Как ловить язя на донку: Ловля язя на донку

Содержание

Ловля язя на донку

Язь – красивый красноперый представитель семейства карповых, поймать которого желают многие рыболовы. Эта рыба вырастает до солидных размеров и набирает вес до 6 кг, но в уловах в основном преобладают экземпляры не больше 2 кг. Разве этого мало? Когда в садке окажется пяток таких красавцев, можно считать, что рыбалка более чем удалась.

Язя ловят практически на любые снасти. Например, поплавочную удочку или даже спиннинг, ведь несмотря на принадлежность к мирным видам крупная особь не упускает возможности полакомиться мелкой рыбкой. Однако лучшим способом добычи этой рыбы является донка. По крайней мере, так утверждают те рыбаки, которые ловят язей целенаправленно. Донная снасть в такой рыбалке применяется давно и весьма успешно. Больше всего она нравится тем, кто не хочет активно перемещаться по водоему, как при ловле удочкой впроводку или нахлыстом. Здесь все гораздо проще: забросил, установил и сиди себе спокойно жди поклевку.

Донка актуальна с весны и до первых заморозков. Наилучшие результаты она показывает в те несколько весенних дней, когда эта рыба массово кормится. В летний период уловы язя несколько ниже, но с приходом осени ситуация снова меняется в лучшую сторону. Чем холоднее вода, тем глубже скатывается объект ловли. Именно в это время ловля язя на донку наиболее добычлива.

Перспективные места

Сразу стоит сказать, что язь обитает в реках с достаточно большими глубинами и несильным течением. Встречается он и в больших озерах, но только в проточных. Чистая среда – одно из главных условий, без которого эта рыба просто не сможет выжить. Вода может быть даже немного солоноватая, но не мутная или грязная.

Большую часть времени язь предпочитает держаться на глубине. Периодически он выходит на мелководные участки водоема для поиска пропитания. Поймать его на небольших глубинах можно весной, в посленерестовый период. Летом он может подниматься в верхние горизонты и собирать с поверхности упавших насекомых, но после кормежки всегда возвращается на глубину.

Там же его нужно ловить и осенью.

Где находятся стоянки язя?

В первую очередь опытные рыболовы советуют обратить внимание на такие участки:

  • глубокие места с незначительным течением, расположенные ниже перекатов;
  • заиленные и глинистые речные зоны;
  • водовороты и омуты у подмытых берегов;
  • глубины рядом с опорами гидросооружений.

Именно на таких участках и нужно искать язя. Здесь за одну рыбалку можно «поднять» не один десяток голов, но следует знать, что стайный образ жизни ведет лишь молодняк, тогда как крупные особи обычно держаться обособленно, поодиночке.

Конструкция язевой донки

Удилище

Для ловли язя на донку с берега подойдет среднее по жесткости фидерное удилище с вершинкой, достаточно мягкой для передачи осторожных поклевок. Именно так чаще всего клюет эта рыба. Не стоит использовать слишком длинное удилище, поскольку оно обладает меньшей чувствительностью, что в свою очередь приводит к запоздалым подсечкам и частым сходам.

Рекомендуемая длина – 2,4 метра, это оптимальный вариант для точных забросов на самое разное расстояние.

Катушка

Требования к катушке предельно просты. Она должна обладать высокими силовыми характеристиками, так как язь способен оказать серьезное сопротивление. Еще один момент – качественная равномерная укладка лески. Если правильно подобрать удилище и катушку к нему, снасть будет легкой и удобной в эксплуатации.

Леска

Для ловли язя на донку рыбаки применяют прочные лески, как монофильные, так и плетеные. Выбор между ними зависит от предполагаемой дальности заброса. Для коротких и средних дистанций (не больше 60-70 м) лучше подходит мононить, а для забросов на ямы, расположенные далеко от берега, целесообразнее использовать плетеный шнур.

Оснастка

Стандартная оснастка состоит из грузила весом от 30 до 100 г (зависит от силы течения), поводка и крючка. Груз может быть либо скользящим, либо установленным на отдельном поводке. Некоторые умельцы дополняют оснастку донки спиралевидной кормушкой-пружиной и набивают ее смесями, предназначенными для ловли мирной рыбы. Также возможно применение классической фидерной оснастки.

Прикормка и приманки

В ловле язя на донку с кормушкой далеко не последнюю роль играет состав прикормочной смеси. Дело в том, что этот привереда порой игнорирует все, что ему предлагают (или просто не видит), но как только рядом с насадкой появляется источник сильного запаха, сразу же подходит и начинает клевать. Именно поэтому прикормка для такой рыбалки должна быть простой, но очень душистой. В качестве основы можно взять жмых или гороховую кашу, затем добавить к ней немного распаренного зерна и сухарей, а последним компонентом будет грунт (желательно из того же водоема). Вот и все, прикормка готова, можно набивать кормушку или лепить шары и бросать их в точку ловли.

Приманкой для ловли язя на донку традиционно служат черви, насекомые и личинки. Иногда эта рыба неплохо берет на вареную кукурузу и горох, но у такой насадки есть один существенный недостаток. Во время заброса, особенно на дальнее расстояние, когда требуется сильный резкий взмах, она запросто может слететь с крючка. Хотя если слишком усердствовать, та же участь ждет и майского жука или кузнечика.

Техника ловли язя на донку с берега

Снасть забрасывается под определенным углом против течения. Когда груз «поймает» дно, нужно выбрать избыток лески, то есть, натянуть ее, и установить удилище на подставку так, чтобы его кончик был направлен в точку ловли. Это необходимо для того, чтобы клюнувшая рыба не сразу ощутила сопротивление и могла хорошо заглотить приманку. После этого в место ловли забрасывается прикорм. Иногда рыболовы за день или два до рыбалки закладывают на выбранном участке объемную приваду, чтобы приучить язя к точке. Правда, она может привлечь и немало других речных обитателей, тогда в улове будет преобладать разная рыба, а язь в лучшем случае окажется в прилове.

Язевая поклевка выражается в едва заметном наклоне вершинки, поэтому надо внимательно за ним следить.

Если опоздать с подсечкой, рыба выплюнет «отяжелевшую» насадку и, скорее всего, больше к ней не подойдет.

При вываживании язь энергично сопротивляется, стараясь утянуть оснастку на глубину. Когда удается поднять его на поверхность, он бьет хвостом по воде и создает много шума. После такой борьбы его родственники не скоро решатся на поклевку, поэтому следует набраться терпения и ждать. Иногда между поклевками проходит довольно много времени, но ожидание того стоит, ведь язь – замечательный трофей.

Совет

У объекта ловли есть одно слабое место, которое играет на руку рыболову. Почувствовав подвох (крючок во рту) он с первых секунд начинает бороться изо всех сил, поэтому быстро выдыхается, ослабевает и в определенный момент становится абсолютно пассивным. Это значит, что при вываживании не стоит торопиться. Рано или поздно этот сильный, но совершенно невыносливый боец сдастся, и тогда его можно будет легко вытащить из воды.

Ловля язя на донку видео

Другие видео из категории «Ловля язя»:

  • Ловля рыбы голавль спиннингом на воблеры. Успешная рыбалка на Хопре сплавом на голавля
  • Капкан для ловли щуки.
  • Пение соловья приманит даже язя ПРИКОЛЫ НА РЫБАЛКЕ 2015.Пародия на язь рыба моей мечты
  • Русская Рыбалка 3.9 Озеро, Южный залив. Ловим рыбу Язь
  • Реальная рыбалка ловля рыбы на рыбхозе почти вся рыба
  • Универсальная поверхностная снасть для рыбалки.
  • секреты рыбалки давняя снасть ловля на кольцо РСН _ long fishing tackle fishing on the ring
  • Ловля голавля на перетяжку (Тюкалка)
  • Язь против еды — Финляндия (Выпуск 27)
  • Ветлуга 2014 язь, кренки.

    Интересное

    Ссылки по теме «ловля язя на ходовую донку»

    • Рыба язь благородная и сильная, а ловить язя одно удовольствие. Рыбалка на язя может происходить с помощью различных рыболовных снастей. Именно поэту ловля язя весьма доступна для рыболовов увлечённых ловлей рыбы на самые различные снасти. Язь успешно ловится на фидер, поплавочную удочку, спиннингом на воблеры и прочие приманки. Но в этот раз язь на видео попался на донную снасть, а точнее не самую обычную донку с кормушкой.
      http://bolshayaribalka.ru/forum/index.php/blog/5/entry-300-lovlya-na-donku-i-donka-na-yazya-i-podyazka-statya-v/
    • Если решено охотиться за язем в малой реке, то лучше собрать удочку для ужения в проводку.Ловля на ходовую донку. Для ловли весеннего язя может применяться и донная удочка. Она оснащается небольшой кормушкой или скользящим грузилом. Такой снастью удобно ловить язя недалеко от берега на небольшой реке. В качестве удилища подойдет фидерная «палка» длиной 3,6-3,*** м с чувствительным квивертипом (вершинкой).
      http://landfish.ru/articles/vesennyaya-lovlya-yazya
    • Техника ловли на ходовую донку. Итак, лодку заякорили, отпускаем тормоз катушки – груз планирует на дно, удилище удерживаем параллельно поверхности воды.Кстати говоря, замечено, что такие вот придержки значительно увеличивают число поклевок язя и крупной плотвы. Рыбаки, кто много лет ловит спиннинговым джигом и ходовой донкой, уверяют, что оба способа ловли похожи, по меньшей мере, требуют творчества в технике проводок и подборе продолжительности пауз.
      http://lovimvse.ru/?p=1387
    • Успех ловли на ходовую донку во многом зависит от качества проводки, которая в свою очередь зависит от правильно подготовленной снасти. Снасти для ловли на ходовую донку состоят из удилища, катушки и лесы с грузилами и крючками.В зависимости от водоема, характера места и выбранной насадки, на ходовую донку можно ловить голавля, язя, леща, форель, хариуса, усача, судака и других рыб, держащихся на течении.
      http://klub-rybaka.com/sposoby-lovli-ryby/450-lovlya-na-hodovuyu-donku.html
    • С ходовой донкой охотятся на любую хищную и мирную рыбу. В европейской части нашей страны это в первую очередь голавль, язь, лещ, густера, крупная плотва, щука, окунь, судак. На севере и востоке в улове бывают и такие осторожные рыбы, как форель, кумжа, ленок, мальма.Такая оснастка больше подходит для ловли на сильном течении. Размеры на всех рисунках даны в сантиметрах. Надо сказать, что ужение ходовой донкой довольно развито на севере нашей страны.
      http://vamm.ucoz.com/publ/rybalka/fider/lovlja_khodovoj_donkoj/30-1-0-949
    • Тактика ловли язя на донку оправдывается прежде всего весной, когда повышенный уровень воды не позволяет эффективно ловить иными снастями. Именно в это время он очень активно питается и жор длится две-три недели, а так как в весенней реке корма для всех не хватает, то его можно легко чем-либо соблазнить. Кроме того, ранней весной язь менее осторожен и в больших количествах мигрирует на места нереста.
      http://profyfish.ru/lovlia_iazia_na_donku.php
    • Прикормка для ловли язя на донку.Поводки можно легко заменить, как и кормушку. Получается, что у данного монтажа практически нет недостатков. Ходовая донка. Данная оснастка годится в тех случаях, когда нет возможности или трудно ловить поплавочной удочкой. Снасть состоит из спиннинга длиной от 1,7 до 2 метров, инерционной катушки, лески и монтажа.
      http://ribalka-vsem.ru/index/donka/0-342
    • Иногда язи и подъязки стояли под самым берегом и в его подмывах. В некоторых реках в осенние оттепели пока еще можно хорошо ловить возле перекатов, у затопленных коряг и свай, причем с прогревом воды на относительно малой глубине. Ловля язя осенью на донку.Самая подходящая снасть для ловли язя в таких местах будет живцовая. Это может быть обычная живцовая удочка или ходовая донка.
      http://www.nExplorer.ru/news__11758.htm
    • Ловля язя на донку привлекательна, прежде всего тем, что рыболову достаточно забросить снасть и терпеливо дожидаться момента поклевки, в отличие от активной ловли поплавочной удочкой или спиннингом. Донками можно ловить начиная с ранней весны и до глубокой осени, пока водоемы не покроются льдом. Но, все же наиболее успешной она бывает весной, первые несколько недель после нереста и в течение лета.
      http://morefishing.ru/donka/yaz-na-donku/
    • Весной язя ловят на донку весьма удачно, причем независимо от погоды. Данный тип рыбной ловли довольно популярен. Это объясняется хорошей уловистости данного типа снастей. При условии хорошей настройки снасти, конечно.Еще я люблю весеннюю ходовую рыбалку, когда продвигаешься по берегу с летней мормышечной снастью и пытаешь счастье на тихих плесах, расположенных выше или ниже быстрины реки, на тихих перекатах.
      http://ribalka-up.ru/yaz/lovlya-yazya-vesnoj.html
  • Навигация

    Категории

    Навигация

Небрежный подход к ловле язя

Ряд коммерческих рыболовных хозяйств по всей стране разводят породу рыбы, которая на первый взгляд немного похожа на плотву, но на крючке делает мощный рывок, как голавль. Иде — это «новички в блоке».

Как и F1, язь хорошо питается зимой, что позволяет животным вести круглогодичную жизнь, когда другие виды отключились от холода. Летом, однако, это свирепые кормушки, которые, если у вас коснется косяк, будут поддерживать активность, позволяя вам быстро набрать большой вес.

Озеро Яси в районе Хау-Энд-Фишерис в Бедфордшире представляет собой бассейн змеиного типа, в котором содержится большая голова язя, иногда почти 2 фунта. Именно здесь Амер Джавад, поддерживаемый Daiwa, недавно добился успеха в нескольких открытых матчах, поэтому мы вместе с ним познакомились с тактикой, которая позволила ему ловить большие веса в начале лета.

Ide — энергичные скребки, поэтому не спешите, это может привести к зацеплению за крюк.

«Первое, что я хочу отметить, это то, что в этом озере нет большой головы карпа, и наряду с язя есть много усачей и скиммеров, так что это немного отличается от стандартной рекламы», Амер объяснил.«При этом может быть большая популяция язя, но их не так-то легко поймать, поскольку они не просто кормятся на одном или двух уровнях воды, и они действительно очень пугливые рыбы.

«Мне потребовалось несколько спичек, чтобы придумать способ ловить большой вес. Это немного беспорядочно, но это определенно позволило мне вытащить рыбу и заставить ее кормиться в течение длительного времени ».

Амер объяснил, что он выяснил, что язь наиболее уверенно питается в верхних слоях, и что они реагируют на мутное кормление в воде, которое затем побуждает их питаться.Он объяснил, что он поигрался с несколькими рецептами, но после нескольких посещений озера он придумал темную, неаккуратную смесь, которая привела к увеличению улова.

«Это темная тонкая смесь на основе торфа, в которую я добавляю порошок патоки и черный Tracix, чтобы сделать ее еще более темной», — сказал Амер. «После того, как все ингредиенты были смешаны досуха, я добавляю много воды, пока не получу липкую помойку, которую я хочу выпасть из небольшого Toss Pot комом, а затем быстро сформировать облако, когда оно попадет в воду. , чтобы создать привлекательный темный столбец при падении вниз.

Amer’s Super Sloppy Mix

1 Возьмите сухую смесь мелкого торфа, сушеной патоки и черного Tracix.

2 Хорошо перемешайте ингредиенты и залейте большим количеством воды.

3 Вам нужен липкий отстой, который распадется при контакте с водой.

«В смеси также мало пищи, поэтому для некоторой дополнительной привлекательности я добавляю несколько мелко нарезанных червей и пару роликов к каждой« капле », которую я кормлю.”

Темный помой готовится всего за несколько минут, и пока он пачкает руки, Амер добавил, что он используется при нацеливании на рыбу, кормящуюся в воде.

«Я также обнаружил, что после периода ловли на мелководье язь, кажется, либо отступает, либо опускается и питается дном», — объяснил он. «Когда это произойдет, вам понадобится План Б, и снова, после небольших проб и ошибок, я обнаружил, что они реагируют на большой горшок с личинками, скармливаемыми плотно к острову.”

Расположите горшок для бросания рядом с концом удилища, чтобы повысить точность при падении помоя в воду.

Указав, что язя — застенчивые кусачки, Амер затем объяснил каждую из трех оснасток, которые он установил, чтобы позволить ему ловить рыбу на любом уровне.

«Первая установка предназначена для ловли с дна, примерно в метре от острова в более глубокой воде».

Поплавок представляет собой тонкий стержень из карбона 4х10 с полой щетиной, установленный на 0.13-миллиметровая линия электропередачи и выстрел из трех винтовок No10, размещенных непосредственно над 4-дюймовым, 0,10-миллиметровым звеном крючка, с крючком Drennan Silverfish Match 18 размера без бородки.

«Я предпочитаю ловить свою короткую оснастку поплавками с карбоновым стержнем, так как я обнаружил, что проволочный стержень, кажется,« подпрыгивает »сильнее, когда вы вылетаете или ударяетесь, что увеличивает вероятность запутывания», — продолжил он. «Говорят, что карбоновый шток взводится не так быстро, как проволочный, но это не проблема, когда такелаж такой короткий».

С помощью съемника любой карп или усач можно быстро приручить.

Другой взгляд на буровую установку также показал, что Амер зажал полу-стил №12 прямо над глазком поплавка.

«Я обнаружил, что, добавляя это, он опускает леску близко к щетине, что снижает сопротивление, когда рыба берет наживку, а также делает оснастку более чувствительной, поэтому она лучше показывает застенчивые уловки приманки», добавил он.

Такая же оснастка, что и первая, была установлена, чтобы позволить амерам ловить рыбу вплотную к острову. Тем не менее, он проложил это по вертикали, чтобы ловить наживку на дне — на дальнем выступе, где вода становилась мелкой.У оснастки также была длинная леска между наконечником удилища и поплавком, так как вода была не такой цветной, как можно было бы ожидать на типичной рекламе, из-за низкой плотности карпа в озере, поэтому он хотел не напугать рыбу, размахивая удочкой над головой.

Амер указал, что если язь действительно начнет соревноваться, они выйдут прямо на поверхность, и поэтому, если он начнет видеть водовороты на вершине, он будет использовать свою третью оснастку, которая состояла из небольшого поплавка, который имел одиночный выстрел №10 закреплен прямо под ним, так что он сидит низко в воде, чтобы обеспечить меньшее сопротивление.Капля была установлена ​​на 0,13 мм Power, к которой он прикрепил 6 дюймов, 0,10 мм звено с крючком Silverfish Match 18 размера.

Все три оснастки были прикреплены к верхним комплектам, которые имели удвоенные твердые резинки No4 на установке съемника, которые тормозили энергичный язь, когда они болтались, а также предлагали множество дополнительных возможностей, чтобы приручить карпа или усач, если он один. разбей вечеринку!

Сеанс начался с того, что Амер ловил рыбу примерно в метре от острова, где он установил свою оснастку для ловли рыбы в четырех дюймах от палубы.Он объяснил, что планировал рано поймать рыбу на более глубокой воде и попытаться вытащить ее в воду, чтобы через некоторое время он мог поймать свою оснастку «blob».

Yasi’s Pool также имеет много мелких серебряных монет, поэтому, чтобы не слишком приставать к нему, Амер начал с 1-дюймовой секции червя, что было лучшим вариантом в последних матчах, на которые он рыбачил. Затем его выгружали, и как только помои были поданы, он поднял оснастку и медленно бросил наживку через темное облако.

«Укусы могут наступить не сразу, так как часто приходится ждать, пока появится язь», — пояснил он. «Если я не получу укуса в течение 60 секунд, я отправляю его с еще одной порцией помоя и повторяю процесс, пока не начну кусать».

Прошло около 20 минут, прежде чем он поймал своего первого язя, а затем у Амера была цепочка рыбы, прежде чем он начал регулярно клевать леской, что побудило его отмелить еще на два дюйма.

«Сначала меня приставали маленькие рыбки», — прокомментировал он.«Теперь язь появился в большом количестве, они будут доминировать в верхних слоях, поэтому я не ожидаю, что я поймаю еще много мелких рыбок. Если они действительно станут проблемой, то, вероятно, это произойдет из-за того, что идея отступила, что является признаком того, что мне придется переключиться на свой план Б. »

Амеры собрали хорошую серию качественной рыбы в начале сеанса, которая включала несколько особей весом более 1 фунта. В какой-то момент у него даже было несколько рыб, кипящих на поверхности, что побудило его потянуться за оснасткой «blob».Однако рыба не казалась слишком счастливой взять наживку на такой мелководье, предпочитая вместо этого последовать за червем вниз, а затем взять его в середине воды, хотя, когда он ловил рыбу «с вершины», это было лучше.

Затем, по мере продолжения сеанса, частота поклевок уменьшалась, и амеры начали ловить язя меньшего размера. Он предположил, что, как и раньше, когда он ловил спички на месте, рыба начала отступать от мелкой лески. Он также начал ловить больше маленьких серебряных рыбок — еще один признак того, что ему придется что-то менять.Итак, потянувшись за набором для чашек, он приступил к засадке большой порции личинок на остров, справа от его мелкой лески, и позволял им осесть, прежде чем бросить на них приманку.

Еще пять минут на червя и помои — достаточно времени, чтобы убедиться, что рыба двинулась, поэтому Амер впервые увидел палубу с красной личинкой на крючке. В результате получилось несколько маленьких тараканов. Язь еще не въехал, но с маленькими серебристыми личинками, питающимися личинками, он объяснил, что, если он просто выйдет из лески и дождется прибытия рыбы, корм будет убран, чтобы обеспечить достаточное количество для кормления. Чтобы найти идеал, Амер долил в ряд три четверти горшочка с личинками и позволил ему снова осесть.

Уловка сработала: когда он в следующий раз отправился на остров, он снова начал ловить. Чтобы поддерживать интерес рыбы до конца сеанса, он регулярно добавлял больше личинок, когда укусы замедлялись.

Амер подсчитал, что у него было больше 50 фунтов, когда он вытащил сетку в конце трехчасовой тренировки. Это был потрясающий улов, поэтому, если у вас есть местное заведение, которое может похвастаться запасом язя, секрет раскрыт — хватайтесь за червяк и помои!

Более 50 фунтов менее чем за три часа.Лучшая упаковка!

Место проведения

Как положить конец рыболовству

Расположение: How End Road, Houghton Conquest, Bedford MK45 3JT

Контактное лицо: Фил Стоун по телефону 07753 743802

Веб-сайт: www.howendfisheries.co.uk

Нравится то, что вы видите?

Или купите единичный выпуск

Двойное нацеливание для преодоления текущих проблем в лечении множественной миеломы CAR Т-клетками

Front Oncol.2020; 10: 1362.

Отделение гематологии, Онкологический центр Амстердама, Амстердам UMC, Vrije Universiteit Amsterdam, Амстердам, Нидерланды

Отредактировал: Питер Броссарт, Боннский университет, Германия

Рецензент: Бипуленду Йена, независимый исследователь, Сан-Диего , Соединенные Штаты; Михаэль Хундемер, Университетская больница Гейдельберга, Германия

Эта статья была отправлена ​​в раздел «Раковый иммунитет и иммунотерапия» журнала «Границы в онкологии»

Поступила 13 февраля 2020 г .; Принят в печать 29 июня 2020 г.

Авторские права © 2020 van der Schans, van de Donk и Mutis.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (CC BY). Использование, распространение или воспроизведение на других форумах разрешено при условии указания автора (авторов) и правообладателя (ов) и ссылки на оригинальную публикацию в этом журнале в соответствии с принятой академической практикой. Запрещается использование, распространение или воспроизведение без соблюдения этих условий.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

В эпоху многообещающих новых стратегий таргетной иммунотерапии множественной миеломы (ММ) первая серия клинических испытаний CAR Т-клеток, нацеленных на антиген созревания В-клеток, специфичный для плазматических клеток (ВСМА), показала отличные результаты. скорость отклика. Однако в долгосрочной перспективе ММ, по-видимому, ускользает от терапии, вероятно, из-за начальной низкой и гетерогенной экспрессии или подавления экспрессии BCMA. Несколько других молекул, нацеленных на Т-клетки CAR в ММ, экспрессируются на высоких уровнях на клетках ММ, но многие из этих привлекательных мишеней также экспрессируются на различных, иногда жизненно важных, незлокачественных клетках, что создает серьезный риск для целевых и не опухолевых клеток. побочные эффекты.Таким образом, CAR T-клеточная терапия для MM сталкивается с двумя неотложными проблемами: (i) повышение эффективности CAR T-клеток BCMA и (ii) установление MM-селективности, даже когда CAR T-клетки направлены против не полностью MM-специфических целевых антигенов. . В этом обзоре мы опишем текущие попытки решения этих проблем, с особым акцентом на то, как двойное таргетирование на ЦАР может быть применено для решения обеих проблем.

Ключевые слова: химерные антигенные рецепторные Т-клетки, множественная миелома, двойное нацеливание, ускользание от антигена, выбор мишени, расщепленная передача сигналов злокачественное разрастание моноклональных плазматических клеток в костном мозге.Будучи вторым по частоте гематологическим злокачественным новообразованием, ММ является причиной 2% всех случаев смерти от рака в США по состоянию на 2019 год (1). В то время как терапия ММ на протяжении десятилетий основывалась на ряде алкилирующих агентов, причем основным выбором был мелфалан, с начала века возможности лечения пациентов с ММ были значительно улучшены благодаря успешному применению иммуномодулирующих препаратов, ингибиторов протеасом, гистонов. деацетилазами и моноклональными антителами (2). Хотя каждый из этих новых методов лечения значительно улучшал результаты лечения пациентов, ММ по-прежнему остается неизлечимой болезнью для большинства пациентов.У большинства, если не у всех пациентов развивается резистентность даже к тройной комбинированной терапии. Ожидаемая продолжительность жизни пациентов с множественной лекарственной устойчивостью очень коротка, что требует более эффективных, потенциально лечебных подходов.

В течение многих десятилетий постоянно наблюдалось, что активность против ММ может быть достигнута за счет опосредованного донорскими Т-клетками эффекта трансплантата против миеломы после трансплантации аллогенных стволовых клеток. Долгосрочная выживаемость части пациентов благодаря трансплантации аллогенных стволовых клеток ясно показывает, что мощный цитотоксический механизм Т-клеток способен уничтожать ММ-клетки с множественной лекарственной устойчивостью.Следовательно, терапия на основе Т-клеток, при условии, что она широко применима, доступна по цене и может быть сделана избирательной для нацеливания на клетки ММ, может быть очень полезной для достижения конечной цели лечения ММ. За последнее десятилетие Т-клетки, сконструированные с помощью аутологичных химерных антигенных рецепторов (CAR Т-клетки), нацеленные на опухолевые антигены клонов, такие как B-клеточный специфический антиген CD19, стали успешным терапевтическим средством с очень высокими показателями успеха при B. -клеточные злокачественные новообразования (3). Клинические испытания, проведенные с CD19 CAR Т-клетками, привели к эффективному устранению злокачественных, а также здоровых B-клеток (4–6).Поразительные ремиссии не были скомпрометированы крайними неуправляемыми побочными эффектами из-за удаления здоровых B-клеток. Следовательно, сегодня два метода лечения CAR Т-клетками на основе CD19 были одобрены FDA в качестве терапевтического средства для лечения пациентов с острым лимфобластным лейкозом и диффузной крупноклеточной лимфомой.

BCMA: Идеальная автомобильная цель MM?

Благодаря успеху CD19 CAR T-клеток, несколько CAR T-клеточных терапий также разрабатываются для MM, среди которых основные усилия были направлены на CAR T-клетки, нацеленные на антиген созревания B-клеток, BCMA (7 –11).Выбор BCMA, уже открытого в 1992 г. в качестве аналога транслокации с геном IL2 у пациента с Т-клеточной лимфомой, в качестве основной мишени для CAR Т-клеток был очевиден, поскольку BCMA обычно экспрессируется только на субнаборе зрелых B -клетки и на плазматических клетках, продуцирующих антитела, включая их злокачественные аналоги, клетки ММ. Таким образом, BCMA является безопасной мишенью, потому что, за исключением аплазии плазматических клеток, не ожидается никакого риска побочных эффектов, связанных с воздействием на мишень, вне опухолевых эффектов, когда BCMA нацелена на CAR T-клетки.Кроме того, было показано, что BCMA важен для пролиферации и выживания клеток MM, что является еще одной важной особенностью, подтверждающей ценность BCMA как подходящей мишени для иммунотерапии (12).

С другой стороны, в нескольких исследованиях было обнаружено, что экспрессия BCMA в клетках MM неоднородна, с чрезвычайно низкими уровнями экспрессии у некоторых пациентов (13). Кроме того, в недавнем исследовании редактирования генов CRISPR на уровне всего генома BCMA не был обнаружен среди более чем 90 генов, необходимых для ММ (14). Эти свойства не соответствуют описанию «идеальной» мишени для иммунотерапии (15, 16).

Первое исследование на людях с использованием CAR Т-клеток, нацеленных на BCMA, было проведено Национальным институтом рака (NCI) на пациентах, подвергавшихся тщательному предварительному лечению. На самом высоком протестированном уровне дозы общая частота ответа [≥partial response (PR)] составляла 81% у пациентов с медианой 10 предшествующих линий терапии (17). На данный момент существуют два продукта CAR T-клеток, которые находятся на очень продвинутом уровне с точки зрения клинических испытаний, и оба в настоящее время рассматриваются регулирующими органами для их применения у пациентов с поздней стадией ММ.Сюда входит идекабтаген vicleucel (ide-cel; bb2121), который экспрессирует одноцепочечный вариабельный фрагмент, нацеленный на мышиный ВСМА, с костимулирующим мотивом 4-1BB. В исследовании фазы 1 с ide-cel, по крайней мере, PR был достигнут у 85% [включая полный ответ (CR) у 45%] пациентов, получавших интенсивное предварительное лечение, со в среднем 7 предшествующими линиями терапии. Медиана ВБП у пациентов, получивших ≥150 × 10 6 CAR Т-клеток, составила 11,8 месяцев (8). Второй продукт CAR Т-клеток, представленный регулирующим органам, — это JNJ-4528 (LCAR-B38M), который представляет собой терапию CAR Т-клеток на основе 4-1BB с 2-мя нацеливающими доменами BCMA, что обеспечивает высокую авидность связывания. .JNJ-4528 был оценен в исследовании CARTITUDE-1 у пациентов, получавших иммуномодулирующие препараты, ингибиторы протеасом и антитела к CD38 (18). Предварительные результаты для первых 29 пациентов, получавших JNJ-4528 (целевая доза: 0,75 × 10 6 CAR Т-клеток / кг), продемонстрировали 100% -ный ответ с CR в 69%. При коротком среднем периоде наблюдения в 6 месяцев у 27 из 29 пациентов не наблюдалось прогрессирования. Тот же самый продукт был также оценен в исследовании LEGEND-2 на популяции пациентов, менее интенсивно получавших предварительное лечение в Китае.Результаты одного центра показали, что по крайней мере PR был получен у 88% пациентов (CR у 74%) при медиане 3 предшествующих линий терапии (10, 19). Медиана ВБП составила 19,9 месяца (28,2 месяца для пациентов с CR) (10). В этих исследованиях токсичность включала синдром высвобождения цитокинов, цитопении и инфекции, в то время как неврологическая токсичность наблюдалась реже, чем наблюдалась в исследованиях с CD19 CAR Т-клетками.

В целом эти исследования демонстрируют, что независимо от того, какая конструкция CAR Т-клеток была использована, ранние клинические ответы на BCMA CAR T-клетки очень хорошие, но в исследованиях с достаточным последующим наблюдением многие пациенты имеют короткую продолжительность ремиссии. , и показывают рецидив после терапии CAR T, нацеленной на BCMA (8, 10, 20).Пациенты с рецидивом демонстрируют отсутствие персистенции CAR T-клеток in vivo и BCMA-низкое или в некоторых случаях BCMA-отрицательное заболевание, которое может быть связано с низкой и гетерогенной экспрессией или подавлением BCMA с поверхности клетки (17 , 21–24). Следовательно, предотвращение ускользания MM-клеток от терапии BCMA CAR Т-клетками в настоящее время является важной задачей. Например, улучшение конструкции CAR для предотвращения истощения Т-клеток, предотвращение быстрого развития фенотипа эффекторных Т-клеток памяти путем введения CAR в наивные или центральные Т-клетки памяти или отказ от тонической передачи сигналов CAR может еще больше улучшить исход пациентов (25, 26).В качестве альтернативы есть также несколько других потенциальных молекул-мишеней, экспрессируемых на высоких и гомогенных уровнях на поверхности клеток ММ. Как указано в следующем разделе, CAR T-клетки против этих молекул также разрабатываются и тестируются в доклинических условиях или даже в клинических испытаниях. Тем не менее, все эти «альтернативные» мишени также экспрессируются на некоторых различных незлокачественных клетках, что создает потенциальный риск побочных эффектов на мишени и за пределами опухоли. Следовательно, установление MM-специфического эффекта путем нацеливания на MM-ассоциированные, но не полностью MM-специфические целевые антигены — еще одна потенциально важная проблема CAR T-клеточной терапии при MM.Ниже мы сначала опишем преимущества и возможные недостатки нескольких альтернативных антигенов-мишеней для CAR-T-клеток в MM и сосредоточимся на том, как, кроме GPR5Cection g, также был разработан и протестирован APIM для CAR-T-клеток, и конкретные способы нацеливания с двойным CAR могут использовать их. альтернативные цели, предлагающие решения текущих проблем CAR T-клеточной терапии при ММ.

Мишени MM, отличные от BCMA

G-Protein Coupled Receptor 5D (GPRC5D) недавно был идентифицирован как еще одна потенциальная мишень MM, поскольку этот антиген экспрессируется на злокачественных клетках MM на высоких уровнях, независимо от распределения BCMA, и только на низких уровнях. уровни В-клеток, здоровых плазматических клеток и волосяных фолликулов (27, 28).Его функция, лиганд и его роль в развитии ММ еще не известны, но повышенная экспрессия на клетках ММ по сравнению со здоровыми плазматическими клетками указывает на роль в злокачественных новообразованиях. Нацеливание на эту в значительной степени MM-специфическую молекулу с биспецифическими антителами CD3 / GPRC5D и CAR Т-клетками в доклинических условиях уже дало многообещающие результаты, и текущие клинические исследования покажут ее пригодность в качестве мишени для MM (27, 29). За исключением BCMA и, возможно, GPRC5D, до сих пор не было обнаружено никаких других поверхностных антигенов, специфичных для плазматических клеток или MM-клеток.Хотя клетки MM экспрессируют множество других привлекательных антигенов-мишеней, из которых наиболее заметными являются CD138, CD38 и SLAMF7 / CS1. Все эти антигены высоко экспрессируются на клетках ММ. В то время как экспрессия SLAMF7 может немного снижаться при прогрессировании заболевания, экспрессия CD38, как правило, не затрагивается на разных стадиях заболевания, а CD138 проявляет еще более высокую экспрессию в клетках MM от пациентов с рефрактерным и прогрессирующим заболеванием (30–33). Однако все эти антигены также экспрессируются в других тканях.Высокая экспрессия CD138 в нормальных тканях (то есть в плоском эпителии, гепатоцитах, бокаловидных и столбчатых клетках желудочно-кишечного тракта) предполагает, что его единственное нацеливание может быть связано с побочными эффектами на мишень, а не на опухоль. Действительно, нацеливание на CD138 с помощью конъюгата антитело-лекарственное средство (BT062) индуцировало токсичность для кожи и слизистых оболочек, хотя такие побочные эффекты не наблюдались в небольшом пилотном исследовании с использованием Т-клеток CD138 CAR (34, 35). Экспрессия CD38 и SLAMF7 на незлокачественных гемопоэтических клетках, таких как Т-клетки, В-клетки, NK-клетки, макрофаги, дендритные клетки, ниже по сравнению с ММ-клетками (30, 36).CD38 также экспрессируется в других тканях, таких как клетки гладкой мускулатуры легких и клетки Пуркинье, но в большинстве случаев на промежуточных уровнях, таким образом создавая четкое окно дифференциальной экспрессии, которое можно использовать с помощью тщательно разработанных целевых методов лечения. Это было показано при нацеливании антител на CD38 с даратумумабом и изатиксумабом и на SLAMF7 с элотузумабом, которые хорошо переносились пациентами с впервые диагностированным и рецидивирующим / рефрактерным ММ (37–39). Ободренные этими результатами, эти молекулы также были нацелены на CAR Т-клетки.В доклинических исследованиях CAR T-клетки, созданные против SLAMF7 с использованием антитела элотузумаба в качестве связывающего домена, являются высокоэффективными, но они вызывают лизис фракций SLAMF7 + T-, B- и NK-клеток, что требует таких мер предосторожности, как включение суицидных генов в рамках текущих клинических исследований (40) ({«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT03958656», «term_id»: «NCT03958656»}} NCT03958656, {«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT03710421», «term_id»: «NCT03710421»}} NCT03710421).Точно так же CD38 CAR Т-клетки, полученные из высокоаффинных антител, эффективно уничтожают ММ-клетки, но также убивают доброкачественные CD38 + клетки. К счастью, можно генерировать CD38 CAR T-клетки с оптимизированной низкой аффинностью для эффективного устранения MM-клеток без какой-либо нежелательной цитотоксической активности против нормальных кроветворных клеток (41). Профиль безопасности и эффективность CD38 CAR Т-клеток (CAR2 анти-CD38 A2 CAR Т-клеток), полученных из явно аналогичного низкоаффинного антитела, в настоящее время тестируется в клинических испытаниях ({«тип»: «клиническое испытание» , «attrs»: {«text»: «NCT03464916», «term_id»: «NCT03464916»}} NCT03464916), промежуточных результатов пока нет.Помимо вышеупомянутых мишеней, для CAR Т-клеточной терапии оцениваются многие другие ММ-ассоциированные, но не полностью плазматические клетки или ММ-специфические мишени, такие как NKG2D, CD56, Lewis-x, CD44v6 (42–44), с в настоящее время не сообщается о результатах последних трех ({«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT04097301», «term_id»: «NCT04097301»}} NCT04097301, {«type»: » клиническое испытание «,» attrs «: {» текст «:» NCT03473496 «,» term_id «:» NCT03473496 «}} NCT03473496, {» тип «:» клиническое испытание «,» attrs «: {» текст «:» NCT01716364 «,» term_id «:» NCT01716364 «}} NCT01716364).CAR T-клетки NKG2D не получили клинического ответа или побочных эффектов, что может быть связано с тем, что CAR T-клетки были инфузированы без предварительного лимфо-истощения, или, как было обнаружено в доклинической работе, NK-клетки NKG2D CAR, а не T-клетки, были эффективны в удаление клеток MM ({«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT02203825», «term_id»: «NCT02203825»}} NCT02203825) (42, 45).

Таргетинг на Т-клетки с двумя картами для повышения эффективности

Как показано выше для Т-клеток CD38 CAR, клиническая трансляция стратегий, нацеленных на ММ-ассоциированные, но не полностью ММ-специфичные антигены, может потребовать различных корректировок для повышения их селективности в отношении ММ-клеток. .Эти альтернативные антигены-мишени также можно осторожно комбинировать с CAR T-клетками BCMA в стратегиях нацеливания на двойные CAR T-клетки для предотвращения ускользания MM и повышения общей эффективности CAR T-клеток () или даже для установления MM-специфичности путем применения раздельной передачи сигналов. подходы (). Наиболее интересными подходами, направленными на повышение эффективности CAR Т-клеток, являются комбинации CAR BCMA с CAR CD19, CD38, SLAMF7 и GPRC5D путем совместной инфузии двух пулов Т-клеток, экспрессирующих различные CAR () или путем инфузии единого пула Т-клеток, в котором каждая Т-клетка экспрессирует два различных CAR ().У всех этих стратегий есть свои преимущества и недостатки. Например, двойное нацеливание на разные CAR Т-клетки имеет то преимущество, что экспрессию CAR в обоих продуктах CAR Т-клеток можно контролировать отдельно. Более того, эта стратегия позволяет последовательное введение CAR Т-клеток, что может снизить риск тяжелого синдрома высвобождения цитокинов (CRS). С этой идеей в двух недавно опубликованных клинических испытаниях нацеливание на Т-клетки BCMA / CD19 с двойным CAR было достигнуто с использованием двух пулов Т-клеток, трансдуцированных одиночным CAR, у впервые диагностированных, а также у пациентов с рефрактерным рецидивом ({«тип»: «клинический- испытание «,» attrs «: {» текст «:» NCT03706547 «,» term_id «:» NCT03706547 «}} NCT03706547, {» тип «:» клиническое испытание «,» attrs «: {» текст «:» NCT03767725 » , «term_id»: «NCT03767725»}} NCT03767725).Пациенты получали последовательное введение CAR Т-клеток с целью снижения риска синдрома обострения цитокинового выброса (CRS). В обоих исследованиях у пациентов развился управляемый СВК, но без неврологической токсичности. Клинические ответы оцениваемых пациентов показали, что последовательная комбинация Т-клеток BCMA-CD19 CAR может улучшить клинический ответ. Тем не менее, поскольку в этих исследованиях не было контрольной группы (т.е. одной группы), будет очень важно оценить результаты недавно начатого исследования ({«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT03549442», «term_id»: «NCT03549442»}} NCT03549442), в котором рассматривается вопрос о том, является ли двойное нацеливание на BCMA / CD19 более эффективным и одинаково безопасным по сравнению с нацеливанием только на BCMA, помимо сравнения совместной и последовательной инфузии BCMA и CD19 CAR. Т-клетки.

Стратегии двойного CAR для повышения эффективности терапии ММ CAR Т-клетками. (A) Смесь двух пулов одиночных CAR Т-клеток, в которых каждый пул нацелен на другой антиген. Их можно вводить совместно или последовательно вливать пациенту. (B) Два CAR, нацеленные на разные антигены, экспрессируемые на одной Т-клетке, с использованием совместной трансдукции (B1) или бицистронного вектора (B2) . Связывания любого из CAR достаточно для активации Т-клетки. (C) Тандемные Т-клетки CAR, которые содержат два различных связывающих домена, связанных с одним рецептором.Связывания любого из доменов достаточно для активации Т-клетки. (D) CAR Т-клетки на основе лиганда, содержащие лиганд в качестве связывающего домена, который может распознавать более одного антигена. Связывания любого из антигенов достаточно для активации Т-клетки.

Стратегии двойного CAR для повышения специфичности терапии ММ CAR Т-клетками. (A) Расщепленные CAR Т-клетки, в которых активация посредством CD3ζ и костимуляция расщепляются на CAR первого поколения и химерный костимуляторный CAR (CCR), каждая из которых нацелена на разные опухолевые антигены.Связывание обоих CAR необходимо для полной активации Т-клеток. Расщепленные CAR Т-клетки могут быть созданы с использованием бицистронного вектора (A1) или двух отдельных векторов CAR и CCR (A2) . (B) Ингибирующий CAR (iCAR), связывающий аутоантиген, ингибирует активацию Т-клетками второго CAR, нацеленного на опухоль-ассоциированный антиген (TAA). В отсутствие аутоантигена он функционирует как обычная одиночная CAR Т-клетка. Комбинации CAR / iCAR также могут быть созданы с использованием бицистронного вектора (B1) или двух отдельных векторов CAR и iCAR (B2) .

Поскольку создание двух разных партий CAR Т-клеток может иметь важные негативные последствия для осуществимости и стоимости производства CAR Т-клеток, предпринимаются несколько других попыток с Т-клетками, которые одновременно трансдуцируются двумя разными, полностью функциональными секундами. ЦАП-поколения (). Технически двойная CAR-специфичность одной Т-клетки может быть получена либо путем одновременной трансдукции двух отдельных конструкций CAR в Т-клетки, либо с использованием одного бицистронного вектора, содержащего две отдельные конструкции CAR.Достижение высокой эффективности трансдукции двойных CAR с помощью бицистронного вектора может быть более сложной задачей из-за размера конструкции (46, 47), но это гарантирует, что оба CAR экспрессируются во всех трансдуцированных клетках и на одном уровне плотности. Это сложно в стратегии двойной трансдукции с использованием двух отдельных конструкций CAR. Двойная трансдукция обычно приводит к смеси клеток, экспрессирующих как одиночные, так и двойные трансдуцированные CAR Т-клетки, что требует дальнейшей сортировки для получения чистого продукта.Более того, при стратегии двойной трансдукции трудно экспрессировать оба CAR, экспрессируемые на одинаковых уровнях плотности.

Двойные CAR Т-клетки, нацеленные на комбинации BCMA / CD19, BCMA / SLAMF7, сконструированные с бицистронными векторами, в настоящее время проходят клинические испытания (48) ({«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {» text «:» NCT04156269 «,» term_id «:» NCT04156269 «}} NCT04156269, {» type «:» клиническое испытание «,» attrs «: {» text «:» NCT04162353 «,» term_id «:» NCT04162353 «} } NCT04162353). В нескольких других клинических испытаниях с неопределенными двойными подходами нацеливания тестируются комбинации, которые включают BCMA / CD38, BCMA / NY-ESO1 и CD38 / CD19 ({«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT03125577 «,» term_id «:» NCT03125577 «}} NCT03125577, {» type «:» клиническое испытание «,» attrs «: {» text «:» NCT03767751 «,» term_id «:» NCT03767751 «}} NCT03767751, {» type «:» клиническое испытание «,» attrs «: {» text «:» NCT03473496 «,» term_id «:» NCT03473496 «}} NCT03473496, {» type «:» клиническое испытание «,» attrs «: {» text «:» NCT03271632 «,» term_id «:» NCT03271632 «}} NCT03271632, {» type «:» клиническое испытание «,» attrs «: {» text «:» NCT03638206 «,» term_id «:» NCT03638206 «} } NCT03638206).Как представлено на ASh3019, двойные CAR Т-клетки BCMA / GPRC5D оцениваются доклинически, либо совместно инфузируются, совместно трансдуцируются, либо создаются с бицистронным вектором (49).

Альтернативно, специфичность двойной мишени может быть достигнута путем вставки биспецифических тандемных конструкций CAR (). Тандемные Т-клетки CAR содержат CAR одного поколения или выше с двумя отдельными scFv. Несколько тандемных CAR были изучены для лечения злокачественных новообразований B-клеток, нацеленных на комбинации CD19 / CD20 и CD19 / CD22 (50, 51).Пока что для ММ не было опубликовано результатов по тандемным CAR, нацеленным на два разных антигена. Однако в исследовании LCAR B38M используется CAR, который нацелен на два разных эпитопа BCMA, заявляя о повышении узнаваемости и эффективности (10, 20).

Создание CAR на основе лигандов, которые могут нацеливаться на два отдельных антигена, является еще одним способом достижения двойной целевой специфичности (). APRIL-CAR является типичным примером CAR на основе лиганда. В этой стратегии внеклеточный домен APRIL, природного лиганда BCMA, конструируется в CAR вместо использования scFv, полученного из антитела.Основное преимущество использования APRIL в качестве связывающего фрагмента состоит в том, что, помимо BCMA, он также распознает трансмембранный активатор, а также модулятор кальция и лиганд циклофилина (TACI). Следовательно, этот CAR может одновременно нацеливаться на два MM-ассоциированных антигена. После успешной доклинической оценки Т-клетки APRIL CAR тестировались в клиническом испытании, но испытание было недавно прекращено из-за неутешительных результатов (52) ({«тип»: «клиническое испытание», «attrs»: {«текст «:» NCT03287804 «,» term_id «:» NCT03287804 «}} NCT03287804).Следовательно, хотя идея привлекательна, CAR Т-клетки на основе APRIL потребуют дальнейшей оптимизации. Schmidts et al. (53) продемонстрировали такую ​​оптимизацию, изменив мономерную структуру APRIL на тримерную структуру, что повысило эффективность CAR Т-клеток на основе APRIL в доклинических исследованиях.

Двойные Car T-клетки для улучшения MM-специфичности

В качестве альтернативы, что, возможно, более привлекательно, двойное нацеливание на антиген CAR T-клетками может быть использовано для установления MM-специфичности CAR T-клеточной терапии путем применения расщепленного двойного CAR Т-клеточная стратегия.Эта концепция, впервые показанная Kloss et al. (54), основана на фундаментальной концепции, согласно которой Т-клеткам для полной активации требуются два разных сигнала. В технологии split-dual CAR сигналы первичной активации и костимуляции для Т-клеток разделяются на два отдельно экспрессируемых CAR, которые направлены против двух тщательно отобранных антигенов, которые индивидуально не опухолеспецифичны, а в комбинации отображаются. опухолеспецифическая экспрессия. Разделение первого и костимулирующего сигналов активации Т-клеток, таким образом, обеспечит опухолевую специфичность, поскольку двойные Т-клетки, трансдуцированные с помощью CAR, могут быть полностью активированы только в том случае, если оба CAR одновременно воздействуют на свои мишени на опухолевых клетках, но не в том случае, если они распознают только одну из них. антигены в нормальных тканях ().Важно было снизить сродство CAR, связанного с CD3ζ, чтобы уменьшить возможность активации только этим CAR. К настоящему времени четыре группы продемонстрировали возможность использования расщепленных сигнальных CAR Т-клеток в различных типах солидных опухолей и AML (55–58). В то время как основная цель расщепленных двойных CAR Т-клеток состоит в повышении специфичности, расщепленные двойные CAR могут также улучшить авидность CAR Т-клеток к опухолевой мишени. Поскольку экспрессия BCMA не экспрессируется на здоровых клетках, кроме плазматических клеток, может не потребоваться использование расщепленной передачи сигналов для повышения специфичности Т-клеток BCMA CAR.Однако это может быть полезным и открыть новые возможности использования антигенов MM, которые не ограничиваются плазматическими клетками и клетками миеломы, особенно антигенов, которые высоко экспрессируются на клетках MM, но ниже на здоровых клетках, таких как CD138, CD38 и SLAMF7.

Наконец, другая форма дизайна двойного CAR для улучшения специфичности использует ингибирующие CAR (). Этот подход был впервые описан Федоровым и соавт. (59). Обычный CAR второго поколения комбинируется с ингибирующим CAR (iCAR), содержащим scFv-связывающий домен, связанный с ингибирующим цитоплазматическим доменом, таким как PD-1.Комбинирование неспецифической мишени MM с iCAR, нацеленным на аутоантиген, может улучшить специфичность и, следовательно, безопасность терапии MM CAR. Как Т-клетки с расщепленным сигналом, так и двойные Т-клетки CAR / iCAR могут быть получены посредством совместной трансдукции двух отдельных векторов или использования бицистронного вектора с соответствующими преимуществами и недостатками, как обсуждалось ранее.

Заключение

Двойное или множественное нацеливание является многообещающим инструментом как для решения проблемы потери или подавления антигена-мишени, так и для обеспечения возможности использования ассоциированных с ММ, но не специфических, антигенов-мишеней.Существует несколько вариантов получения двойных CAR Т-клеток и получения двойного нацеливания CAR, большинство из которых исследуются в условиях MM. Важно отметить, что в настоящее время проведено очень мало исследований по сравнению различных подходов двойного таргетинга по эффективности и стойкости. В доклинической работе Hamieh et al. (22) обнаружили, что совместно инфузированные Т-клетки CD19 и CD22 CAR превосходят по предотвращению рецидивов из-за низкого присутствия антигена-мишени те же самые CAR Т-клетки, введенные последовательно. Фернандес Де Ларреа и др.(49) сравнили смесь 1: 1 CAR Т-клеток BCMA и GPCR5D с одной бицистронной конструкцией BCMA / GPCR5D и одной CAR с scFv BCMA и GPCR5D в тандеме и обнаружили, что бицистронная конструкция превосходит другие при тестировании в субстрате. -терапевтическая доза. Аналогичным образом Ruella et al. (60) обнаружили, что двойные Т-клетки CD19 / CD123 CAR, созданные с помощью бицистронного вектора, превосходят объединенные Т-клетки CD19 и CD123. Однако использование различных целевых антигенов и CAR может очень хорошо изменить этот результат, и необходимы дополнительные исследования, чтобы определить, какой подход лучше всего подходит в конкретной ситуации.

Как кратко обсуждалось ранее, помимо рецидива, связанного с подавлением регуляции, вероятно, существует другой механизм устойчивости при лечении Т-клетками MM CAR. Отсутствие персистенции CAR T-клеток, несмотря на присутствие антигена-мишени и подавление CAR T-клеток ингибирующими молекулами, такими как PD-L1, или иммуносупрессивными клетками, такими как миелоидные супрессорные клетки (MDSC), также могут играть роль. Стойкость может быть увеличена за счет использования оптимальных костимулирующих доменов и предотвращения тонической передачи сигналов (25, 61).Более того, фенотип Т-клеток, по-видимому, важен для устойчивости, и несколько исследований изучают, как это оптимизировать (26, 62). Стратегии расщепленной передачи сигналов могут открывать возможности использования менее специфичных антигенов-мишеней MM, но, требуя двух антигенов-мишеней, ускользание антигена может увеличиваться, поскольку потеря одного из антигенов уже достаточна для отмены активации CAR Т-клеток. Поэтому важно нацеливать антигены, которые участвуют в прогрессировании заболевания и экспрессируются на высоком уровне, поскольку это может снизить вероятность того, что клетки MM уменьшают или теряют экспрессию антигена, и использовать дифференциальную экспрессию целевых антигенов на здоровых и злокачественных тканях, оптимизируя CAR. близость.

Вклад авторов

JS и TM проанализировали литературу, участвовали в разработке рукописи и написали статью. Н.Д. существенно переработал рукопись на предмет важного интеллектуального содержания. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Конфликт интересов

TM получил исследовательскую поддержку от Janssen Pharmaceuticals, Genmab, Takeda, Onkimmune и Gadeta. ND получил исследовательскую поддержку от Janssen Pharmaceuticals, AMGEN, Celgene, Novartis и BMS и входит в состав консультативных советов компаний Janssen Pharmaceuticals, AMGEN, Celgene, BMS, Takeda, Roche, Novartis, Bayer и Servier.Оставшийся автор заявляет, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Ссылки

2. Д’Агостино М., Бертамини Л., Олива С., Боккадоро М., Гей Ф. Применение лечебного подхода при множественной миеломе: обзор новых терапевтических стратегий. Раки. (2019) 11: 2015. 10.3390 / Cancers11122015 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 3. Парк Дж. Х., Гейер МБ, Брентдженс Р. Дж..Терапевтические препараты CAR Т-лимфоцитами для лечения гематологических злокачественных новообразований, нацеленные на CD19: интерпретация клинических результатов на сегодняшний день. Кровь. (2016) 127: 3312–20. 10.1182 / blood-2016-02-629063 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 4. Брудно Ю.Н., Кочендерфер Ю.Н. Т-клеточная терапия химерного антигенного рецептора лимфомы. Нат Рев Клин Онкол. (2018) 15: 31–46. 10.1038 / nrclinonc.2017.128 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 5. Шустер С.Дж., Свобода Дж., Чонг Е.А., Наста С.Д., Мато А.Р., Анак О. и др. . Химерные антигенные рецепторные Т-клетки в рефрактерных В-клеточных лимфомах.N Engl J Med. (2017) 377: 2545–54. 10.1056 / NEJMoa1708566 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 6. Кочендерфер Дж. Н., Дадли М. Е., Кассим С. Г., Сомервилл Р. П., Карпентер Р. О., Стетлер-Стивенсон М. и др. . Рефрактерная к химиотерапии диффузная крупноклеточная В-клеточная лимфома и вялотекущие В-клеточные злокачественные новообразования можно эффективно лечить аутологичными Т-клетками, экспрессирующими рецептор химерного антигена к CD19. J Clin Oncol. (2015) 33: 540–9. 10.1200 / JCO.2014.56.2025 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 7.Квинтас-Кардама А. Т-клеточная терапия против BCMA CAR при множественной миеломе. N Engl J Med. (2019) 381: e6. 10.1056 / NEJMc1

0 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Raje N, Berdeja J, Lin Y, Siegel D, Jagannath S, Madduri D, et al. Терапия bb2121 анти-BCMA CAR Т-клетками при рецидивирующей или рефрактерной множественной миеломе. N Engl J Med. (2019) 380: 1726–37. 10.1056 / NEJMoa1817226 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 9. Сидавей П. Гематологический рак: анти-BCMA CAR Т-клетки перспективны при ММ. Нат Рев Клин Онкол.(2016) 13: 530 10.1038 / nrclinonc.2016.125 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Чжао У.Х., Лю Дж., Ван BY, Чен YX, Цао XM, Ян Y и др. Фаза 1, открытое исследование LCAR-B38M, Т-клеточной терапии химерного антигенного рецептора, направленной против антигена созревания В-клеток, у пациентов с рецидивирующей или рефрактерной множественной миеломой. J Hematol Oncol. (2018) 11: 141 10.1186 / s13045-018-0681-6 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Чо С.Ф., Андерсон К.С., Тай Ю.Т. Нацеленность на антиген созревания В-клеток (BCMA) при множественной миеломе: потенциальное использование иммунотерапии на основе BCMA.Фронт Иммунол. (2018) 9: 1821. 10.3389 / fimmu.2018.01821 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 13. Frigyesi I, Adolfsson J, Ali M, Christophersen MK, Johnsson E, Turesson I, et al. . Надежная изоляция злокачественных плазматических клеток при множественной миеломе. Кровь. (2014) 123: 1336–40. 10.1182 / blood-2013-09-529800 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Де Матос Симоэс Р., Ширасаки Р., Дауни-Копысцински С.Л., Мэтьюз Г., Иго Х., Шеффер М. и др. Систематическая характеристика генов, представляющих предпочтительную молекулярную уязвимость миеломных клеток по сравнению с другими новообразованиями — последствия для биологии и терапевтического воздействия миеломы.Кровь. (2019) 134: 4407 10.1182 / blood-2019-130901 [CrossRef] [Google Scholar] 16. Рафик С., Хакетт С.С., Брентдженс Р.Дж. Инженерные стратегии для преодоления текущих препятствий в терапии CAR Т-клетками. Нат Рев Клин Онкол. (2019) 17: 147–67. 10.1038 / s41571-019-0297-y [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 17. Брудно Дж. Н., Марич И., Хартман С. Д., Роуз Дж. Дж., Ван М., Лам Н. и др. . Т-клетки, генетически модифицированные для экспрессии рецептора химерного антигена антигена созревания В-клеток, вызывают ремиссию рецидивирующей множественной миеломы с плохим прогнозом.J Clin Oncol. (2018) 36: 2267–80. 10.1200 / JCO.2018.77.8084 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Маддури Д., Усмани С.З., Джаганнатх С., Сингх И., Зудаир Э, Йе Т.М. и др. Результаты CARTITUDE-1: исследование фазы 1b / 2 JNJ-4528, терапии CAR-T-клеток, направленной против антигена созревания B-клеток (BCMA), у пациентов с рецидивирующей и / или рефрактерной множественной миеломой (R / R MM) . Кровь. (2019) 134 (Приложение 1): 577 10.1182 / blood-2019-121731 [CrossRef] [Google Scholar] 19. Ван Бай, Чжао У.Х., Лю Дж., Чен Икс, Цао ХМ, Ян И и др.Долгосрочное наблюдение фазы 1, первого открытого исследования на людях LCAR-B38M, структурно дифференцированного химерного антигенного рецептора T (CAR-T) клеточной терапии, нацеленной на антиген созревания B-клеток (BCMA), в пациенты (пациенты) с рецидивирующей / рефрактерной множественной миеломой (RRMM). Кровь. (2019) 134 (Приложение 1): 579 10.1182 / blood-2019-124953 [CrossRef] [Google Scholar] 20. Xu J, Chen LJ, Yang SS, Sun Y, Wu W, Liu YF и др. . Исследовательское испытание биэпитопного антигена созревания В-клеток, нацеленного на CAR T, при рецидивирующей / рефрактерной множественной миеломе.Proc Natl Acad Sci USA. (2019) 116: 9543–51. 10.1073 / pnas.1819745116 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Тиммерс М., Роекс Дж., Ван И, Кампилло-Даво Д., Ван Тенделоо ВФИ, Чу Й и др. . Терапия Т-лимфоцитов, модифицированных химерным антигеном, при множественной миеломе: антиген созревания В-клеток. Фронт Иммунол. (2019) 10: 1613. 10.3389 / fimmu.2019.01613 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Хамие М., Добрин А., Кабриолу А., Ван дер Стеген SJC, Джавридис Т., Мансилла-Сото Дж. И др.. Трогоцитоз и кооперативное уничтожение CAR Т-клеток регулируют ускользание опухолевого антигена. Природа. (2019) 568: 112–6. 10.1038 / s41586-019-1054-1 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23. Коэн А.Д., Гарфалл А.Л., Штадтмауэр Е.А., Меленхорст Дж. Дж., Лейси С.Ф., Ланкастер Э. и др. . Антигенспецифические CAR Т-клетки созревания В-клеток клинически активны при множественной миеломе. J Clin Invest. (2019) 129: 2210–21. 10.1172 / JCI126397 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Green DJ, Pont M, Sather BD, Cowan AJ, Turtle CJ, Till BG и др.Т-клетки химерного антигенного рецептора, полностью нацеленные на Bcma человека, вводимые в определенной композиции, демонстрируют эффективность в низких дозах при множественной миеломе высокого риска на поздней стадии. Кровь. (2018) 132 (Приложение 1): 1011 10.1182 / blood-2018-99-117729 [CrossRef] [Google Scholar] 26. Маклеллан А.Д., Али Хоссейни Рад С.М. Персистенция Т-клеток химерного антигенного рецептора и образование клеток памяти. Immunol Cell Biol. (2019) 97: 664–74. 10.1111 / imcb.12254 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Кодама Т., Кочи Ю., Накаи В., Мидзуно Н., Баба Т., Хабу К. и др.. Биспецифические перенаправляющие Т-клетки антитела против GPRC5D / CD3 для лечения множественной миеломы. Mol Cancer Ther. (2019) 18: 1555–64. 10.1158 / 1535-7163.MCT-18-1216 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 28. Иноуэ С., Намбу Т., Шимомура Т. Член семейства RAIG, GPRC5D, связан с сильно ороговевшими структурами. J Invest Dermatol. (2004) 122: 565–73. 10.1046 / j.0022-202X.2004.12628.x [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 29. Смит Е.Л., Харрингтон К., Штер М., Масакаян Р., Джонс Дж., Лонг Т.Дж. и др. GPRC5D CAR Т-клеточная терапия оказывает противоопухолевое действие при множественной миеломе.Рак Discov. (2019) 9: 690 10.1158 / 2159-8290.CD-RW2019-051 [CrossRef] [Google Scholar] 30. Си Э.Д., Стейнле Р., Баласа Б., Шмания С., Дракшарапу А., Шум Б. П. и др. . CS1, потенциальное новое терапевтическое антитело-мишень для лечения множественной миеломы. Clin Cancer Res. (2008) 14: 2775–84. 10.1158 / 1078-0432.CCR-07-4246 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Кавано И., Фудзивара С., Вада Н., Изаки М., Юки Х., Окуно Ю. и др. . Клетки множественной миеломы, экспрессирующие низкие уровни CD138, имеют незрелый фенотип и пониженную чувствительность к леналидомиду.Int J Oncol. (2012) 41: 876–84. 10.3892 / ijo.2012.1545 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 32. Nijhof IS, Groen RW, Lokhorst HM, van Kessel B, Bloem AC, van Velzen J. Повышение экспрессии CD38 на клетках множественной миеломы полностью транс-ретиноевой кислотой улучшает эффективность даратумумаба. Лейкемия. (2015) 29: 2039–49. 10.1038 / leu.2015.123 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Лисенко К., Шонланд С., Хегенбарт У., Валленвайн К., Браун У., Май Э.К. и др. . Потенциальные терапевтические цели при нарушениях плазматических клеток: исследование проточной цитометрии.Цитометрия Clin Cytom. (2017) 92: 145–52. 10.1002 / cyto.b.21351 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34. Tian C, Yang H, Zhu L, Zhang Q, Cao Z, Zhang Y. Т-клеточная терапия с модифицированным химерным антигеном антигена CD138 для множественной миеломы с обширным экстрамедуллярным поражением. Ann Hematol. (2017) 96: 1407–10. 10.1007 / s00277-017-3029-3 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 35. Джаганнатх С., Чанан-Хан А., Хеффнер Л.Т., Авиган Д., Циммерман Т.М., Лониал С. и др. BT062, конъюгат антитело-лекарственное средство, направленный против CD138, проявляет клиническую активность у пациентов с рецидивирующей или рецидивирующей / рефрактерной множественной миеломой.Кровь. (2011) 118: 305 10.1182 / blood.V118.21.305.305 [CrossRef] [Google Scholar] 36. Krejcik J, Casneuf T, Nijhof IS, Verbist B, Bald J, Plesner T. Даратумумаб истощает иммунные регуляторные клетки CD38 +, способствует размножению T-клеток и искажает репертуар T-клеток при множественной миеломе. Кровь. (2016) 128: 384–94. 10.1182 / blood-2015-12-687749 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 37. de Weers M, Tai YT, van der Veer MS, Bakker JM, Vink T, Jacobs DC, et al. . Даратумумаб, новое терапевтическое моноклональное антитело человека к CD38, вызывает уничтожение множественной миеломы и других гематологических опухолей.J Immunol. (2011) 186: 1840–8. 10.4049 / jimmunol.1003032 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Декерт Дж., Ветцель М.К., Бартл Л.М., Скалецкая А., Гольдмахер В.С., Валле Ф. и др. . SAR650984, новое гуманизированное антитело, нацеленное на CD38, демонстрирует сильную противоопухолевую активность на моделях множественной миеломы и других гематологических злокачественных новообразований CD38 +. Clin Cancer Res. (2014) 20: 4574–83. 10.1158 / 1078-0432.CCR-14-0695 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Lonial S, Dimopoulos M, Palumbo A, White D, Grosicki S, Spicka I и др.Терапия элотузумабом при рецидивной или рефрактерной множественной миеломе. N Engl J Med. (2015) 373: 621–31. 10.1056 / NEJMoa1505654 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 40. Гогишвили Т., Данхоф С., Проммерсбергер С., Рыдзек Дж., Шредер М., Бреде С. и др. . Т-клетки SLAMF7-CAR устраняют миелому и обеспечивают селективное братоубийство нормальных лимфоцитов SLAMF7 + . Кровь. (2017) 130: 2838–47. 10.1182 / blood-2017-04-778423 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 41. Дрент Э., Темели М., Поэлс Р., де Йонг-Корлаар Р., Юань Х., де Брюйн Дж. И др.. Рациональная стратегия снижения воздействия CD38-химерных антигенных рецепторов на мишени вне опухоли путем оптимизации аффинности. Mol Ther. (2017) 25: 1946–58. 10.1016 / j.ymthe.2017.04.024 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 42. Baumeister SH, Murad J, Werner L, Daley H, Trebeden-Negre H, Gicobi JK и др. Испытание фазы I аутологичных CAR Т-клеток, нацеленных на лиганды NKG2D, у пациентов с AML / MDS и множественной миеломой. Cancer Immunol Res. (2019) 7: 100–12. 10.1158 / 2326-6066.CIR-18-0307 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 43.Казуччи М., Николис ди Робилант Б., Фальконе Л., Камиса Б., Норелли М., Дженовезе П. и др. . Т-клетки, нацеленные на CD44v6, оказывают сильное противоопухолевое действие против острого миелоидного лейкоза и множественной миеломы. Кровь. (2013) 122: 3461–72. 10.1182 / blood-2013-04-493361 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 44. Вествуд Дж. А., Смит М. Дж., Тенг М. В., Мёллер М., Трапани Дж. А., Скотт А. М. и др. . Адоптивный перенос Т-клеток, модифицированных геном гуманизированного химерного рецептора, подавляет рост опухолей, экспрессирующих Lewis-Y, у мышей. Proc Natl Acad Sci USA.(2005) 102: 19051–6. 10.1073 / pnas.0504312102 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 45. Лейвас А., Рио П., Матеос Р., Пасиелло М.Л., Гарсия-Ортис А., Фернандес Л. и др. Первичные естественные клетки-киллеры, трансдуцированные NKG2D-CAR, эффективно воздействуют на клетки множественной миеломы. Кровь. (2018) 132 (Приложение 1): 590 10.1182 / blood-2018-99-114522 [CrossRef] [Google Scholar] 46. Gelinas C, Temin HM. Недефектные векторы, происходящие от вируса некроза селезенки, определяют верхний предел размера для упаковки вирусов ретикулоэндотелиоза.Proc Natl Acad Sci USA. (1986) 83: 9211–5. 10.1073 / pnas.83.23.9211 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 47. Кумар М., Келлер Б., Макалу Н., Саттон RE. Систематическое определение предела упаковки лентивирусных векторов. Hum Gene Ther. (2001) 12: 1893–905. 10.1089 / 104303401753153947 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 48. Chen KH, Wada M, Pinz KG, Liu H, Shuai X, Chen X и др. . Стратегия составного химерного антигенного рецептора для нацеливания на множественную миелому. Лейкемия. (2018) 32: 402–12.10.1038 / leu.2017.302 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 49. Фернандес де Ларреа С., Стер М., Лопес А., Чен Й., Пурдон Т.Дж., Нг К.Й. и др. Оптимальная конструкция CAR с двойным нацеливанием, одновременно нацеленная на Bcma и GPRC5D, предотвращает рецидив множественной миеломы, вызванный ускользанием от Bcma. Кровь. (2019) 134 (Приложение 1): 136 10.1182 / blood-2019-126145 [CrossRef] [Google Scholar] 50. Шнайдер Д., Сюн Й., Ву Д., Нлле В., Шмитц С., Хасо В. и др. . Тандемный лентивирусный вектор CD19 / CD20 CAR управляет модуляцией антигена как на мишени, так и вне мишени в клеточных линиях лейкемии.J Immunother Cancer. (2017) 5:42. 10.1186 / s40425-017-0246-1 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 51. Hossain N, Sahaf B., Abramian M, Spiegel JY, Kong K, Kim S, et al. Опыт фазы I с биспецифическим CAR, нацеленным на CD19 и CD22 у взрослых с В-клеточными злокачественными новообразованиями. Кровь. (2018) 132 (Приложение 1): 490 10.1182 / blood-2018-99-110142 [CrossRef] [Google Scholar] 52. Ли Л., Дрейпер Б., Чаплин Н., Филип Б., Чин М., Галас-Филипович Д. и др. . Рецептор химерного антигена на основе APRIL для двойного нацеливания на BCMA и TACI при множественной миеломе.Кровь. (2018) 131: 746–58. 10.1182 / blood-2017-05-781351 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 53. Schmidts A, Ormhoj M, Choi BD, Taylor AO, Bouffard AA, Scarfo I, et al. . Рациональная конструкция тримерного CAR-связывающего домена на основе APRIL обеспечивает эффективное нацеливание на множественную миелому. Blood Adv. (2019) 3: 3248–60. 10.1182 / bloodadvances.201

03 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 54. Kloss CC, Condomines M, Cartellieri M, Bachmann M, Sadelain M. Комбинаторное распознавание антигена со сбалансированной передачей сигналов способствует селективной ликвидации опухоли с помощью сконструированных Т-клеток.Nat Biotechnol. (2013) 31: 71–5. 10.1038 / nbt.2459 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 55. Chen C, Li K, Jiang H, Song F, Gao H, Pan X и др. . Развитие Т-клеток, несущих два комплементарных химерных антигенных рецептора против глипикана-3 и асиалогликопротеинового рецептора 1, для лечения гепатоцеллюлярной карциномы. Cancer Immunol Immunother. (2017) 66: 475–89. 10.1007 / s00262-016-1949-8 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 56. Lanitis E, Poussin M, Klattenhoff AW, Song D, Sandaltzopoulos R, June CH, et al.. Т-клетки химерного антигенного рецептора с диссоциированными сигнальными доменами проявляют целенаправленную противоопухолевую активность со сниженным потенциалом токсичности in vivo . Cancer Immunol Res. (2013) 1: 43–53. 10.1158 / 2326-6066.CIR-13-0008 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 57. Уилки С., Ван Шалквик М.С., Хоббс С., Дэвис Д.М., ван дер Стеген С.Дж., Перейра А.С. и др. . Двойное нацеливание на ErbB2 и MUC1 при раке молочной железы с использованием рецепторов химерных антигенов, сконструированных для обеспечения дополнительной передачи сигналов.J Clin Immunol. (2012) 32: 1059–70. 10.1007 / s10875-012-9689-9 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 58. Хэ Икс, Фенг З., Ма Дж., Линг С., Цао И, Гурунг Б. и др. Би-специфические и расщепленные CAR Т-клетки, нацеленные на CD13 и TIM3, ликвидируют острый миелоидный лейкоз. Кровь. (2020) 135: 713–23. 10.1182 / blood.201

79 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 59. Федоров В.Д., Темели М., Саделайн М. Ингибирующие химерные антигенные рецепторы на основе PD-1 и CTLA-4 (iCAR) отклоняют нецелевые иммунотерапевтические ответы.Sci Transl Med. (2013) 5: 215ra172. 10.1126 / scitranslmed.3006597 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 60. Ruella M, Barrett DM, Kenderian SS, Shestova O, Hofmann TJ, Perazzelli J, et al. . Двойное нацеливание на CD19 и CD123 предотвращает рецидивы потери антигена после иммунотерапии, направленной на CD19. J Clin Invest. (2016) 126: 3814–26. 10.1172 / JCI87366 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 61. Salter AI, Ivey RG, Kennedy JJ, Voillet V, Rajan A, Alderman EJ, et al. . Фосфопротеомный анализ передачи сигналов химерного антигенного рецептора выявляет кинетические и количественные различия, которые влияют на функцию клеток.Sci Signal. (2018) 11: eaat6753. 10.1126 / scisignal.aat6753 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 62. Вэй Дж., Лонг Л., Чжэн В., Дунгана Ю., Лим С.А., Гай С. и др. . Нацеливание на REGNASE-1 программирует долгоживущие эффекторные Т-клетки для лечения рака. Природа. (2019) 576: 471–6. 10.1038 / s41586-019-1821-z [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Ni mimu Carp lori donk lati etikun: na, koju, ìdẹ, asiri

Рыболовы из Алакобере по ошибке gbagbo протерли Carp le waye kanna ilana bi sunm ibatan Carp.Нитуто, авọн игбехин эя джẹ гидигиди гбаджумо нитори си, нину охун мииран, рẹ туну ọна итка си. Ниторина, нибẹ ни о ва пọлупọ авọн мунадоко ọна ти ни миму йи эджа. Сибосибо, Карп ято си беспокойный охун кико сило, быстрый еси ати ки о тоби титоби. Biotilejepe o ni kan Iru Carp, ugbọn pẹlu kan egan Oti. Йи эя дииде нгбе таби одо ипо, таби ни авọн адагун лай Орико ни нкан ṣе пулу око. Соответственно, аван асири йẹ ки о ва ни ка развлекают продуктивную ипеджа Карп ипеджа, авọн офин ти иседжаде ати авọн лило ти цзя, иду илана, ати авн мииран хитросплетений ти авọн илана.

Awọn ti aipe ibi fun ipeja

Carp tun kan si sedentary ẹja, ti igba ma ko fẹ lati yi won ibi ti alãye. Eleyi ni o ni awọn mejeeji Aleebu ati awọn konsi. Лори авон окан ọwọ, о ле ка лори а igbakọọkan «iṣẹ» ни аван ибити, сугбон лори авон мииран — ни аван авари забава авен ти о eeṣe lairotẹlẹ Авари ти эджа сунбэ ти ва ни. Gbogbo ona lati idamo awọn ọtun ibi ni si idojukọ lori awọn уединенный ати эган агбегбе. Ni idi eyi, a aseyori ni mimu Carp lori donk lati etikun ko ko tunmọ si wipe awọn eja ti wa ni nọmbafoonu ninu aijinile omi, ki o si yi ilana ni o kan bi doko lori etikun.Niwon julọ seese nitori niwaju nibble ni simẹnti iho tabi aaye забавные коряги.

Paapa Carp ninu awọn odò nwa fun a idakẹjẹ ibi, ibi ti awọn ti isiyi ni ko bẹ lọwọ. Йи ле джẹ авọн иби изгибает лори авọн иканни, блокирует ати прикаменные авọн ọrọ. Паде авọн эджа ати лори авọн эти, эй ти о ва ни идапо пелу ракушки, абила игбин, би дарадара би ни ибити бэйс одо пулу ипон эве. Оно Карп дзё си оуро — о дзё гидигиди кан ти о дара акоко лати джеки авон рыболов, сугбон о дзё тọ лати ян авон йо цзя, о дара веселье овон акоко.Awọn julọ ọjo ni Carp ipeja ni Oṣù, nigbati o ti nọmbafoonu ni Reed egbegbe tabi ni pantiri kanna ewe. Irin-yio lori Arrowhead, lili, pondweed ati omi Гречиха. Pẹlu iyi si ijinle, o yẹ ki o wa ko kere ju 2,3 ​​м. Ti o ni, o j wipe ko ipeja nitosi etikun ni o le wa nikan ni ojuami ni eti to sokale ti pits. Sibẹsibẹ, Carp wa ni ri ni aijinile omi — o kan ni akoko kan ti owur tabi dusk.

Koju fun odo ipeja

O le so ti o ni awọn Ayebaye ipo fun ipeja. Awọn julọ обычно lo mora ọpá, ni awọn itọju ti eyi ti o yẹ ki o wa kà a odi ifosiwewe — веселье.Ниторина, би джина би о ти ṣи йẹ ки о ло авọн атокан. Река ти икеде йи цзя ни о ни кан ди ьято лати ибиле. Ni ibere, awọn ọpá ipari yatọ lori apapọ lati 3,5 лати 4 мес. Keji, nipa àdánù ti awọn koju ni o ni lati bawa pẹlu kan eru fifuye. Ани авọн апапọ джа ти йи эя ни они акуде ивн, ки о си фун у ихуваси, аабо ифосивеве ни лати ва ни патаки. Ti o ba ti wa lakoko iṣiro ni mimu ti o tobi Carp, awọn jia yẹ ki o wa setan fun a Fifuye ti 100 кг. Pese ọna lati šakoso awọn sisan. Lati yi opin, o fa ifojusi si ila ti o dara ju soju fun awọn плетеный окун pẹlu kan kere opin ju ti ti iru aba ti мононить.Dindinku ni ikolu ti awọn sisan yoo din ipalara ipa ti tooling, sugbon ni akoko kanna yoo ko ni ipa ni bibu agbara.

Nibẹ ni miran ẹya-ara ti jia, eyi ti o din awọn àdánù ti awọn кормушки для глаз. Ni awọn nla ti iru awọn afikun yẹ ki o wa Oorun si awọn iyipada, awọn àdánù ti eyi ti o jẹ ko kere ju 120 g ni gidigidi rudurudu ipo ti awọn odò le ee lo, ati fun api — o wa titi si isalẹ ti awọn waya усики. Ti o ba ti ni mimu lori donk pẹlu kan trough ko ni pese to ifamọ, o mu ki ori lati lọ si awọn lupu Circuit itanna.Awọn asa ti lilo paternoster, bi daradara bi dogba ati aibaramu losiwajulosehin.

Справляется с весельем ipeja ni a ikudu

Неопытные рыболовы lati Ye Carp niyanju o idakẹj adagun. Bẹr duro pẹlu awọn lilo ti flapping pá. Lẹsẹkẹsẹ o yẹ ki o wa woye wipe awọn tunu dada ti omi ko ṣe oniduro Ease ti awọn ilana vyvazhivaniya. Gbogbo ipeja na Carp lati leefofo koju awon ewu ti ijamba pẹlu labeomi idiwo ni awọn fọọmu ti кусты, коряги, овцы, lọ silẹ igi и т.д.. Ати ки о кан авон ипин ти карп ян весело wọn ibugbe.

Kosi, nipa a apeja ni igbese igbaradi nilo ọkan — lati gbe soke kan to lagbara ọpá ipari ti nipa 5 m jẹ tun pataki ninu view ti awọn ijọ be ti kikọ sii .. Fun apẹẹr, ni mimu carp Эйи ти авọн асопọ нило кан атокан йẹ ки о ка ониве-ọна лати хеджи лоди си сокесиле ни сисан авọн ипо. Ti o ni, ọpá gbọd tun bawa pẹlu awọn àdánù ti awọn de.

Ti o ba gbero lati ṣiṣẹ pẹlu awọn gun simẹnti, o yẹ ki fẹ awọn sẹẹli koju.Awn ipari ni yio je kanna bi awọn aṣẹ ti 4-5 mita, ugbọn awọn ilana ti mimu a ipeja opa yoo dẹrọ awọn iṣẹ-ṣiṣe ti awọn apeja. Ṣugbọn nibẹ ni ohun pataki ojuami ninu yan a agba — o yẹ ki o wa a free-Wheeling siseto ti o kere 3500, pese a edekoyede ṣẹ egungun. Лори ojula ти о дзё тун патаки лати ṣe ogruzku leefofo ti baramu, ki o wà a kókó ati ki o ko padanu niwaju ti gun-ibiti o. Лори ибере ти би о си й Карп ни идакẹджẹ ипо, о ле ткаси лати плагин ìdẹ. Awọn wọnyi si dede ti a še pataki fun kan to lagbara ati ki o tobi eja, eyi ti o iranlọwọ lati bawa pẹlu awọn niwaju awọn roba damper.

Оснастка Awọn iṣeto ni ti awọn isal

Fun awọn mimọ irú iru tooling beere atokan, мононить, вертлюг kio, би дарадара би флюркарбоновая га агбара мононить. Akọkọ igbese ti o ya monoleski ipari ti nipa 50 см, lẹhin eyi ti yi apa ti wa ni ti ṣe pọ sinu, половинки, ṣugbọn ki ọkan opin wà to gun ju awọn miiran nipa nipa 10 см. Siwaju si, awọn swivel ageing, eyi ti lẹhinna ti yio ubu, корыто. Lẹhin ti o, o le di a sorapo. Флюркарбоновая мононить ни ки о си я сину а 1 м пистолет.Nipa awọn ilana ti «lupu ni lupu ‘ti wa ni ti o wa titi si awọn gun opin ti awọn ìjánu ati ki o so si a jia tough. Ti o da lori bi Elo àdánù ti wa ni iṣiro ni mimu Carp lori donkun , o jẹ ṣee ṣe lati yato awọn sil ti awọn lupu.

O ti wa ni tun gbajumo ni lilo awọn iyatọ ti imolara-ins ti o ti wa ni lilo рыболовы. Fun apẹẹrẹ, kan ninu awọn alinisoro воплощения ти йи иру ни анпе ни а «mu» ати эи ти ìgbésẹ би а орисун оми. Лати адапо авọн ти a beere ajija корыто tabi ideri lati kan ike igo (ojo iwaju orisun omi mimọ), orisirisi ìkọ (от 1 до 4) ati ki o kan плетеные окун забавные лесочные поводки.Ipeja ila ti wa ni ti o wa titi si akojö atokan-orisun omi, eyi ti o ti gbe lori stopper ti awọn ilẹkẹ. Ki o si o gbọd wa ni ṣe ti hun ohun elo ti nyorisi, eyi ti yoo wa titi lori ayipo awọn orisun omi pẹlu kanna отступы. Ни мнение ти авн kọkọrọ лори авọн приманка ти ва ни ти. Ti o ba ti ni mimu Carp donk on tera yoo fun awọn reti esi, awọn ilana ṣie le ti wa ni dara si ni orisirisi ona. Fun apẹẹrẹ, активатор bi awọn ohun ti eja le ee lo, феромон, аропо, ти о дзё, дара, забавная пачка, ати ки о гбона оми айика.

Asayan ti ipeja ila fun Carp

Eyikeyi lodidi ipeja aaju ki o to lati se agbekale titun ona ti mimu eja unamiliar, esan kika ti o yẹ litireso ati ki o ri awọn iriri ti miiran araa. Ni awọn idi ti Carp akọkọ ohun ti o le wa gbọ — o jẹ ẹya alaragbayida agbara, eyi ti yoo nikan taming ti o tọ casing. Би авọн кан абаджаде, ọpọlọpọ авн ти ва ни гбийанью лати ṣe авн иринше ти авọн юл логан, нипọн ати авọн алагбара. Офин йи ни о дара, чтобы развлечься ипеджа ọпа таби алайпо, ṣugbọn awọn wun ti ila ni ko bẹ ko o.O ti gbà wipe gbẹkẹle ni awọn ofin ti dena ela ni Carp ipeja donk tera muse lilo мононить oriṣa ibere ti 0,25-0,3 мм ок. Сугбон, би аса фихан, лори a ailewu net ninu apere yi si ohunkohun, nitori julọ ninu awọn fifuye gba awọn mọnamọna olori. Awn oniwe-ipari jẹ 12 m yoo pese awọn atako ati labeomi brow, ati serifs ni snags.

Lori awọn miiran ọwọ, awọn iwulo ti nipọn ipeja ila bi daradara bi a ailewu net ti ko ba asonu ani diẹ ninu awọn apa R рыболовы. Сугбон йи аспект джẹ ọро кан ти ариянджиян.Nipọn ipeja ila, pẹlu gbogbo awọn agbara ti ife lati ṣẹda a ta asia ipa labẹ omi, ti yoo неблагоприятно ni ipa ni ihuwasi ti awọn грузила. Nitorina, ipeja donk pẹlu kan trough le wa ni muse pẹlu kan ipeja ila ti sisanra ti wa ni 0,2-0,25 мм.

Awọn ibeere fun awọn грузило

Ninu ọran ti yan a ti iṣẹ-ṣiṣe apa ti awọn ẹrọ n ni awọn kanna isoro ti pelu owo gbára laarin awọn fifuye agbara ti awọn akitiyan ti eja, би дарадара би awọn iji o ergonomics. Би ни иру пулу ипеджа ила, ọpọlọpọ ни ифо кан лати терамо авọн илана нипа а вуу грузило.Ọpá ti wa ni apẹr fun aarin-ibiti o òṣuwọn nipa 130 г Ni idi eyi, ko ba gbagbe nipa awọn agbara isiro ti o yori si pinnu wipe, fun apẹẹrẹ, awọn утяжеляет ti awọn mimọ до 400 г лоэ соо авен iru awọn eroja. Ати авọн ти они ко си даруко авọн даджу протрите авн афикун iṣẹ ṣiṣe yoo rii daju коряги ати авн мииран лабеоми идиво, весело эй ти игба лẹ кọ весело миму Карп, эй ти ìgbéransẹ би. Ṣugbọn, a gbọd koju awọn sisan, ju. Акосемосе яндзю исоро йи ни ко илосоке нину адано, сугбон нипа дарадара-ян пупо.Nigba ti lagbara sisan yẹ ki o fi kọ pia-sókè eroja ni ojurere ti Georgia-fireemu, alapin dada ti optimally dani isalẹ.

ohun ti apeja

Awọn aṣayan fun awọn ifilelẹ ti awọn ìdẹ — àdánù, ati eranko ati Ewebe Oti. Ni ibamu si statistiki, akọkọ ti a ti lo kere nigbagbogbo ju Ewebe ìdẹ. Eleyi jẹ nitori si ni otit wipe awọn kokoro pẹlu leeches, fun apẹẹr, ni afikun si Carp, ati Paiki ti wa ni tun ni ifojusi si awọn окунь. Ati nigbati aperanje sunm Carp ọtẹ lati bo. Ti o ba ti awọn ti o fẹ ṣubu lori yi aṣayan, o jẹ ti o dara ju lati lo nibiti awon ti kokoro ni orisun omi akoko.Sugbon akọkọ na ti aridaju wipe awọn ẹya ara gbodo je a ni ìrísí ati oka. Ni igba akọkọ ti aṣayan jẹ wuni lati lo lẹhin ti nipasẹ maceration ni iyo omi. Nibẹ ni o wa tẹlẹ miiran alaye, ti o ba ti o ba gbero lori mimu Карп на ока. Фифи сори справляется с awọn kilasika opo luffing sẹẹli tabi ọpá pese fun asomọ ti awọn orisirisi kà ki awọn ta ti awọn kio wà igboro. О ле ло бойя аколо ока, таби ти ара ро апа, ро нину оми лори кекере оору.

Ohun ti o yẹ jẹ awọn ìdẹ

A o tobi alaafia eja je akara oyinbo, akara, oka, Ewa, ati awọn miiran awọn ja.Сугбон локанси, о дзё патаки лати ṣэто авон илẹ дарадара. Оджо мело акосо нканкан би салат таби каша. O e pataki lati jẹri ni lokan pe awọn Carp ninu ooru ni ko bi bussy bi awọn orisun omi. Ниторина, awọn ihamọ loju ìdẹ ilana fere kò si. Ṣugbọn nibẹ ni miran isoro, bi ni irú pẹlu eranko ìdẹ. Eleyi jẹ awọn ewu ti awọn ìdẹ yoo fa ti kii-afojusun eja, pẹlu лещ, IDE, лещ ати саблезубый pẹlu t. Д.

Nitorina, o tọ lati tẹle awọn ofin ti eja cookery, gbigba aami kikọ sii ti wa ni Carp.Odò ipo yoo jẹ ti aipe ohunelo jẹ bi wọnyi: адалу 4 кг и 1 кг peletsa ge boilie lati ṣe аминокислот ni ’50 ibeere siwaju nipa bi lati yẹ Карп для навозной жижи абаджаде. Awn Apapo yẹ ki o wa ni lo arinrin amọ, eyi ti le wa j on-ojula ipeja ni odo. Awn adalu ti a pò ati ki o si pellets ti wa ni akoso. Wọn ки о си й ки о ва ни ибаму лори авọн кио.

Iṣeduro on ipeja imuposi

Lẹsẹkẹsẹ lẹhin awọn ojula asayan ati ki o ipo yẹ ki o lure ipeja agbegbe aago ki o si bẹr sise jia.о дзё ко патаки лати фи лори пистолет симонти. Водохранилища Paapa lori tobi ati adagun, awọn ofin ibamu si eyi ti gun-ibiti simẹnti pese ñlá kan eja. Sibẹsibẹ, ni igba akọkọ ti ojola le разочаровывать кан kekere eja — yi, ju, ti wa ni pese sil. Ати авọн ти о ко ба ле синми. Рыба, биотилло тоби, сугбон проворный, ати авọн аати ле дзё аиротẹло. Ниторина, Carp ipeja koju ni June, kan gbọd wa ni ti gbe jade, bibẹkọ ti o wa ni a ewu kan ma ko ni akoko fun gbogbo awọn ọpá. Awn ilana le jẹ boya fi opin si tabi akoko ti ga aṣayan iṣẹ-iṣe.Ti o ba ti igba pipẹ nibẹ ni ko si esi, ki o si boya awọn ìdẹ pare sinu awọn dojuijako — o jẹ pataki lati ayẹwo ti o ki o si ṣe gbigbe kan ti o ba wulo.

ипари

Pelu awọn isoro vyvazhivaniya, Carp le daradara jọwọ ani awọn alakobere apeja kan ti o dara saarin. Лати мура веселье авọн иṣẹлу ти ва ни ти а бере нипа джулọ ти авọн ибùгбе авọн ẹрọ ати авọн йа rọ. Ати паапа ни миму лори донк пулу кан корыто ко гба дзю Эло вахала, ти о ба ти о ба ло га-дидара охун эло. Fun apẹẹrẹ, abuda ofin ni awọn lilo ti a alagbara ri opa ati agba pẹlu kan agbara Reserve.Pẹlu iyi si awọn ipeja ila, ki o si splurge lori iyasọt nipọn plexus ki asopọ ko si ori. O ti wa ni to monoleski alabọde iwọn. О ти ва ни тун ту лати се ати пу авун грузило, весело протирать си иваджу ни ян нефрит аван фому, ко àdánù.

IQ | joe-ide-books

Ист-Лонг-Бич. Полиция Лос-Анджелеса едва успевает за высоким уровнем преступности в этом районе.
Убийства остаются нераскрытыми, потерянные дети не возвращаются. Но кто-то из соседей взял на себя ответственность помочь раскрыть дела, которые полиция не может или не хочет трогать.

Исайя Квинтаб, бросивший школу, отличается скромным характером, за которым скрывается свирепый интеллект.
Большинство людей называют его IQ. Ходят слухи: если у вас есть проблема, Исайя позаботится об этом,
его ставки регулируются с учетом вашего дохода или его отсутствия.
Из-за его нетрадиционной бизнес-модели у Исайи становится все меньше денег, что вынуждает его взяться за дело рэп-магната, чья жизнь находится в опасности. В список подозреваемых входят социально некомпетентный стрелок, который никогда не промахивается, бригада прихлебателей, скрывающих по крайней мере одного человека с опасными намерениями, и атакующая собака размером с лошадь.IQ считает, что его расследование включает в себя гораздо больше, чем он ожидал.
Никто не ожидает, что ребенок из Ист-Лонг-Бич будет обладать тем, что есть у Исайи — блестящим интеллектом, невероятным чувством восприятия и некоторыми серьезными навыками за рулем.
Все это дает одно главное преимущество: когда вы пришли из ничего, никто не увидит вас

ГЛАВА ПЕРВАЯ

Нелицензионный и подпольный

июль 2013

Детская кроватка Исайи была похожа на любой другой дом в квартале, за исключением того, что лужайка была ровной, краска была свежей, а вход был немного необычным.Защитный экран был сделан из той же сверхпрочной сетки, которую использовали для защиты от взломщиков и грабителей банков в полицейском участке Лонг-Бич. Входная дверь была покрыта тонкой фанерой из орехового дерева, но под ней находился стальной сердечник двадцатого калибра, установленный в раме из холодной стали с защищенным от взлома, ударопрочным, защищенным от высверливания двойным цилиндром Medeco High Security Maxum Deadbolt. Вам понадобятся серьезные электроинструменты, чтобы пройти через все это, и даже если вы это сделаете, никто не знал, чем вы будете заниматься. Ходили слухи, что это место заминировано.Вишневый восьмилетний Audi S4 был припаркован на подъездной дорожке. Это была небольшая простенькая машина темно-серого цвета с большим двигателем V8 и спортивной подвеской. Соседские ребятишки всегда кричали Исайю, чтобы тот надел кнут.

Исайя был в гостиной, читал электронные письма со своего MacBook и пил второй кофе эспрессо, когда услышал, как сработала автомобильная сигнализация. Он схватил складную дубинку с журнального столика, подошел к входной двери и открыл ее. Деронда прислонила свой бадонк мирового класса к капоту, задушив фару и часть решетки.Она была не совсем Большая девочка, но чертовски близко в своих шортах для мальчиков и розовом топе без рукавов на два размера меньше. Она делала вид, что дулась, вздыхала и снова вздыхала, хмурясь, глядя на блестящие предметы на своих ледяных ногтях. Исайя выключил будильник, прикрыв рукой глаза от полуденного света.

«Нет, я не забыл ваш номер, — сказал он, — и я не собирался вам звонить».

«Когда-нибудь?» — сказал Деронда.

«Вы ищете папочку и знаете, что это не я.«

«Вы не знаете, что я ищу, и даже если бы вы это сделали, это были бы не вы». За исключением того, что она искала кого-нибудь, кто мог бы оплатить несколько счетов, и Исайя вполне справился бы. Да, ладно, он действительно заставлял ее беспокоиться, он заставлял всех беспокоиться, проверяя вас, как будто знал, что вы выходите, и хотел знать, почему. Он выглядел нормально, не некрасиво, но в клубе или на вечеринке его почти не заметили. Шесть футов высотой, тонкий рельс, без цепи, без шипов в ушах, часы цвета алюминиевой кастрюли, и, если он был накрашен чернилами, она нигде не могла видеть.В последний раз, когда она встречалась с ним, он был одет в то же, что и сейчас: голубая рубашка с коротким рукавом, джинсы и тимберлендс. Ей нравились его глаза. Они были миндалевидной формы и с длинными, как у девушки, ресницами. «Ты не собираешься меня пригласить?» она сказала. «Я прошел сюда весь путь от маминого дома».

«Хватит врать, — сказал он. «Откуда бы вы ни пришли, вы не ходили».

«Откуда ты знаешь?»

«Твоя мама живет на другой стороне Магнолии. Ты хочешь сказать, что прошла семь миль в жаркую погоду в шлепанцах со всеми этими бурситами, растущими у тебя на ногах? Тиша подбросила тебя.«

«Ты думаешь, что знаешь так много. Меня мог высадить кто-нибудь».

«Твоя мама на работе, Нона на работе, Ира до сих пор носит гипс на ноге, а ДеШон потерял лицензию из-за этого DUI. Я видел его машину на штрафстоянке, белый Nissan с врезанной передней частью. Там никого не осталось. в твоем мире, кроме Тиши «.

«То, что Ира наложила гипс на ногу, не означает, что он не может водить машину».

Исайя прислонился к дверному проему. «Я думал, ты сказал, что гуляешь.«

«Я шла пешком, — сказала Деронда, — просто, знаете, часть пути, а потом подошел кто-то еще, и я…» Деронда соскользнула с капюшона и топнула ногой. «Черт, Исайя!» она сказала. «Почему ты всегда должен трахаться с людьми? Я пришел сюда, чтобы быть общительным, а? Какая чертова разница, как я сюда попал?»

Это не имело никакого значения, но он не мог не видеть то, что видел. Вещи разные, или что-то не то, или что-то не на своем месте, или что-то на своем месте, когда они не должны совпадать или не синхронизироваться со словами, которые пришли с ними.

«Ну?» — сказал Деронда. «Ты собираешься заставить меня выделиться здесь и получить тепловой удар или пригласить меня и налить мне коктейль? Никогда не знаешь, может случиться что-то хорошее».

Деронда посмотрела на свою лодыжку, повернув ее набок, как будто к ней что-то прилипло, вероятно, гадая, где были глаза Исайи. На ее бедре из темного шоколада, сияющем в лучах калифорнийского солнца, или на ее грудях из темного шоколада, которые изо всех сил пытаются сбежать через топик. Исайя отвернулся, чувствуя себя неловко, решая для них обоих, что будет дальше.Она была не в его вкусе, не то чтобы она была у него. Большую часть его личной жизни занимал секс из любопытства. Девушка, заинтригованная сдержанным братом, который был таким умным человеком, сказала, что он страшный. Давно этого не происходило. Он открыл экран.

«Ну, давай, — сказал он.

Исайя сидел в своем кресле и перечитывал электронные письма. Он надеялся, что что-то упустил. Ему нужен был кейс до жалованья, но здесь ничего не могло быть и близко.

Hola Senor Quintabe

Я друг Бенито.Он сказал мне, что тебе доверяют. Человек с моей работы шантажирует меня. Он сказал, что если я не дам ему денег, он скажет INS, что у меня нет грин-карты. Мой сын не может оставаться в школе. Можешь чем-нибудь мне помочь?

Уважаемый г-н Кинтабе.

Поздно ночью, когда я сплю в своей постели, входит мужчина и гладит мои личные зоны. Я знаю это точно, потому что утром моя ночная рубашка вся скомкана, и у меня там внизу возникает странное чувство. Пожалуйста, никому не говорите, потому что раньше меня высмеивали из-за моих подозрений.Можете ли вы прийти в воскресенье после церкви?

У Исайи не было веб-сайта, страницы в Facebook или учетной записи Twitter, но люди все равно находили его. Его приоритетом были местные дела, в которые полиция не могла или не хотела вмешиваться. У него было больше работы, чем он мог выполнить, но многие из его клиентов платили за его услуги пирогом из сладкого картофеля, уборкой его двора или одной новенькой радиальной шиной, если они вообще платили ему. Клиент, который мог платить суточные, давал ему достаточно дохода, чтобы содержать себя, и помогал оплачивать расходы Флако.

— Черт, — сказал Деронда, глядя в холодильник на воду Фиджи и клюквенный сок. «Тебе нечего пить?»

«Вот что там», — сказал Исайя из гостиной.

Перекусить тоже было нечего. Деронда могла бы что-нибудь придумать, если бы она знала рецепт простого йогурта, немного слив, мешка безмолвной смеси без M&M, не могу поверить, что это не масло! что бы там ни было, черт возьми.На прилавке стояла сложная машина. Нержавеющая сталь, большая, как большая микроволновка, с ручками и кнопками, и двойной кран над грилем, как автомат для газировки. На решетке стояли крохотная кофейная чашка и металлический кувшинчик. «Это твоя кофеварка?» она сказала.

«Эспрессо».

«Тебе нужна чашка побольше».

Исайя продолжал читать электронные письма и старался не думать о спелой и сочной Деронде, как об одной из этих слив. Неохотно он держал свои дизели застегнутыми.Решение непростое. Если бы он занимался с ней сексом, он пришел бы домой однажды ночью и обнаружил, что ее трехлетний сын рвет это место, пока она смотрела «Идола» и ела последние несколько кусочков Алехандро, поджаренных до хрустящей золотисто-коричневой корочки. Когда он сказал ей не снимать одежду, она не столько расстроилась, сколько удивилась.

«Вы не знаете, что вам не хватает, — сказал Деронда, — я занимаюсь каким-то сумасшедшим дерьмом».

Уважаемый г-н Кинтабе.

Моя дочь не вернулась домой на две недели.Я думаю, она ушла с человеком по имени Олен Уотерс, который для нее слишком стар. Ее нужно забрать у него, пока не стало слишком поздно. Не могли бы вы получить ее просьбу? Я могу заплатить немного.

Уважаемый г-н Кинтабэ

Два месяца назад моего прекрасного сына Джерома застрелили в собственной постели. Полиция заявила, что у них недостаточно доказательств для ареста, хотя все знают, что его жена Клаудия спустила курок. Я хочу нанять вас, мистер Квинтаб. Я хочу, чтобы ты привлек эту суку к ответственности.

В гостиной было прохладно и темно, мягкие полосы солнечного света и тени пробивались сквозь ограждения, место было настолько чистым, что в воздухе не было даже пылинок. Исайя не поднял глаз, когда Деронда босиком вышла из открытой кухни по полированному цементному полу. Все вышло не так, как он ожидал, но ему понравилось. Аморфные формы серого и зеленого, как спутниковая карта тропического леса. Деронда плюхнулась на диван напротив него и поставила ноги на журнальный столик.На стекле были разбросаны ключи от машины, мобильный телефон, кепка Гарварда и складная дубинка.

Деронда заметил черный ящик под столом. «Что это за штука?» сказала она, как будто она подозревала ловушку.

«Сабвуфер и слезай с моего журнального столика».

«Кто учился в Гарварде?»

«Никто».

«Могу я посмотреть телевизор?»

«Ты телевизор видишь?»

«У вас нет PlayStation?»

«Нет, у меня нет PlayStation.«

«Тебе нужна еще мебель».

Помимо бордового кожаного дивана и кресла, здесь были журнальный столик из хрома и стекла, плетеная оттоманка из лакированной древесины, столик из вишневого дерева и старинная лампа для чтения с длинной шеей. Вот и все, если не считать книжный шкаф от пола до потолка, занимавший всю стену. Там была огромная коллекция пластинок и компакт-дисков, аккуратно выстроенных, как штрих-коды, и тщательно продуманная стереосистема; Саксофон Колтрейна рев из динамиков, сердитый и хриплый.

«Могу я поставить еще одну пластинку?» — сказала Деронда, морщась, как будто она слушала вывоз мусора.

«Нет.»

Исайя опустил голову и прочитал еще одно электронное письмо. Деронда собиралась у него кое-что спросить. Он почувствовал это, как только впустил ее, глядя на него, как будто папочка — не все, что ей нужно. Передача секса лишила ее раскрытия, и теперь он мог слышать, как ее щеки скрипят на диване, когда она извивается, пытаясь выбрать момент. Может быть, если он будет игнорировать ее достаточно долго, она сдастся.

«Могу я вас кое о чем спросить?» она сказала.

«Нет.»

«Не могли бы вы, знаете, подключить меня?»

«Подцепить тебя с кем?»

«Блазе. Вы все с ним дружны и все такое». Она подождала мгновение, прежде чем сказать: «IQ».

В журнале The Scene появилась статья под названием:


IQ
ISAIAH QUINTABE НЕ ИМЕЕТ ЛИЦЕНЗИИ.

В статье рассказывается о ряде случаев, связанных с соседством, но тот, который попал в таблоиды, был самым простым для решения.В нем участвовал R&B певец Блазе. Во время вечеринки кто-то украл его камеру, на которой было записано видео, как он, склонившись над гладильной доской, ударил его сзади своим живым клавишником. Если бы запись вышла в свет, было бы больше, чем скандал. Блазе позиционировал себя как гетеросексуальный секс-символ. На обложке его последнего альбома, Can I Witness to Your Thickness, Блазе в стрингах и воротнике священника был ведущим хором, состоящим из трех женщин в сумасшедших светлых париках и коротких хоровых халатах, их спины выпирали, как младенцы.Блазе получил записку, в которой говорилось: Мои требования скоро последуют. Подчиняйтесь им, иначе ваши проступки будут раскрыты, и ваша карьера закончится.

«Язык», — сказал Исайя. «Ваши проступки будут открыты. Это библейское учение. Был ли кто-нибудь из ваших гостей религиозным?»

«Боже, нет», — сказал Блазе. Он глубоко вздохнул. «Но моя мама».

Мать Блазе была баптисткой-фундаменталисткой из небольшого городка в Джорджии. Когда Исайя столкнулся с ней, она сказала ему, что собирается использовать камеру Блазе, чтобы снять розарий на видео, и получила сюрприз на всю свою жизнь.Отдохнув и попив чая из корня валерианы, она решила шантажировать своего сына, заставив его отказаться от своей греховной и беззаконной жизни.

«Я тот, кто я есть, мама», — сказал Блазе. «Но если я не могу принять себя, у тебя нет причин».

Блазе был благодарен Исайе за то, что тот довел его до этого момента, но Исайя не знал, что он сделал, кроме как прочитал записку. Блазе появился на шоу Шонды Симмонс. Продажи его пластинок пострадали, но люди, которые их купили, также купили секс-ленту, доступную в Интернете, за 39 долларов.95, половина прибыли идет в церковь его матери.

«Мне нужно, чтобы Блазе помог мне в карьере», — сказал Деронда. «Он может быть геем, но он знаменитость, и все, что мне нужно, — это поднять ногу. Я имею в виду, что как только я перейду на этот уровень вышеупомянутого, и абоненты смогут лично проверить мой стиль? Я ухожу. к большому времени «.

Исайя чувствовал, как Деронда смотрит на него, ожидая, что он скажет, что это только вопрос времени или не сдаваться, или еще какую-то чепуху, но он не отрывал глаз от MacBook.Деронда надулся, на этот раз не притворяясь. «Я должна была уехать отсюда давным-давно, в таком звездном качестве, как я», — сказала она. «Я многообещающий, вы знаете, о чем я говорю? Я родился, чтобы быть знаменитостью. Я должен быть в центре внимания».

«Прожектор вокруг — для чего?» — сказал Исайя.

«Что ты имеешь в виду для чего? Жопа этой девушки Кардашьян могла уместиться в мою добычу, а ты говоришь для чего. Ты знаешь, что она заработала тридцать миллионов в прошлом году?»

Исайя знал других девушек, которые так думали.Почему-то верить в большую добычу было все равно, что владеть недвижимостью или иметь высшее образование, что-то, что можно было бы написать в заявлении о приеме на работу.

Алехандро, подпрыгивая, выскакивал из холла, издавая слабые звуки и покрасив Деронду красными глазками. Встревоженная Деронда подняла ноги с пола. «Ты позволил этой штуке просто гулять здесь?» она сказала.

«Оставь его в покое, он оставит тебя в покое», — сказал Исайя.

Исайя получил Алехандро и рецепт arroz con pollo в качестве оплаты от госпожи.Маркес. Исайе не нравилось убирать куриное дерьмо, но на полу не осталось пятен, и он чувствовал себя виноватым из-за того, что оставлял птицу в гараже на весь день. На днях он забыл закрыть дверь спальни, а Алехандро присел на стойку туалета и натер всю свою одежду.

«Давай, Исайя, помоги мне», — сказал Деронда. «Все, что мне нужно, это поднять ногу».

«Поднять ногу — это не то, что я делаю».

«Ты ошибаешься, Исайя».

«Я ошибаюсь каждый день», — сказал Исайя. Он закрыл свой ноутбук, схватил ключи от машины и складную дубинку, надел кепку Гарварда и встал.

«Ты меня куда-то везешь?» — сказал Деронда.

«Угу. Я отвезу тебя домой».

Бойд припарковал свой грузовик на том же месте, что и вчера. Он действительно нервничал, но чувствовал себя готовым. Все, что ему было нужно, было в сумке для боулинга цвета ящерицы на сиденье рядом с ним. Изолента, резиновые перчатки и нож для обвалки, достаточно острый, чтобы срезать прозрачные ломтики с мягкого помидора. Также в сумке большая синяя губка и бутылка с водой, наполненная самодельным хлороформом.

Бойд работал в F&S Marine, дистрибьюторе морских товаров китайского производства. Здание из цементных блоков находилось в унылой промышленной зоне рядом со складом для баллонов с пропаном и безымянным складом с колючей проволокой, намотанной наверху забора. Река Лос-Анджелес протекала мимо, широкий зеленый водораздел пересекал Ист-Лонг-Бич и впадал в гавань Лонг-Бич.

Ник Бангковски, менеджер Бойда в F&S, имел колючие волосы и носил гавайские рубашки, плотно облегающие его увеличивающееся тело.Пять лет назад Ник был выбран во втором раунде «Сан-Диего Чарджерс». У него был отличный тренировочный лагерь, и он стремился к стартовому полузащитнику, но за неделю до первого предсезонного матча он выбил крестообразную связку, выйдя из командного автобуса.

«Я был там», — говорил Ник после своей первой упаковки из шести кубиков. «Я был там, черт возьми. У меня был свой шкафчик. У меня была футболка с моим именем. Я был в гребаной команде. Я был в гребаной команде».

Ник поручил Бойду всю работу.Отсоединение грязных туалетов, смазка цепей вилочного погрузчика, сбор пивных банок и использованных презервативов на парковке, инвентаризация тысяч выключателей блокировки, винтов с шестигранной головкой, поршневых пальцев и подшипников коленчатого вала. Бойд скулил, но не рассердился, даже когда Ник выгнал его из команды по боулингу. «Я должен порезать тебя, Бойд, — сказал Ник. «Рон вернулся из отпуска, и у него сколько в среднем, семьдесят пять? Хорошей ночью вы едва набьете сотню».

«А что насчет Максин?» — сказал Бойд.«Она играет хуже, чем я».

«Ну, да, по счету, но у нее есть сиськи. Она хороша для морального духа».

«Но я тоже хочу поиграть».

Ник похлопал Бойда по плечу, чего он никогда раньше не делал. «Я знаю, что ты хочешь, но впереди турнир, и ты не хочешь, чтобы мы проиграли, не так ли? Как насчет этого, Бойд? Возьми один для команды? Все будут любить тебя за это, что ты скажешь?»

В ночь перед турниром лиги Ник остался в офисе и съел несколько Budweisers перед тем, как отправиться в боулинг.Он был на стоянке, садясь в свою «Алтиму», когда Бойд на цыпочках подкрался к нему сзади, как мультяшный кот, и ударил его шестифунтовым якорем, завернутым в мешковину.

«Как насчет этого, Ник, возьми одного в команду?» — сказал Бойд, снова и снова набрасываясь на него.

Все в F&S думали, что это ошибочная личность или рассерженный муж. Ник, как известно, возился с домохозяйками в боулинге. Никто не подозревал Бойда. Он был странным и слегка отсталым, но никому не причинил вреда.Максин поехала навестить Ника в больницу. Она сказала, что он был похож на мешок сырого гамбургера и не помнил, кто она такая. Бойд подписал карточку выздоровления.

Раздался звонок. Бойд чуть не выпрыгнул из своей кожи, вытянув шею в поисках девушки. Где ты, Кармела? Ты где? Тебе лучше быть здесь, тебе лучше быть здесь. Давай, Кармела, БУДЬ ЗДЕСЬ.

Кармела была с группой своих друзей. На ней была короткая джинсовая юбка и белый топ, ее волосы были заплетены в длинную косу.Бойд почувствовал облегчение, опасаясь, что она могла это изменить. Она не торопилась, отправляя сообщение, смеясь, когда она читала текст, смеясь, когда она показывала его своим друзьям, и смеясь, когда она отправляла другое сообщение.

«Поторопитесь, поторопитесь!» — крикнул Бойд. «Что ты делаешь? Иди уже домой. Иисус Христос, ИДИ ДОМОЙ». Кармела наконец вырвалась из группы, помахала рукой на прощание и пошла к улице. «Хорошо, — сказал Бойд, — вот и все».

Исайя жил в Херстоне, небольшом районе на западной окраине Ист-Лонг-Бич, в двух минутах от реки Лос-Анджелес и в двух с половиной минутах от автострады 710.Он поехал в Анахайм, проезжая через место, о котором Снуп читал в «Хронике», его рифмы были самой заметной особенностью этого района. Квартал за кварталом торговые центры, магазины спиртных напитков, автомастерские, салоны красоты, дисконтные стоматологи и пустынные участки.

«Честно говоря, Исайя, — сказал Деронда. «Мне нужно изменить свое социальное положение. Мне нужно изменить мою культурную среду. Мне нужно изменить свой адрес».

Деронде было восемнадцать, когда она была коронована как «Мисс Большой мясной бургер» в ресторане BMB ​​в Калвер-Сити.Там был тележурналист пятого канала, а Деронда получил семь секунд экранного времени в утреннем шоу. Ее имя и фотография появились в телеграмме Long Beach Press-Telegram, и люди приходили посмотреть на пластиковую диадему и красно-золотой пояс Big Meaty Burger.

Она давала интервью на KHOP. Ди-джей спросил ее, делала ли она что-нибудь особенное, чтобы сохранить свою задницу свежей, и была ли она от природы толстой, или ей приходилось работать над этим и когда в последний раз она добавляла глазурь на торт. Изюминкой всего мероприятия стала настоящая фотосессия, и ее фотография была размещена в рекламе BMB.В рекламе был изображен гигантский трехэтажный бургер с капающим соком. Деронда смотрела через ее плечо, ее улыбка была широкой и манящей, ее щеки блестели, как полированное красное дерево, и были рассечены посередине розовым бикини DayGlo. В подписи сказано:

БОЛЬШОЙ МЯСНОЙ БУРГЕР

Сочные

Лос-Анджелеса

Вы знаете, что хотите

В то время Деронда думала, что это ее стартовая площадка. Кто-то, должно быть, заметил ее и увидел ее харизму и потенциал, но никто не позвонил, больше не было интервью или газетных статей, и через несколько месяцев BMB поменяли девушку в своей рекламе.Деронда не терял надежды. Что-то должно было случиться, как могло быть иначе? Знаменитость была ее мечтой, ее судьбой, и почему-то это позволяло, даже разумно, делать именно то, что она делала. Делать прически и ногти, гулять с Ноной и остальными, смотреть Джерси-Шор, Домохозяйки Атланты и Плохие девчонки, Идти в ногу с Кардашьян, Домохозяйки округа Ориндж и Девичник. Она сводила концы с концами, раздеваясь у Канди Кейн, на которой были только пояс и тиара.Отец Деронды, двадцать лет проработавший в Metro Transit, уговаривал ее найти новое направление и перестать растрачивать свою жизнь напрасно, но Деронда только стал упрямее и полон решимости дождаться, пока эта раскаленная добела молния разорвется с неба. и взорвать ее по-крупному.

«Разве ты не хочешь выбраться из капюшона?» — сказал Деронда.

«Я не знаю», — сказал Исайя. «Может быть.»

«Может быть? Черт, это безумие. То есть, если бы у меня был ваш профиль, я бы уже стал брендом.«

Исайя свернул с Анахайма на Кимбалл.

«Это не путь к моему дому», — сказал Деронда.

«Мне нужно остановиться у Бомонта», — сказал Исайя. У Бомонта был магазинчик на углу, называвшийся с шести до десяти тридцати. В нем продавалось все, от холодного пива и буррито из микроволновки до пиньят и плакатов с изображением лица со шрамом.

«Вы знаете, как они говорят, что ничего не остается неизменным, кроме изменений?» — сказал Деронда. «Где это? Я не вижу изменений».

«Все может измениться и остаться прежним», — сказал Исайя.

Они подходили к Капри, жилому комплексу в восьмой секции. Согласно правилам HUD, вы могли жить там только в том случае, если стоимость ваших банковских счетов, портфеля акций и владений недвижимостью не превышала пятидесяти процентов среднего дохода в этом районе, что составляло около сорока тысяч плюс-минус. Список ожидания был длинным.

Группа Sureños Locos 13 Ист-Сайда висела на полосе травы возле входа, в месте, выбранном с осторожностью. Там была невысокая стена из шлакоблоков для укрытия и банановые пальмы, чтобы спрятать ремни.Многие родственники находились в окружном изоляторе из-за хранения оружия. Большинство Локо были подростками, но настоящие хардкорные убийцы, сегодня все в униформе. Мешковатые шорты, большие белые футболки или футбольные майки и немного красного. Браслет, кепка, флаг, свисающий из кармана. Красный был их цветом.

«Проверьте это», — сказала Деронда, указывая подбородком на «Локо», пьющего из бутылки Миллера на сорок унций, которая выглядела как моча. «Как он может быть кем-нибудь, кроме как проклятым преступником с печатью Locos 4 Life на его лбу?»

Локо знали, кто такой Исайя, но из принципа подбрасывали знамения и несли всякую чушь.Один вато с сеткой для волос на лысой голове преувеличенно кивал. «Это больше не твой капюшон, эсе», — сказал он. «Давай, черт возьми». Исайя смотрел на него ни испуганно, ни непочтительно. Он вырос с некоторыми из OG, но эти молодые люди не заботились ни о чем. Если бы ты не был Локо, ты был жертвой.

В камере Исайи загудело. Он проверил номер и заколебался. Некоторые люди были похожи на старичков, которых вы слышите по радио, они напоминали о другом времени, другом месте и о том, кем вы были тогда.Звук голоса Додсона и ритм его речи пробудили в глубине его сердца тушеную массу воспоминаний. В последний раз они говорили на похоронах Мозика, но прошло день или два, прежде чем изо рта улетучился обожженный привкус.

«Кто это?» — сказал Деронда. «Это девушка, не так ли?»

Исайя подумал о том, чтобы отправить звонок прямо на голосовую почту, но если Додсон что-то хотел, он продолжал звонить и, возможно, появлялся в кроватке. Он поставил звонок на громкоговоритель.«Эй, — сказал он.

«Что, Исайя?» — сказал Додсон. «Это было чертовски долго. Я не видел тебя с тех пор, как мы положили Мозик в покой. Это был печальный печальный день, не так ли? Плохой ниггер, каким он был, я всегда думал, что он умрет от меч и что происходит? Мальчик выигрывает Trifecta в Санта-Аните, едет к Рафаэлю, чтобы купить травку, и его сбивает поезд Amtrak. Просто идет, чтобы показать вам, удача бьет деньги в любой день недели. Тебе повезло деньги будут искать тебя «.

Деронда закатила глаза и сказала: «О нет, это Додсон?»

«Да, это Хуанель Додсон, и, судя по хриплому голосу, вы, должно быть, Деронда.«

«Почему ты не в суставе?»

«У меня нет причин участвовать в совместной деятельности. Моя преступная деятельность ушла в прошлое. Теперь я законный бизнесмен, и это не значит, что это вам неважно. Может быть, если бы вы сосредоточились больше на собственном сожалении … В такой заднице, возможно, вы занимаетесь чем-то более продуктивным, чем хлопанье попой в «Канди Кейн» ».

«Вы все еще продаете им утомленные поддельные сумки Gucci из багажника своей машины?»

«Нет, я раздаю их бесплатно, как твою утомленную поддельную киску.«

Не в настроении для десятиминутного обмена мнениями, Исайя сказал: «Что происходит, Додсон?»

«То, что происходит, — это дело», — сказал Додсон. «Возможность помочь нуждающемуся и, возможно, спасти жизнь».

«Ага?» — сказал Исайя. Он пожалел о словах, как только они сорвались с его уст. Он говорил снисходительно, но ничего не мог с собой поделать. Он чувствовал, как Додсон сдерживается, желая назвать его наглым ублюдком с невероятно большим мозгом.

«Клиент хочет поговорить с вами», — сказал Додсон.«У него есть деньги, в отличие от большинства ваших людей. Я слышал, что Ватрис Коулман заплатила вам черничными маффинами, которые она купила в магазине».

«У меня нет времени для другого дела», — сказал Исайя.

«Давай встретимся где-нибудь, порубим».

«Я сказал, что у меня нет времени».

«Я не прошу тебя уделить мне время, я прошу пять гребаных минут, чтобы выслушать меня».

«Мне пора.»

«Идти? Куда?»

«Вдали от тебя», — сказал Деронда.«Он толкает тебя к обочине, идиот».

«Увидимся позже», — сказал Исайя. Когда он закончил разговор, он услышал, как Додсон сказал: «Иди на хуй, Исайя».

Белый пикап был припаркован в красной зоне напротив школы. Офицер Мартинес остановил свой крейсер позади него, гадая, не заметил ли парень табличку с надписью «ПАРКОВКА В КРАСНОЙ ЗОНЕ НЕТ».

Что такое донк и как его построить?

Мы предполагаем, что ваш первый вопрос: «Что за херня?» Поясним.

В частности, «донк» — это прозвище модифицированных автомобилей Chevrolet Caprice или Impala 1971-76 годов. Многие люди ошибочно используют его для описания любого нестандартного автомобиля с большими колесами. Чтобы было ясно, яркие колеса не требуются, но если вы хотите остановить шоу, они определенно помогут.

Никто не знает, откуда взялся этот термин. Некоторые ссылаются на логотип Impala, который чем-то похож на осла. Другие клянутся, что когда задняя часть Chevy поднимается и подпрыгивает, это напоминает им вьючное животное.Третьи говорят, что это от жаргонного термина, обозначающего, кхм, женскую задницу. Мы предоставим вам право решать.

По словам Томаса, Z06 Donk может обогнать Z06 Corvette. У нас нет причин сомневаться в нем.

Клинт Дэвис

Эта тенденция зародилась в 1990-х годах в Южной Флориде и с тех пор распространилась по всей стране. У Donks теперь есть специализированные магазины, клубы и автосалоны по всей территории США, и эта тенденция не замедляется, по словам Рэнди Кабреры, президента Riding Clean, производственной компании, которая завершает работу над фильмом на эту тему DONKumen-tary.

«Раньше в тренде была высота, а термин был« высокие », — говорит Кабрера. «Теперь все о чистоте. Все установлено заподлицо ».

Итак, давайте построим его.

Для начала нам нужно найти машину. Поиск на eBay Motors принесет вам массу результатов: более дешевые автомобили-доноры начинаются примерно с 7000 долларов. Готовые донки стоят до 30 000 долларов, а некоторые автомобили в сборе затмевают 100 000 долларов.

«Раньше в тренде была высота, а термин« высокие стояки », — говорит Кабрера.«Теперь все о чистоте. Все установлено заподлицо ».

Чистая езда / Рэнди Кабера

«Вам нужно что-то чистое с хорошей основой», — говорит Сейдж Томас, он же Донкмастер, из компании In and Out Customs в Чарльстоне, Южная Каролина. «Вы не хотите того, что лежит на земле годами».

У Томаса есть шестизначный кабриолет Chevrolet Caprice 1971 года, известный как Z06 Donk из-за его трансмиссии (LS7), интерьера и тормозов, полученных от американского спортивного автомобиля.Томас сам делал эти типы сборки таким же способом, как и большинство других: методом проб и ошибок. Теперь он проводит большую часть своего времени, путешествуя по стране, распространяя добрые слова и занимаясь драг-рейсингом, когда настроение поражает. Его донк Z06 с турбонаддувом может обогнать своего тезку на дистанции в четверть мили с 9,80 E.T.

Далее нам нужны колеса. Их выпускают многие популярные производители, в том числе Forgiato, Asanti и Lexani, размером до 32 дюймов. Tire Rack настроит вас; так будет CARiD и AutoAnything.Цены варьируются от 1000 до 3000 долларов за набор, но, опять же, эти вещи могут взлететь до небес.

Отделка Z06 простирается от моторного отсека до салона.

Клинт Дэвис

После выбора колеса нет предела. Эти автомобили иногда имеют расширенные (также называемые трубчатыми) колесные арки для большего зазора, и их можно направлять — там, где пол вырезан, а кузов опускается вокруг рамы, — окрашивать, переобивать и / или приводить в действие.

Донкмастер вложил 60 000 долларов только в трансмиссию своего автомобиля.

И это самое главное, что нужно делать самому. Так же, как японские тюнеры, гигантские пикапы и разбомбленные крысиные удилища, у донков есть свои поклонники и недоброжелатели. Но когда вы делаете это сами, вы делаете это и для себя. Это означает, что если вы хотите получить красную краску как конфетно-яблочно-красный, сделайте это. Если вам нужны 20-дюймовые диски, 24, 32 или 13, вы тоже можете это сделать. Медленный или быстрый, яркий или простой, пикантный или плавный — все это хорошо.Только не называйте это дураком, если это не Chevy, выпущенный между 71 и 76 годами.

Знатоки это ненавидят.

Эта статья впервые появилась в номере журнала Autoweek от 6 марта. Получите подписку здесь.

Этот контент создается и поддерживается третьей стороной и импортируется на эту страницу, чтобы помочь пользователям указать свои адреса электронной почты. Вы можете найти больше информации об этом и подобном контенте на пианино.io

Ide Cock волосатое порно видео @ Letmejerk.com

HD Darkx лена пол любит глубокую глотку и трахает огромный член

10:00 30.9k Просмотров 60%

HD Darkx Cadence Lux Deep Throated Темный оттенок Pecker Dry

07:30 53.6k Просмотров 100%

Блонди жаждет свежего члена

03:00 154 Просмотров 0%

HD Darkx очень первый темный член Liza Rowe

07:30 80k Просмотров 0%

HD Сногсшибательная итальянская красотка получает эротику с толстым членом

07:30 665 Visualizzazioni 62%

HD Privateblack Victoria неиспорченной получает задницу прибитый чернокожим членом

11:00 10.7k Visualizzazioni 100%

Ичика толстый кувшин китайский мед получает небритую пизду раскрывается и жестко избивается

10:27 8.8k Просмотров 100%

Рейна Ёси в туфлях на высоком каблуке получает минет в горло и в шерстяной раскаленной коробке

10:09 12.7k Просмотров 0%

Reina Yoshii на шпильках получает минет в горло и в шерстяной шипящей коробке

10:09 3k Visualizzazioni 0%

Ичика толстый сиськастый японский красотка получает пушистую кутчи растягивается и трахается жестко

10:27 1.8k Visualizzazioni 100%

HD Здоровенная вкусная киска .. кричащий большой черный член .. написав свое имя на этом мужском мясе

02:17 2.5k Просмотров 100%

Милая блондинка избита темной колбасой из мандинго

17:20 2.3k Просмотров 0%

Шерстяной красавчик берет черную мясную трубку

05:23 36 Просмотров 82%

Покрытая мехом красотка получает мою офигенно розовую сигару

05:07 173 Просмотров 74%

HD Молочный монстр салями старый вождь соблазняет шерстистого подростка гвоздь

20:11 2.3k Visualizzazioni 63%

HD Покрытая мехом Мэри Калиси опустошена толстой темной брючной змеей

08:28 556 Visualizzazioni 92%

HD Неопытная жена рельсы небритый стояк с влажной меховой покрытой щелью

00:45 400 Visualizzazioni 62%

Огромные шары дези сперма-дробовик жадная жена кончает с щекоткой пальцами в пушистой киске.

02:50 1k Просмотров 63%

HD Покрытая мехом киска бабушки встречает молодой укол

05:58 135 Просмотров 66%

Маленькая небритая смешанная неопытная красотка принимает молочный укол

10:10 67 Просмотров 100%

HD Ударяя подругу по ее заднице с моим жестким мехом, покрытым клювом

03:01 186 Просмотров 87%

Симпатичная бобовая блондинка трахнута меховым парнем с огромным леденцом на палочке

00:49 244 Visualizzazioni 94%

HD Его пушистая подруга мама Fellates и рельсы сосиски

06:02 239 Visualizzazioni 100%

HD Пышная красотка перила папины мясо и принимает огромный внутренний кончил

09:55 261 Visualizzazioni 73%

HD Мать-подросток глубоко заглатывает мой шерстяной стержень и берет на себя ответственность за мою огромную большую жопу

02:21 142 Просмотров 62%

Большой стояк в ее маленьком небритом анальном отверстии

05:45 0 Просмотров 63%

Большой кончил насос в ее маленьком покрытом мехом анальном отверстии

05:45 62 Просмотров 84%

Очаровательно покрытый мехом Couger берет клюшку и получает пудинг

24:21 0 Просмотров 74%

HD Быстрое индийское гладко выбритое зубило

01:11 3.2k Visualizzazioni 100%

HD Teensloveblackcocks Заблокированный подросток имеет полезного соседа с большим черным членом

08:07 13.3k Просмотров 0%

HD Злая адрия чечик любит офигенное мясо человека

05:54 8 Просмотров 69%

Тук-тук патруль огромный молочный человек мясные отвесы супер-милая пухлая тайская мамочка

13:44 2.3k Просмотров 0%

HD Лена Пол и Уитни Райт делятся колбасой парня Натана Рэда

16:25 3.4k Visualizzazioni 67%

HD Teensloveblackcocks подросток моет машину для какого-то здоровенного темного говяжьего свистка

08:22 844 Visualizzazioni 100%

HD Тук-тук патруль молочно-говяжий свисток долбит симпатичную тайскую медовую киску и дырочку

13:26 942 Visualizzazioni 74%

HD Небритую кучу инари вачс вспахали в многорасовом сексе

11:42 147 Просмотров 94%

John Holmes Ginormous Pecker Двухрасовый трехсторонний

10:08 1.9k Visualizzazioni 64%

HD Маленькую темноволосую юную красотку райли рейд трахнул гигантский дробовик

08:00 616 Visualizzazioni 83%

HD Povbitch El Storm получают большие взрывы спермы на ее шерстистой молодой куче

15:33 104 Просмотров 77%

HD Lyra получает жесткий трах в задницу после полоскания горла массивной розовой сигарой

07:37 203 Visualizzazioni 68%

HD Покрытая мехом мумия в жопу

21:34 972 Visualizzazioni 100%

HD Грязной мачехе сейчас нужна мужская колбаса

05:53 184 Просмотров 84%

HD Вызывающе молодой получает ее шерстяной горшок разорвал

11:19 429 Visualizzazioni 65%

Худощавый темноволосый бродяга мастурбирует с моего рока рок жесткий кончил

10:09 0 Просмотров 77%

HD Джоди Тейлор и мать борются из-за жесткости

07:26 375 Visualizzazioni 87%

Палящий мед пропустил трубку

11:00 45 Просмотров 67%

HD Трайк патруль филиппинка красотка берет поток через ее задницу из молочной ебли

13:49 50 изображений 84%

HD Личная негритянская горячая блондинка Alexis Crystal задница засадила большим черным членом

11:00 732 Visualizzazioni 79%

DJ SHOULD DIE — VITA ALVIA Remix version (официальное музыкальное видео)

DJ SHOULD DIE — VITA ALVIA Remix version (официальное музыкальное видео) — Archytele

Мы используем файлы cookie на нашем веб-сайте.Некоторые из них очень важны, а другие помогают нам улучшить этот веб-сайт и улучшить ваш опыт.

Принять все

Сохранить

Принимать только необходимые файлы cookie

Индивидуальные настройки конфиденциальности

Подробная информация о файлах cookie Политика конфиденциальности Отпечаток

Предпочтение конфиденциальности

Здесь вы найдете обзор всех используемых файлов cookie.Вы можете дать свое согласие на использование целых категорий или отобразить дополнительную информацию и выбрать определенные файлы cookie.

Имя Borlabs Cookie
Провайдер Владелец этого сайта
Назначение Сохраняет предпочтения посетителей, выбранные в поле cookie файла cookie Borlabs.
Имя файла cookie borlabs-cookie
Срок действия cookie 1 год
.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *