016 / j.bpj.2016.04.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хан, Дж., Плухацкова, К., Брунс, Д., и Бёкманн, Р. А. (2016b). Трансмембранный домен синаптобревина определяет структуру и динамику мотива SNARE и линкерной области. Biochim. Биофиз. Acta Biomembranes 1858, 855–865.DOI: 10.1016 / j.bbamem.2016.01.030

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хан, Дж., Плугацкова, К., Вассенаар, Т. А., и Бёкманн, Р. А. (2015). Димеризация трансмембранного домена синаптобревина изучена с помощью многомасштабного молекулярно-динамического моделирования. Biophys. J. 109, 760–771. DOI: 10.1016 / j.bpj.2015.06.049

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хан, X., Ван, К. Т., Бай, Дж., Чепмен, Э. Р., и Джексон, М.Б. (2004). Трансмембранные сегменты синтаксина выстилают поры слияния Ca 2+ -запускаемого экзоцитоза. Science 304, 289–292. DOI: 10.1126 / science.1095801

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эрнандес, Дж. М., Кройцбергер, А. Дж., Кисслинг, В., Тамм, Л. К., и Ян, Р. (2014). Переменная кооперативность при слиянии мембран, опосредованном SNARE. Proc. Natl. Акад. Sci. США 111, 12037–12042. DOI: 10.1073 / pnas.1407435111

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эрнандес, Х.M., Stein, A., Behrmann, E., Riedel, D., Cypionka, A., Farsi, Z., et al. (2012). Слияние мембран происходит через направленную и полную сборку комплекса SNARE. Наука 336, 1581–1584. DOI: 10.1126 / science.1221976

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hofmann, M. W., Peplowska, K., Rohde, J., Poschner, B.C., Ungermann, C., and Langosch, D. (2006). Самовзаимодействие трансмембранного домена SNARE способствует переходу от гемифузии к слиянию. J. Mol. Биол. 364, 1048–1060. DOI: 10.1016 / j.jmb.2006.09.077

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hofmann, M. W., Weise, K., Ollesch, J., Agrawal, P., Stalz, H., Stelzer, W., et al. (2004). De novo разработка конформационно гибких трансмембранных пептидов, управляющих слиянием мембран. Proc. Natl. Акад. Sci. США 101, 14776–14781. DOI: 10.1073 / pnas.0405175101

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Холопайнен, Дж.М., Лехтонен, Дж. Ю., и Киннунен, П. К. (1999). Доказательства расширенной конформации фосфолипидов при слиянии мембран и гемифузии. Biophys. J. 76, 2111–2120. DOI: 10.1016 / S0006-3495 (99) 77367-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хонигманн А., ван ден Богаарт Г., Ирахета Э., Рисселада Х. Дж., Милованович Д., Мюллер В. и др. (2013). Фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфатные кластеры действуют как молекулярные маяки для рекрутирования везикул. Nat. Struct. Мол. Биол. 20, 679–686. DOI: 10.1038 / nsmb.2570

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хуэй, Э., Джонсон, К. П., Яо, Дж., Даннинг, Ф. М., и Чепмен, Э. Р. (2009). Опосредованное синаптотагмином изгибание мембраны-мишени является критическим шагом в регулируемом Ca 2+ слиянии. Cell 138, 709–721. DOI: 10.1016 / j.cell.2009.05.049

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Цзи, Х., Коулман, Дж., Янг, Р., Мелиа, Т. Дж., Ротман, Дж. Э. и Таресте, Д. (2010). Белковые детерминанты SNARE-опосредованного смешения липидов. Biophys. J. 99, 553–560. DOI: 10.1016 / j.bpj.2010.04.060

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Каратекин, Э., Ди Джованни, Дж., Иборра, К., Коулман, Дж., О’шонесси, Б., Сигар, М., и др. (2010). Быстрый анализ слияния отдельных везикул имитирует физиологические требования SNARE. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 107, 3517–3521. DOI: 10.1073 / pnas.0914723107

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кассон, П. М., Линдал, Э., и Панде, В. С. (2010). Моделирование с атомным разрешением предсказывает переходное состояние для слияния везикул, определяемое контактом нескольких липидных хвостов. PLoS Comput. Биол. 6: e1000829. DOI: 10.1371 / journal.pcbi.1000829

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кавамото, С., Кляйн, М. Л., и Шинода, В.(2015). Крупнозернистое молекулярно-динамическое исследование слияния мембран: влияние кривизны на барьеры свободной энергии вдоль механизма стебля. J. Chem. Phys. 143: 243112. DOI: 10.1063 / 1.4933087

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, Дж. Й., Чой, Б. К., Чой, М. Г., Ким, С. А., Лай, Ю., Шин, Ю. К. и др. (2012). Анализ одиночных везикул раствора выявляет опосредованные PIP2 последовательные действия синаптотагмина-1 на SNARE. EMBO J. 31, 2144–2155.DOI: 10.1038 / emboj.2012.57

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Киннунен П. К. (1992). Слияние липидных бислоев: модель, включающая механистическую связь с липидами, образующими фазу HII. Chem. Phys. Липиды 63, 251–258. DOI: 10.1016 / 0009-3084 (92)

-M

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Kloepper, T. H., Kienle, C.N., и Fasshauer, D. (2007). Сложная классификация белков SNARE проливает свет на сохранение эндомембранной системы эукариот. Мол. Биол. Клетка. 18, 3463–3471. DOI: 10.1091 / mbc.E07-03-0193

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кнехт В., Грубмюллер Х. (2003). Механическое связывание через слияние мембран синтаксин 1A белка SNARE: исследование молекулярной динамики. Biophys. J. 84, 1527–1547. DOI: 10.1016 / S0006-3495 (03) 74965-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Козловский Ю., Черномордик Л.В., Козлов М.М. (2002). Липидные интермедиаты в слиянии мембран: формирование, структура и распад гемифузионной диафрагмы. Biophys. J. 83, 2634–2651. DOI: 10.1016 / S0006-3495 (02) 75274-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кришнакумар, С., Кммел, Д., Джонс, С., Радофф, Д., Райниш, К., и Ротман, Дж. (2013). Конформационная динамика инициируемой кальцием активации слияния синаптотагмином. Biophys. J. 105, 2507–2516. DOI: 10.1016 / j.bpj.2013.10.029

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кришнакумар, С.С., Радофф, Д.Т., Кюммель, Д., Гираудо, К.Г., Ли, Ф., Хандан, Л., и др. (2011). Конформационный переключатель комплексина необходим для синаптотагмина для запуска синаптического слияния. Nat. Struct. Мол. Биол. 18, 934–940. DOI: 10.1038 / nsmb.2103

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Крох А. Э., Флеминг К. Г. (2006). Альтернативные интерфейсы могут опосредовать гомомерную и гетеромерную сборку в трансмембранных доменах белков SNARE. J. Mol. Биол. 357, 184–194. DOI: 10.1016 / j.jmb.2005.12.060

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кюммель Д., Кришнакумар С. С., Радофф Д. Т., Ли, Ф., Жираудо, К. Г., Пинцет, Ф. и др. (2011). Комплексин перекрестно связывает SNARE до слияния в зигзагообразный массив. Nat. Struct. Мол. Биол. 18, 927–933. DOI: 10.1038 / nsmb.2101

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лааге Р. и Лангош Д.(1997). Димеризация белка синаптических везикул синаптобревин (ассоциированный с везикулами мембранный белок) II зависит от конкретных остатков в трансмембранном сегменте. евро. J. Biochem. 249, 540–546. DOI: 10.1111 / j.1432-1033.1997.00540.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лааге Р., Роде Дж., Брозиг Б. и Лангош Д. (2000). Консервативный мембранный аминокислотный мотив управляет гомомерностью и поддерживает гетеромерную сборку пресинаптических белков SNARE. J. Biol. Chem. 275, 17481–17487. DOI: 10.1074 / jbc.M

2199

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лам, А. Д., Триоен-Тот, П., Цай, Б., Витале, Н., и Стуенкель, Э. Л. (2008). События слияния, катализируемые SNARE, регулируются липидными взаимодействиями синтаксина 1. Мол. Биол. Клетка. 19, 485–497. DOI: 10.1091 / mbc.E07-02-0148

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ланг, Т., Брунс, Д., Венцель, Д., Riedel, D., Holroyd, P., Thiele, C., et al. (2001). SNARE сконцентрированы в холестерин-зависимых кластерах, которые определяют сайты стыковки и слияния для экзоцитоза. EMBO J. 20, 2202–2213. DOI: 10.1093 / emboj / 20.9.2202

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лангош, Д., Крейн, Дж. М., Брозиг, Б., Хеллвиг, А., Тамм, Л. К., и Рид, Дж. (2001). Пептиды, имитирующие трансмембранные сегменты SNARE, управляют слиянием мембран в зависимости от их конформационной пластичности. J. Mol. Биол. 311, 709–721. DOI: 10.1006 / jmbi.2001.4889

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, Ф., Кюммель, Д., Коулман, Дж., Рейниш, К. М., Ротман, Дж. Э. и Пинцет, Ф. (2014). Застегивающийся наполовину комплекс SNARE представляет собой функциональный промежуточный продукт в слиянии мембран. J. Am. Chem. Soc. 136, 3456–3464. DOI: 10.1021 / ja410690m

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, Ф., Пинцет, Ф., Perez, E., Eng, W. S., Melia, T. J., Rothman, J. E., et al. (2007). Энергетика и динамика сворачивания SNAREpin через липидные бислои. Nat. Struct. Мол. Биол. 14, 890–896. DOI: 10.1038 / nsmb1310

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лян Б., Давидовски Д., Эллена Дж. Ф., Тамм Л. К. и Кафисо Д. С. (2014). Мотив SNARE синаптобревина обнаруживает водно-межфазное разделение, которое модулируется кривизной мембраны. Биохимия 53, 1485–1494.DOI: 10.1021 / bi401638u

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лян Б., Кисслинг В. и Тамм Л. К. (2013). Предварительная структура синтаксина-1a предполагает путь для сворачивания в промежуточный продукт слияния нейронального транс-ловушечного комплекса. Proc. Natl. Акад. Sci. США 110, 19384–19389. DOI: 10.1073 / pnas.1314699110

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Линдау, М., Холл, Б.А., Четвинд, А., Бекштейн, О., и Сансом, М.С. (2012). Грубое моделирование показывает движение С-конца синаптобревина в ответ на силы пиконьютона. Biophys. J. 103, 959–969. DOI: 10.1016 / j.bpj.2012.08.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лу, X., Чжан, Ф., МакНью, Дж. А., и Шин, Ю. К. (2005). Слияние мембран, индуцированное нейрональными SNARE-транзитами, происходит через гемифузию. J. Biol. Chem. 280, 30538–30541. DOI: 10.1074 / jbc.M506862200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лю, X., Чжан Ю. и Шин Ю. К. (2008). Супрамолекулярная сборка SNARE предшествует гемифузии в SNARE-обеспечиваемом слиянии мембран. Nat. Struct. Мол. Биол. 15, 700–706. DOI: 10.1038 / nsmb.1433

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Линч, К. Л., Жерона, Р. Р., Килар, Д. М., Мартенс, С., МакМахон, Х. Т. и Мартин, Т. Ф. (2008). Synaptotagmin-1 использует изгиб мембраны и связывание SNARE, чтобы управлять расширением пор слияния. Мол. Биол. Клетка. 19, 5093–5103.DOI: 10.1091 / mbc.E08-03-0235

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мальзам, Дж., Паризотто, Д., Бхарат, Т. А. М., Шойцов, А., Краузе, Дж. М., Бриггс, Дж. А. Г. и др. (2012). Комплексин задерживает пул пристыкованных пузырьков для быстрого Ca 2+ -зависимого высвобождения. EMBO J. 31, 3270–3281. DOI: 10.1038 / emboj.2012.164

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Маргиттай, М., Фасшауэр, Д., Пабст, С., Ян Р. и Ланген Р. (2001). Гомо- и гетероолигомерные комплексы SNARE изучены методом сайт-направленного спинового мечения. J. Biol. Chem. 276, 13169–13177. DOI: 10.1074 / jbc.M010653200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Маргиттай М. , Отто Х. и Ян Р. (1999). Стабильное взаимодействие между синтаксином 1a и синаптобревином 2 опосредовано их трансмембранными доменами. FEBS Lett. 446, 40–44. DOI: 10.1016 / S0014-5793 (99) 00028-9

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Максимов, А., Тан, Дж., Ян, X., Панг, З. П., и Зюдхоф, Т. К. (2009). Комплексин контролирует передачу силы от комплексов SNARE к мембранам при слиянии. Наука 323, 516–521. DOI: 10.1126 / science.1166505

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

МакНью, Дж. А., Вебер, Т., Энгельман, Д. М., Зёлльнер, Т. Х. и Ротман, Дж. Э. (1999). Длина гибкой области прилегающей мембраны SNAREpin является критическим детерминантом SNARE-зависимого слияния. Мол. Клетка. 4, 415–421. DOI: 10.1016 / S1097-2765 (00) 80343-3

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

МакНью, Дж. А., Вебер, Т., Парлати, Ф., Джонстон, Р. Дж., Мелия, Т. Дж., Зёлльнер, Т. Х. и др. (2000). Близкого расстояния недостаточно: SNARE-зависимое слияние мембран требует активного механизма, который передает силу на якоря мембраны. J. Cell Biol. 150, 105–118. DOI: 10.1083 / jcb.150.1.105

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мегигиан, А., Зордан, М., Пантано, С., Скорцето, М., Ригони, М., Занини, Д. и др. (2013). Доказательства радиального сверхкомплекса SNARE, опосредующего высвобождение нейромедиатора в нервно-мышечном соединении дрозофилы. J. Cell Sci. 126, 3134–3140. DOI: 10.1242 / jcs.123802

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Милованович, Д., Хонигманн, А., Койке, С., Гёттферт, Ф., Пэлер, Г., Юниус, М., и др. (2015). Гидрофобное несоответствие сортирует белки ловушки на отдельные мембранные домены. Nat. Commun. 6: 5984. DOI: 10.1038 / ncomms6984

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Милованович Д., Платен М., Юниус М., Дидериксен У. , Шаап И. А. Т., Хонигманн А. и др. (2016). Кальций способствует образованию мезомасштабных доменов синтаксина 1 через фосфатидилинозитол-4,5-бисфосфат. J. Biol. Chem. 291, 7868–7876. DOI: 10.1074 / jbc.M116.716225

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мима, Дж., и Уикнер, В. (2009). Сложные липидные потребности для SNARE- и SNARE-шаперон-зависимого слияния мембран. J. Biol. Chem. 284, 27114–27122. DOI: 10.1074 / jbc.M109.010223

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мин, Д., Ким, К., Хён, К., Чо, Ю. Х., Шин, Ю. К., и Юн, Т. Ю. (2013). Механическое разархивирование и повторное сжатие единого комплекса SNARE обнаруживает гистерезис как механизм создания силы. Nat. Commun. 4: 1705. DOI: 10.1038 / ncomms2692

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Mohrmann, R., De Wit, H., Verhage, M., Neher, E., and Sørensen, J. B. (2010). Для быстрого слияния пузырьков в живых клетках требуется по крайней мере три комплекса SNARE. Наука 330, 502–505. DOI: 10.1126 / science.1193134

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мунк А. С., Кедар Г. Х., ван Веринг, Дж. Р. Т., Васкес-Санчес, С., Хе, Э., Андр, Т. и др.(2016). Удлинение спирали 12 в munc18-1 вызывает праймирование везикул. J. Neurosci. 36, 6881–6891. DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.0007-16.2016

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мюррей Д. Х., Тамм Л. К. (2009). Кластеризация синтаксина-1a в модельных мембранах модулируется фосфатидилинозитол 4, 5-бисфосфатом и холестерином. Биохимия 48, 4617–4625. DOI: 10.1021 / bi17

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мюррей, Д.Х., Тамм Л. К. (2011). Молекулярный механизм синтаксиновой кластеризации, опосредованной холестерином и полифосфоинозитидом. Биохимия 50, 9014–9022. DOI: 10.1021 / bi201307u

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ngatchou, A. N., Kisler, K., Fang, Q., Walter, A. M., Zhao, Y., Bruns, D., et al. (2010). Роль С-конца синаптобревина в формировании пор слияния. Proc. Natl. Акад. Sci. США 107, 18463–18468. DOI: 10.1073 / pnas.1006727107

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Pabst, S., Hazzard, J. W., Antonin, W., Südhof, T. C., Jahn, R., Rizo, J., et al. (2000). Селективное взаимодействие комплексина с нейрональным комплексом SNARE, определение связывающих областей. J. Biol. Chem. 275, 19808–198 18. DOI: 10.1074 / jbc.M002571200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Paddock, B.E., Wang, Z., Biela, L.M., Chen, K., Getzy, M.D., Striegel, A., et al. (2011). Проникновение через мембрану синаптотагмином необходимо для связывания кальция со слиянием везикул in vivo . J. Neurosci. 31, 2248–2257. DOI: 10.1523 / JNEUROSCI.3153-09.2011

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Паннуццо М. , Де Йонг Д. Х., Раудино А. и Марринк С. Дж. (2014). Моделирование слияния полиэтиленгликоля и кальций-опосредованной мембраны. J. Chem. Phys. 140: 124905. DOI: 10.1063 / 1.4869176

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Паризотто, Д., Пфау, М., Шойцов, А., Уайлд, К., Майер, М. П., Мальсам, Дж. И др. (2014). Расширенная спиральная конформация в домене 3a munc18-1 обеспечивает матрицу для сборки комплекса SNARE (рецептор белка прикрепления растворимого N-этилмалеимида). J. Biol. Chem. 289, 9639–9650. DOI: 10.1074 / jbc.M113.514273

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Парк, С., Бин, Н. Р., Раджа, М. М., Ким, Б., Чоу, Т. К., Кан, С. и. A., et al. (2016). Конформационные состояния синтаксина-1 управляют необходимостью связывания N-пептида при экзоцитозе клеток PC12 и Caenorhabditis elegans . Мол. Биол. Cell 27, 669–685. DOI: 10.1091 / mbc.E15-09-0638

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пьер, М. , Десфужер, Ю., Мишайя, Л., Шмидт, А., и Майер, А. (2015). Трансмембранные домены вакуолярных белков SNARE служат неспецифическими мембранными якорями с неравными ролями в смешивании липидов. J. Biol. Chem. 290, 12821–12832. DOI: 10.1074 / jbc.M115.647776

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пуарье, М.А., Сяо, В., Макоско, Дж. К., Чан, К., Шин, Ю. К., и Беннет, М. К. (1998). Синаптический комплекс SNARE представляет собой параллельный четырехцепочечный спиральный пучок. Nat. Struct. Мол. Биол. 5, 765–769. DOI: 10.1038 / 1799

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Rabe, M., Aisenbrey, C., Плугацкова, К., де Верта, В., Бойл, А. Л., Брюггеман, Д. Ф. и др. (2016). Пептид со спиральной спиралью, формирующий липидные бислои при слиянии. Biophys. J. 111, 2162–2175. DOI: 10.1016 / j.bpj.2016.10.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рикман, К. , Медайн, К. Н., Дан, А. Р., Моултон, Д. Дж., Мандула, О., Халемани, Н. Д. и др. (2010). Конформации белка t-SNARE, сформированные липидным микроокружением. J. Biol. Chem. 285, 13535–13541.DOI: 10.1074 / jbc.M109.0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рисселада, Х. Дж., И Грубмюллер, Х. (2012). Как молекулы SNARE опосредуют слияние мембран: недавние выводы из молекулярного моделирования. Curr. Мнение. Struct. Биол. 22, 187–196. DOI: 10.1016 / j.sbi.2012.01.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рисселада, Х. Дж., Куцнер, К., и Грубмюллер, Х. (2011). В кадре: визуализация событий слияния, опосредованных SNARE, в молекулярных деталях. Chembiochem 12, 1049–1055. DOI: 10.1002 / cbic.201100020

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ризо, Дж., Чен, X., и Арак, Д. (2006). Раскрытие механизмов синаптотагмина и функции SNARE в высвобождении нейромедиаторов. Trends Cell. Биол. 16, 339–350. DOI: 10.1016 / j.tcb.2006.04.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Роде Дж., Дитрих Л., Лангош Д. и Унгерманн К.(2003). Трансмембранный домен Vam3 влияет на состав цис-комплексов, — и транс- -SNARE, способствуя слиянию гомотипических вакуолей. J. Biol. Chem. 278, 1656–1662. DOI: 10.1074 / jbc.M209522200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Роу, Дж., Калегари, Ф., Таверна, Э., Лонги, Р., и Роза, П. (2001). Синтаксин 1a доставляется в апикальный и базолатеральный домены эпителиальных клеток: роль белков munc-18. J. Cell Sci. 114, 3323–3332.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Рой, Р., Пепловска, К., Роде, Дж., Унгерманн, К., и Лангош, Д. (2006). Роль трансмембранного сегмента Vam3p в гомодимеризации и образовании комплекса SNARE. Биохимия 45, 7654–7660. DOI: 10.1021 / bi052620o

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рю, Дж. К., Ян, Р., Юн, Т. Ю. (2016). Обзор: прогресс в понимании разборки комплексов SNARE, опосредованной N-этилмалеимид-чувствительным фактором (NSF). Биополимеры 105, 518–531. DOI: 10.1002 / bip.22854

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Зайлер, Ф., Мальсам, Дж., Краузе, Дж. М., и Слнер, Т. Х. (2009). Роль комплексных липидных взаимодействий в слиянии мембран. FEBS Lett. 583, 2343–2348. DOI: 10.1016 / j.febslet.2009.06.025

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ши, Л., Шен, К. Т., Киль, А., Ван, Дж., Ван, Х. В., Мелиа, Т. Дж. И др.(2012). Белки SNARE: один для слияния и три для сохранения открытой поры слияния. Science 335, 1355–1359. DOI: 10.1126 / science.1214984

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сиддики, Т. Дж., Витес, О., Стейн, А., Хайнцманн, Р., Ян, Р., и Фасшауэр, Д. (2007). Детерминанты регуляции синаптобревина в мембранах. Мол. Биол. Cell 18, 2037–2046. DOI: 10.1091 / mbc.E07-01-0049

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Зибер, Дж.J., Willig, K. I., Kutzner, C., Gerding-Reimers, C., Harke, B., Donnert, G., et al. (2007). Анатомия и динамика супрамолекулярного мембранного белкового кластера. Наука 317, 1072–1076. DOI: 10.1126 / science.1141727

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Синха Р., Ахмед С., Ян Р. и Клингауф Дж. (2011). Для слияния везикул в синапсах центральной нервной системы достаточно двух молекул синаптобревина. Proc. Natl. Акад. Sci. СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ АМЕРИКИ. 108, 14318–14323. DOI: 10.1073 / pnas.1101818108

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Смирнова, Ю. Г., Марринк, С. Дж., Липовски, Р., Кнехт, В. (2010). Хвосты, подверженные воздействию растворителя, как предварительные переходные состояния для слияния мембран при низкой гидратации. J. Am. Chem. Soc. 132, 6710–6718. DOI: 10.1021 / ja

0x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Stelzer, W., Poschner, B.C., Stalz, H., Heck, A.Дж., И Лангош Д. (2008). Конформационная гибкость, специфичная для последовательности трансмембранных спиралей SNARE, исследованная с помощью обмена водород / дейтерий. Biophys. J. 95, 1326–1335. DOI: 10.1529 / biophysj.108.132928

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стивенс М. Дж., Хох Дж. Х. и Вульф Т. Б. (2003). Понимание молекулярного механизма слияния мембран из моделирования: доказательства ассоциации расширенных хвостов. Phys. Rev. Lett. 91: 188102.DOI: 10.1103 / PhysRevLett.91.188102

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Саттон, Р. Б., Фасшауэр, Д., Ян, Р., и Брюнгер, А. Т. (1998). Кристаллическая структура комплекса SNARE, участвующего в синаптическом экзоцитозе, с разрешением 2,4 Å. Nature 395, 347–353. DOI: 10.1038 / 26412

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сзуле, Дж. А., Юнг, Дж. Х., и МакМахан, У. Дж. (2015). Структура и функция «материала активной зоны» в синапсах. Philos. Пер. R. Soc. В 370: 20140189. DOI: 10.1098 / rstb.2014.0189

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тахара, М., Корссен, Дж. Р., Тиммерс, К., Бланк, П. С., Уолли, Т., Шеллер, Р. и др. (1998). Кальций может разрушить белковый комплекс SNARE на секреторных пузырьках яиц морского ежа без необратимого блокирования слияния. J. Biol. Chem. 273, 33667–33673. DOI: 10.1074 / jbc.273.50.33667

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тахир, М.А., Лен, Р. К. В., Чой, С., и Александр-Кац, А. (2016). Выступы липидных хвостов, подверженные воздействию растворителя, зависят от состава и кривизны липидной мембраны. Biochim. Биофиз. Acta Biomembranes 1858, 1207–1215. DOI: 10.1016 / j.bbamem. 2016.01.026

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Такамори, С., Холт, М., Стениус, К., Лемке, Э.А., Грёнборг, М., Ридель, Д. и др. (2006). Молекулярная анатомия органеллы трафика. Cell 127, 831–846.DOI: 10.1016 / j.cell.2006.10.030

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тан Дж., Максимов А., Шин О. Х., Дай Х., Ризо Дж. И Зюдхоф Т. К. (2006). Переключатель комплексин / синаптотагмин 1 контролирует быстрый экзоцитоз синаптических везикул. Cell 126, 1175–1187. DOI: 10.1016 / j.cell.2006.08.030

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тарафдар, П. К., Чакраборти, Х., Бруно, М. Дж., И Ленц, Б. Р. (2015). Фосфатидилсерин-зависимый катализ формирования стеблей и пор пептидом синаптобревин JMR-TMD. Biophys. J. 109, 1863–1872. DOI: 10.1016 / j.bpj.2015.08.051

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Токумару, Х., Умаяхара, К. , Пеллегрини, Л. Л., Ишизука, Т., Сайсу, Х., Бец, Х. и др. (2001). Олигомеризация комплекса SNARE с помощью синафина / комплексина важна для экзоцитоза синаптических везикул. Cell 104, 421–432. DOI: 10.1016 / S0092-8674 (01) 00229-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тонг, Дж., Борбат, П. П., Фрид, Дж. Х. и Шин, Ю. К. (2009). Ножничный механизм для стимуляции SNARE-опосредованного смешивания липидов холестерином. Proc. Natl. Акад. Sci. США 106, 5141–5146. DOI: 10.1073 / pnas.0813138106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тримбух, Т., Сюй, Дж., Флаэрти, Д., Томчик, Д. Р., Ризо, Дж., И Розенмунд, К. (2014). Повторное изучение того, как комплексин ингибирует высвобождение нейромедиаторов. eLife 3: e02391. DOI: 10.7554 / eLife.02391

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ульрих А., Беме М. А., Шенеберг Дж., Депнер Х., Сигрист С. Дж. И Ноэ Ф. (2015). Динамическая организация синтаксина-1А в пресинаптической активной зоне. PLoS Comput. Биол. 11: e1004407. DOI: 10.1371 / journal.pcbi.1004407

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

van den Bogaart, G., Holt, M. G., Bunt, G., Riedel, D., Wouters, F. S., and Jahn, R.(2010). Для слияния мембран достаточно одного комплекса SNARE. Nat. Struct. Мол. Биол. 17, 358–364. DOI: 10.1038 / nsmb.1748

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

van den Bogaart, G., Meyenberg, K., Risselada, H.J., Amin, H., Willig, K.I., Hubrich, B.E., et al. (2011). Изоляция мембранных белков за счет ионных белок-липидных взаимодействий. Nature 479, 552–555. DOI: 10.1038 / nature10545

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван Комен, Дж.С., Бай, X., Родки, Т. Л., Шауб, Дж., И МакНью, Дж. А. (2005). Многоосновная юкстамембранная область Sso1p необходима для функции SNARE in vivo . Эукариот. Cell 4, 2017–2028 гг. DOI: 10.1128 / EC.4.12.2017-2028.2005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван Дж., Белло О., Оклер С. М., Коулман Дж., Пинцет Ф., Кришнакумар С. С. и др. (2014). Кальций-чувствительные кольцеобразные олигомеры, образованные синаптотагмином. Proc.Natl. Акад. Sci. США 111, 13966–13971. DOI: 10.1073 / pnas.1415849111

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Weber, T., Zemelman, B.V., McNew, J. A., Westermann, B., Gmachl, M., Parlati, F., et al. (1998). SNAREpins: минимальное оборудование для слияния мембран. Cell 92, 759–772. DOI: 10.1016 / S0092-8674 (00) 81404-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wehland, J. D., Lygina, A. S., Kumar, P., Guha, S., Hubrich, B.E., Jahn, R., et al. (2016). Роль трансмембранного домена в слиянии мембран, опосредованном SNARE: пептидная нуклеиновая кислота / пептидные модельные системы. Мол. Биосист. 12, 2770–2776. DOI: 10.1039 / C6MB00294C

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Уильямс Д., Виконь Дж., Зайцева И., Маклафлин С. и Пессин Дж. Э. (2009). Доказательства того, что электростатические взаимодействия между VAMP2 и кислыми фосфолипидами могут модулировать слияние транспортных везикул с плазматической мембраной. Мол. Биол. Клетка. 20, 4910–4919. DOI: 10.1091 / mbc.E09-04-0284

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wu, Z., Auclair, S. M., Bello, O., Vennekate, W., Dudzinski, N. R., Krishnakumar, S. S., et al. (2016). Слияние нанодисков и клеток: контроль зарождения поры слияния и продолжительности жизни с помощью трансмембранных доменов ловушечного белка. Sci. Rep. 6: 27287. DOI: 10.1038 / srep27287

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сюй, Х., Зик, М., Викнер, У. Т., и Джун, Ю. (2011). Заякоренный липидом SNARE поддерживает слияние мембран. Proc. Natl. Акад. Sci. США 108, 17325–17330. DOI: 10.1073 / pnas.1113888108

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сюй, Ю., Чжан, Ф., Су, З., МакНью, Дж. А., и Шин, Ю. К. (2005). Гемифузия при слиянии мембран, опосредованном SNARE. Nat. Struct. Мол. Биол. 12, 417–422. DOI: 10.1038 / nsmb921

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ян, С.Т., Крейцбергер, А.Дж., Ли, Дж., Кисслинг, В., и Тамм, Л.К. (2016). Роль холестерина в слиянии мембран. Chem. Phys. Липиды 199, 136–143. DOI: 10.1016 / j.chemphyslip.2016.05.003

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Yersin, A., Hirling, H., Steiner, P., Magnin, S., Regazzi, R., Hüni, B., et al. (2003). Взаимодействия между белками слияния синаптических везикул, исследованные с помощью атомно-силовой микроскопии. Proc. Natl. Акад. Sci. НАС.А. 100, 8736–8741. DOI: 10.1073 / pnas.1533137100

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжоу П. , Бакай Т., Ян Х., Панг З. П. и Зюдхоф Т. К. (2013). Заякоренные липидами SNARE, лишенные трансмембранных областей, полностью поддерживают слияние мембран во время высвобождения нейромедиаторов. Нейрон 80, 470–483. DOI: 10.1016 / j.neuron.2013.09.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжоу П., Пан, З. П., Ян X., Zhang, Y., Rosenmund, C., Bacaj, T., et al. (2012). N-пептид синтаксина-1 и Habc-домен выполняют различные важные функции в слиянии синаптических везикул. EMBO J. 32, 159–171. DOI: 10.1038 / emboj.2012.307

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhou, Q., Lai, Y., Bacaj, T., Zhao, M., Lyubimov, A. Y., Uervirojnangkoorn, M., et al. (2015). Архитектура аппарата synaptotagmin-SNARE для экзоцитоза нейронов. Nature 525, 62–67.DOI: 10.1038 / природа14975

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

7 способов показать музыкальность малого барабана — ROB KNOPPER

1.

динамика

динамика, или громкость нот, вероятно, самый простой и наиболее часто используемый способ показать музыкальность. Я не говорю вам менять письменные инструкции и оставлять указанную динамику в музыке. ваша задача — оставаться в пределах текущей динамики, но при этом показывать значительные динамические изменения.у вашей, скажем, меццо-сильной динамики есть низкий и высокий уровень, так что вы можете абсолютно это изучить. твоя работа — исследовать это. тем не менее, вы всегда должны быть осторожны, когда вы переходите на крайние низкие или высокие частоты вашей динамики — если они станут слишком мягкими или слишком громкими, это будет звучать так, как будто вы снижаете или крещендо, или что вы пришел к другой динамике. вы должны играть в игру «насколько громко или тихо я могу играть, не изменяя письменных инструкций».

2. точка удара

от центра к краю, у вас много места для работы.край барабана кажется тонким, а центр — толстым. хотя ни один из них не означает «более интенсивный» или «более расслабленный» сам по себе, все, что он действительно должен обеспечить, — это ощущение движения или движения. если 8 нот подряд имеют одинаковую динамику, но немного меняют тон, это будет звучать так, как будто эти ноты имеют «направление», что и является вашей целью. Вам решать, как использовать эту переменную для изображения любой музыки, которую вы пытаетесь создать.

, когда вы усиливаете фразу, вы можете перемещать палочку от края к центру, а когда вы расслабляетесь, вы можете перемещать ее от центра к краю.или наоборот. Вам также решать, как далеко его переместить. если вы объединяете это с динамическим изменением, имеет смысл сделать длительный ход, хотя это может не сработать, если вы пытаетесь сохранить ту же динамику.

3. Скорость хода

ваша скорость хода может быть от очень медленной до очень высокой или где-то между ними. когда вы играете на малом барабане, физический результат скорости вашего удара: «Какова длина палки на пластике?» если палка находится на голове в течение длительного времени, что является следствием более низкой скорости гребка, тон будет гуще, глубже и шире. Стаккато делает ноту короче, отчетливее, ярче и резче. Фактическая разница в продолжительности времени, в течение которого палка находится на голове, очень мала, и ее результат может быть незаметным. но это один из лучших инструментов фразировки в палитре цветов.

4. Манипуляции с размещением / временем

это очень тонкий момент, и его трудно осуществить. Манипуляция временем — это тонкая настройка ритмического размещения ноты для придания ей музыкального эффекта. Иногда учить этому студентов опасно, потому что это почти всегда приводит к тому, что кто-то сначала звучит так, как будто у него плохой ритм.но я думаю, что важно, чтобы вы усвоили эту концепцию как можно раньше. узнайте, что он существует, и поиграйте с ним самостоятельно.

вернемся к инструменту фразировки №1 динамики. когда вы настраиваете динамику, вы можете играть громче или тише, если она находится в пределах диапазона текущей записанной динамики. то же самое и с размещением. вы можете сыграть что-нибудь на «переднем крае» или «заднем крае» того места, где должно быть математически правильное расположение ноты, и при этом оно все равно может звучать правильно. на самом деле профессиональные оркестры играют с этим постоянно. там есть цитата, и я хотел бы, чтобы кто-нибудь нашел ее, в которой говорится что-то вроде: «Игра с метрономом делает начало такта слишком медленным, а конец такта слишком быстрым». Если мы позволим нашему времени немного высвободиться и выберем размещение на основе эмоций и музыкальной фразировки, некоторые ноты просто займут больше времени, чем другие.

очень важно, чтобы у вас, как у малого барабанщика, был очень хороший ритм, поэтому используйте эту переменную с осторожностью.начни слушать это на других инструментах и ​​тестировать на барабане. просто не ходите на урок, играйте совсем не вовремя и говорите: «Роб сказал мне, чтобы!»

5. rolls: buzz density

У этой техники ограниченное применение: вы можете использовать ее только во время роликов. … но плотность жужжания, которая представляет собой количество отдельных отскоков за удар, является чрезвычайно эффективным инструментом для демонстрации интенсивности или расслабления. Это то, что вы можете регулировать в течение всего цикла, чтобы показать, что музыкальная фраза становится напряженной или теряет напряжение. .

6. Roll: скорость хода

Buzz Rolls дают вам немало художественной лицензии. Помимо выбора плотности заливки каждого штриха, вы можете выбрать, сколько фактических штрихов будет выполнено за отведенное время. чем больше ударов, тем интенсивнее перекат, и наоборот. попробуйте отрегулировать это от начала до конца рулона, чтобы показать наиболее музыкальное направление

7. Интервал между тонкими нотами

Все учат, что флаги, ершики и 4-тактные ершики должны иметь одинаковый интервал, верно? я тоже.однако, если вы думаете чисто музыкальными терминами, более плотное пламя звучит более интенсивно, чем более широкое пламя. вы можете использовать интервалы между нотами благосостояния, чтобы показать свою музыкальную фразировку и характер, при условии, что вы также показываете, что фигуры нот гармонии также очень последовательные и преднамеренные. как и все остальное, не позволяйте этому звучать как «ошибка», но пусть это звучит как решение, которое вы приняли.

Хорошо, теперь мяч на вашей площадке. вперед — начинайте заниматься музыкой!

Малый барабан | музыкальный инструмент

Малый барабан , также называемый боковым барабаном , военный или оркестровый ударный инструмент, имеющий несколько шелковых струн (ловушек), покрытых кишкой, нейлоном, проволокой или покрытой проволокой, натянутыми поперек нижней или малой головки; ловушки сочувственно вибрируют с нижней пластиной (на которую вибрация передается от верхней, или ударной, головы посредством колебаний воздуха внутри барабана), вызывая резкий, пронзительный, относительно высокий звук.Современный малый барабан имеет цилиндрическую оболочку из дерева, фанеры или металла высотой 5–12 дюймов (13–30 см) и диаметром 14–16 дюймов (35–40 см); более глубокие модели, называемые полевыми или гвардейскими барабанами, используются во многих военных оркестрах. Головы, забитые двумя коническими палками, заканчивающимися небольшими бугорками из дерева или нейлона, бывают из телячьей кожи или пластика. Они удерживаются на месте обручем из плотной ткани (на который накладывается мембрана) и контр-обручем. Натяжение мембраны осуществляется винтами, которые действуют независимо на каждую головку, металлическими стержнями или, в настоящее время в основном в армейских оркестрах, веревочными шнуровками.

Силки были известны в Древнем Египте и встречаются на многих современных бубнах Ближнего Востока. В средневековой Европе они появлялись на верхней части, а иногда и на обеих головах барабана табора. Большие версии табора превратились в боковой барабан, когда были приняты две палки, а не одна, а петли были перенесены на нижнюю пластину. Он подвешивался с левой стороны игрока на ремне или плечевом ремне и использовался в паре с боевым патроном в швейцарских пехотных полках ( lansquenet ) с 14 века и позже, впоследствии распространившихся по Европе. Военная роль барабана lansquenet была решающей: он поддерживал темп марша и подавал сигналы к действию.

Ранние формы бокового барабана были равны по высоте или немного превышали диаметр. В них использовались более толстые мембраны и палочки, чем в современных инструментах, что давало более тяжелый и менее яркий звук. Барабан наиболее сильно изменился в 19 веке, стал мелким и часто приобретал латунную оболочку и стержневое или винтовое натяжение. Хотя с начала 17-го века натяжение малых барабанов можно было контролировать с помощью винта или рычага, только в 20-м веке был разработан механизм, позволяющий мгновенно высвобождать их (для специальных эффектов или для предотвращения нежелательных симпатических колебаний, вызываемых другими инструментами).До 20 века мембраны ловушек обычно были из кишечника.

Военная игра на малом барабане была изучена наизусть и в устной традиции в 19 веке, и только с возможным оркестровым использованием барабана музыканты нуждались в нотной записи. Некоторые барабанщики в Базеле, Швейцария, придерживаются особенно сложной традиционной техники игры. Современные композиции и джазовая игра могут потребовать специальных эффектов, например, получаемых при отпускании малых барабанов, ударе по ободу или использовании пальцев, нестандартных палочек или проволочных щеток.Первым убедительно задокументированным оркестровым использованием малого барабана был французский композитор-виртуоз игры на скрипке Марин Марэ в сцене шторма в его опере Alcyone (1706). Он снова появился в опере Россини La gazza ladra (1817; Сорока-воровка ) с сольной партией, но не стал стандартным оркестровым инструментом до тех пор, пока его не использовали Николай Римский-Корсаков и другие русские композиторы конца 19 века. Концерт Geigy Festival Concerto для Базельского барабана с оркестром (1958) был написан швейцарским композитором Рольфом Либерманом.

Оформите подписку Britannica Premium и получите доступ к эксклюзивному контенту.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *